PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)的作用下,由一對特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng),三個不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴增到多量的一種體外DNA擴增技術(shù)。在反應(yīng)體系內(nèi),以一對人工合成的寡核苷酸作為擴增引物,第一步,模板DNA變性,以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,目的基因作為模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,模板DNA與引物退火(復(fù)性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,引物與模板DNA單鏈互補配對。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈。這三個步驟為一個循環(huán),2-4分鐘即可完成一個循環(huán),2-3小時就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬倍,從而實現(xiàn)對靶DNA的放大。由于擴增堿基序列按照靶DNA復(fù)制,因此PCR反應(yīng)具有高度特異性。巧亦捷全自動核酸檢測一體已實現(xiàn)覆蓋貓、犬腸道類、呼吸道類、血液類、人畜共患類等多種病原體的診斷。分子檢測PCR技術(shù)在動物疫病檢測的應(yīng)用
開展動物疫病檢測,有利于及時明確動物病因及根源所在,降低疫病發(fā)生率,提高診療效果,促進養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展??梢詫游镆卟∑鸬筋A(yù)防作用,真正準(zhǔn)確分析當(dāng)前動物疫病的流行特征及其可能對周邊造成的危害。提高動物產(chǎn)品質(zhì)量,使人們的食品安全得到盡可能的保障?,F(xiàn)階段主流的動物疫病檢測方法主要有傳統(tǒng)檢測、血清學(xué)檢測和核酸檢測。核酸檢測作為動物疫病檢測中常用的方法之一,具有實驗周期短、靈敏度高、特異性強、實時定量等優(yōu)勢。蘇州寵物醫(yī)院PCR儀器哪家好巧亦捷核算檢測一體機從樣本處理開始,所有檢測項目可在30-60分鐘完成,自動生成報告,檢測效率極大提高。
巧亦捷推出的核酸檢測一體機可以實現(xiàn)多種聯(lián)檢,比如貓的呼吸道有癥狀,可能傳染原因包括皰疹病毒、衣原體、支原體等,到底是哪種情況?其實醫(yī)生很難判斷,通過多重PCR檢測試劑,可提高檢出率,降低操作復(fù)雜度。不需要一個病原一個病原去測,一個反應(yīng)就可以把3種病原同時檢測。極大減少了獸醫(yī)師的檢測時間及檢測成本。且巧亦捷核酸一體機的設(shè)計,可有效避免PCR擴增時可能產(chǎn)生的污染,因為其實PCR基于本身原理,敏感性很高,實際上大多數(shù)污染產(chǎn)生于擴增過程中,比如說,在擴增過程中造成PCR體系泄漏,就會比較嚴(yán)重,而通過薄膜微流控技術(shù),全封閉的檢測試劑及檢測過程,可比較大限度減少污染。
巧亦捷核酸檢測一體機的特異性及靈敏度可達99%以上,使用的PCR熒光探針技術(shù)不但可以檢測出病毒的種類,更可以檢測出樣品里100個/ul數(shù)量級的病毒數(shù)量,可謂特異性極強,準(zhǔn)確度極高!若檢測出有病毒,但沒有發(fā)病也要引起重視,因為檢測的病毒是一些對動物機體傷害極大的病毒,或者是人畜共患病,雖然現(xiàn)在沒有發(fā)病,并不表明以后不會發(fā)病,如果任其在體內(nèi)發(fā)展,等到病毒繁殖到一定的數(shù)量后,或者機體的抵抗力突然下降,也許就會發(fā)生災(zāi)難性的爆發(fā),對動物造成極大的傷害。巧亦捷核酸一體機針對不同傳染病的檢測效果相同。不存在免疫學(xué)方法中出現(xiàn)的貓類檢測試紙卡效果不佳的情況。
在寵物醫(yī)院,往往沒有專業(yè)的實驗環(huán)境與PCR分區(qū),樣本中病原體污染、PCR反應(yīng)后產(chǎn)物污染都是會很影響PCR結(jié)果,導(dǎo)致假陽性的出現(xiàn),其中PCR產(chǎn)物污染是導(dǎo)致化驗室環(huán)境污染**主要的因素(PCR反應(yīng)中DNA的復(fù)制是指數(shù)級的增長)。而選擇不善于處理低濃度樣本與復(fù)雜樣本的提取方法,導(dǎo)致核酸提取不完全或者在**1后PCR反應(yīng)中存在抑制物,污染PCR反應(yīng),則會導(dǎo)致漏檢,產(chǎn)生假陰性。這些都是在核酸檢測過程中需要注意的點。巧亦捷PCR反應(yīng)系統(tǒng)采用磁珠法核酸提取純化加熒光探針PCR方法,整機一體化,實現(xiàn)一機提取加擴增,減少人工操作與培訓(xùn)時間,輕松上手。避免污染。寵物醫(yī)療服務(wù)包括為寵物提供疾病診療和日常保健服務(wù),是寵物行業(yè)中*次于寵物食品的第二大細分行業(yè)。分子檢測PCR技術(shù)在動物疫病檢測的應(yīng)用
巧亦捷希望能更好的去為每一只動物提供專業(yè)的檢測服務(wù)。分子檢測PCR技術(shù)在動物疫病檢測的應(yīng)用
巧亦捷在今年上半年推出的全自動薄膜微流控快速核酸檢測一體機是收益診斷領(lǐng)域市面上為數(shù)不多的全自動核酸檢測儀器,它可以自動完成繁瑣的核酸提取和PCR擴增部分。且檢測全程為全封閉,避免人為干擾,消除人和實驗室的污染,降低對實驗室環(huán)境的高要求。真正做到了“樣本經(jīng),結(jié)果出”,巧亦捷希望憑借薄膜微流控平臺,進一步促進動物檢測和診斷的水平,提升系統(tǒng)完善的寵物疾病檢測綜合解決方案,在推動全自動分子診斷平臺在寵物醫(yī)院應(yīng)用的同時,不斷研發(fā)更多更好的動物創(chuàng)新診斷技術(shù)和產(chǎn)品,為動物健康提供堅實保障。分子檢測PCR技術(shù)在動物疫病檢測的應(yīng)用