PCR(PolymeraseChainReaction)是一種復制核酸片段并提高DNA產量的技術,即所謂的聚合酶鏈式反應,這種技術可以在數(shù)小時內大量復制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特異性的特點,PCR技術被應用在寵物疾病分子的診斷上,將從疑似患病寵物(血液、眼鼻分泌物、糞便,尿液或腹水)中采樣的極微量病原(細菌、病毒或寄生蟲)特定核酸片段樣本,透過PCR的方式大量被復制,再以核酸電泳的方式判讀結果,從而獲得早期、快速、穩(wěn)定和準確的診斷結果.在寵物醫(yī)療中,目前病毒檢測主要包括膠體金檢測(試紙)和PCR檢測。蘇州寵物PCR技術在動物疫病檢測的應用
巧亦捷核酸檢測一體機有以下幾點優(yōu)勢:1:全自動核酸提取:<1分鐘的手工操作時間:巧亦捷核酸一體機內部可自動進行封閉式核酸提取,使得整體手工操作時間小于1分鐘,較為小化人為干預帶來的操作誤差,是市面上自動化程度比較高的多重病原體解決方案。2、準確、靈敏的創(chuàng)新核酸檢測針對不同的樣本,可以準確地實現(xiàn)從樣本到結果的判讀,可以處理全血、血清、血漿、糞便、體液、分泌物等各種樣本,實現(xiàn)醫(yī)學界公認的高特異性、高敏感性核酸檢測3、一份樣本多重檢測基于實時熒光定量PCR技術的多種綜合癥檢測系統(tǒng),一份樣本較為多可以同時檢測多種病原體,這一特性賦予該系統(tǒng)優(yōu)越多樣性的檢測和應用,也便于快速進行多種疾病的同時檢測和管理蘇州便攜式PCR檢測方法巧亦捷核酸檢測一體機的靈敏性和特異性上的優(yōu)勢,像犬貓的呼吸道、消化道和貧血等疾病的診斷和鑒別診斷。
目前市面上有很多PCR儀器,一時間讓獸醫(yī)師無從選擇,但大多數(shù)都是PCR擴增儀,即需要人工進行核酸提取和純化。他們都有以下痛點:1、核酸提取和純化的操作麻煩并且需要專業(yè)的技術人員和場地,有些還需要配置高速離心機,人工核酸提取需要30~40分鐘并容易導致污染。2、人工反復開蓋加入或倒出試劑,容易導致人為和氣溶膠污染,導致結果不準確。因此針對寵物醫(yī)院來說,需要一臺集核酸提取、純化和擴增為一體的全自動核酸檢測儀。能更好的控制人工成本及試劑成本。
巧亦捷(ingeNova)是翊新診斷技術(蘇州)有限公司旗下專注于動物體外診斷檢測的產品品牌,以翊新診斷全資子公司——蘇州翊創(chuàng)生物科技有限公司為主體。巧亦捷系列產品覆蓋了貓呼吸道疫病檢測、貓消化道疫病檢測、犬消化道疫病檢測、寄生蟲等寵物核酸檢測,非洲豬瘟、藍耳等豬病核酸檢測,牛逼支、牛腹瀉等牛羊類食品動物的核酸檢測,人畜共患病核酸檢測,以及魚蝦等水生動物的核酸檢測。全自動薄膜微流控核酸檢測一體機是巧亦捷系列產品的主打檢測平臺,巧亦捷基于此平臺技術致力于為客戶提供快速、精確的動物疫病診斷整體解決方案。翊新診斷技術(蘇州)有限公司由微流控技術領域國際**周朋博士創(chuàng)立。公司依托先進的薄膜微流控技術開發(fā)一體化、智能化的快速、便捷的POCT體外分子診斷解決方案。針對動物疫病的早期診斷,公司以市場需求為出發(fā)點,開發(fā)出了低成本、無污染、能夠實現(xiàn)真正意義上“全自動,全封閉,樣本進,結果出”的薄膜微流控芯片技術和可以用于動物疫病現(xiàn)場快速診斷的分子檢測系統(tǒng),從而為動物疫病的現(xiàn)場診斷提供更加便利的檢測手段。目前已開發(fā)非洲豬瘟檢測、寵物呼吸道多聯(lián)檢測、寵物消化道多聯(lián)檢測等多種試劑及檢測方案。許多寵物醫(yī)生表示自己在工作中已經離不開PCR儀的幫助了。
巧亦捷核酸一體機采用的TaqMan探針法介紹:TaqMan探針法是具有高度特異性的定量PCR技術。它的工作原理是在PCR反應體系中存在一對PCR引物和一條探針,探針的5′端標記有報告基團,3′端標記有熒光淬滅基團,探針只與模板特異結合,其結合位點在兩條引物之間。當探針完整的時候,報告基團的熒光能量被淬滅基團吸收,所以儀器搜集不到信號,隨著反應的進展,Taq酶遇到探針,利用3′→5′外切核酸酶的活性把探針切斷,導致報告基團的熒光能量不能被淬滅基團吸收,產生了熒光信號,因此信號的強度就代、表了模板DNA的拷貝數(shù)。巧亦捷核酸一體機配套檢測試劑覆蓋動物診療中常見的犬、貓、豬、牛、水產等病原體核酸檢測。蘇州便攜式PCR檢測方法
巧亦捷是翊新診斷全力打造的、服務于動物體外診斷的產品品牌。蘇州寵物PCR技術在動物疫病檢測的應用
PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)的作用下,由一對特異性引物經熱變性-退火-延伸反應,三個不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴增到多量的一種體外DNA擴增技術。在反應體系內,以一對人工合成的寡核苷酸作為擴增引物,第一步,模板DNA變性,以構成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,目的基因作為模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經過80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經PCR擴增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,模板DNA與引物退火(復性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,引物與模板DNA單鏈互補配對。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物結合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP為反應原料半保留復制合成一條新的模板DNA鏈。這三個步驟為一個循環(huán),2-4分鐘即可完成一個循環(huán),2-3小時就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復制到幾百萬倍,從而實現(xiàn)對靶DNA的放大。由于擴增堿基序列按照靶DNA復制,因此PCR反應具有高度特異性。蘇州寵物PCR技術在動物疫病檢測的應用
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