PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)的作用下,由一對(duì)特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng),三個(gè)不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴(kuò)增到多量的一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。在反應(yīng)體系內(nèi),以一對(duì)人工合成的寡核苷酸作為擴(kuò)增引物,第一步,模板DNA變性,以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,目的基因作為模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,模板DNA與引物退火(復(fù)性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,引物與模板DNA單鏈互補(bǔ)配對(duì)。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈。這三個(gè)步驟為一個(gè)循環(huán),2-4分鐘即可完成一個(gè)循環(huán),2-3小時(shí)就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬倍,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)靶DNA的放大。由于擴(kuò)增堿基序列按照靶DNA復(fù)制,因此PCR反應(yīng)具有高度特異性。其實(shí)PCR在技術(shù)上仍有突破空間,巧亦捷核酸檢測(cè)一體機(jī)已可以實(shí)現(xiàn)多重檢測(cè)。江蘇結(jié)核PCR動(dòng)物疫病
巧亦捷推出的核酸檢測(cè)一體機(jī)可以實(shí)現(xiàn)多種聯(lián)檢,比如貓的呼吸道有癥狀,可能傳染原因包括皰疹病毒、衣原體、支原體等,到底是哪種情況?其實(shí)醫(yī)生很難判斷,通過多重PCR檢測(cè)試劑,可提高檢出率,降低操作復(fù)雜度。不需要一個(gè)病原一個(gè)病原去測(cè),一個(gè)反應(yīng)就可以把3種病原同時(shí)檢測(cè)。極大減少了獸醫(yī)師的檢測(cè)時(shí)間及檢測(cè)成本。且巧亦捷核酸一體機(jī)的設(shè)計(jì),可有效避免PCR擴(kuò)增時(shí)可能產(chǎn)生的污染,因?yàn)槠鋵?shí)PCR基于本身原理,敏感性很高,實(shí)際上大多數(shù)污染產(chǎn)生于擴(kuò)增過程中,比如說,在擴(kuò)增過程中造成PCR體系泄漏,就會(huì)比較嚴(yán)重,而通過薄膜微流控技術(shù),全封閉的檢測(cè)試劑及檢測(cè)過程,可比較大限度減少污染。多重PCR儀器哪家好巧亦捷薄膜微流控全自動(dòng)核酸檢測(cè)平臺(tái)將成為我們保護(hù)毛孩健康的重要利器。
巧亦捷核酸檢測(cè)一體機(jī)有以下幾點(diǎn)優(yōu)勢(shì):1:全自動(dòng)核酸提取:<1分鐘的手工操作時(shí)間:巧亦捷核酸一體機(jī)內(nèi)部可自動(dòng)進(jìn)行封閉式核酸提取,使得整體手工操作時(shí)間小于1分鐘,較為小化人為干預(yù)帶來的操作誤差,是市面上自動(dòng)化程度比較高的多重病原體解決方案。2、準(zhǔn)確、靈敏的創(chuàng)新核酸檢測(cè)針對(duì)不同的樣本,可以準(zhǔn)確地實(shí)現(xiàn)從樣本到結(jié)果的判讀,可以處理全血、血清、血漿、糞便、體液、分泌物等各種樣本,實(shí)現(xiàn)醫(yī)學(xué)界公認(rèn)的高特異性、高敏感性核酸檢測(cè)3、一份樣本多重檢測(cè)基于實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的多種綜合癥檢測(cè)系統(tǒng),一份樣本較為多可以同時(shí)檢測(cè)多種病原體,這一特性賦予該系統(tǒng)優(yōu)越多樣性的檢測(cè)和應(yīng)用,也便于快速進(jìn)行多種疾病的同時(shí)檢測(cè)和管理
在寵物醫(yī)院,往往沒有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境與PCR分區(qū),樣本中病原體污染、PCR反應(yīng)后產(chǎn)物污染都是會(huì)很影響PCR結(jié)果,導(dǎo)致假陽(yáng)性的出現(xiàn),其中PCR產(chǎn)物污染是導(dǎo)致化驗(yàn)室環(huán)境污染**主要的因素(PCR反應(yīng)中DNA的復(fù)制是指數(shù)級(jí)的增長(zhǎng))。而選擇不善于處理低濃度樣本與復(fù)雜樣本的提取方法,導(dǎo)致核酸提取不完全或者在**1后PCR反應(yīng)中存在抑制物,污染PCR反應(yīng),則會(huì)導(dǎo)致漏檢,產(chǎn)生假陰性。這些都是在核酸檢測(cè)過程中需要注意的點(diǎn)。巧亦捷PCR反應(yīng)系統(tǒng)采用磁珠法核酸提取純化加熒光探針PCR方法,整機(jī)一體化,實(shí)現(xiàn)一機(jī)提取加擴(kuò)增,減少人工操作與培訓(xùn)時(shí)間,輕松上手。避免污染。PCR技術(shù)又可以分為定量PCR和常規(guī)PCR,定量PCR分為實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)和數(shù)字PCR。
無論是由病毒、細(xì)菌,還是原蟲、寄生蟲等引起的犬貓傳染性疾病都可利用巧亦捷核酸一體機(jī)進(jìn)行診斷。即使存在于患犬或患貓?bào)w內(nèi)極少量的病原微生物,巧亦捷核酸一體機(jī)采用的PCR技術(shù)也能對(duì)病原微生物進(jìn)行上百萬倍的復(fù)制,從而達(dá)到可以被檢出的濃度,因此巧亦捷核酸一體機(jī)能對(duì)犬貓傳染病進(jìn)行準(zhǔn)確、高效的診。例如貓鼻氣管炎是由貓皰疹病毒引起的一類貓上呼吸道疾病,當(dāng)貓傳染皰疹病毒后,會(huì)表現(xiàn)出一系列的上呼吸道癥狀,但臨床尚未有成熟的快速檢測(cè)方法,用巧亦捷核酸一體機(jī)則可以快速準(zhǔn)確的得出結(jié)果。巧亦捷能夠快速準(zhǔn)確地識(shí)別病原體,為寵物的健康問題提供關(guān)鍵信息。薄膜微流控PCR儀器哪家好
寵物IVD檢測(cè)是寵物醫(yī)院必備手段,其中PCR檢測(cè)目前是ZUI準(zhǔn)確的檢測(cè)方法。江蘇結(jié)核PCR動(dòng)物疫病
巧亦捷核酸一體機(jī)采用的TaqMan探針法介紹:TaqMan探針法是具有高度特異性的定量PCR技術(shù)。它的工作原理是在PCR反應(yīng)體系中存在一對(duì)PCR引物和一條探針,探針的5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán),3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán),探針只與模板特異結(jié)合,其結(jié)合位點(diǎn)在兩條引物之間。當(dāng)探針完整的時(shí)候,報(bào)告基團(tuán)的熒光能量被淬滅基團(tuán)吸收,所以儀器搜集不到信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)展,Taq酶遇到探針,利用3′→5′外切核酸酶的活性把探針切斷,導(dǎo)致報(bào)告基團(tuán)的熒光能量不能被淬滅基團(tuán)吸收,產(chǎn)生了熒光信號(hào),因此信號(hào)的強(qiáng)度就代、表了模板DNA的拷貝數(shù)。江蘇結(jié)核PCR動(dòng)物疫病