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T細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液用途

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-10-18

血小板在身體組織修復(fù)及傷口復(fù)原的過(guò)程中扮演著重要角色。血小板裂解物是由富含血小板的血漿純化萃取而成,其中包含很多不同的細(xì)胞生長(zhǎng)因子、細(xì)胞ji su和許多細(xì)胞增殖時(shí)所需的蛋白質(zhì)。人源血小板裂解物是一種能有效支持間充質(zhì)干細(xì)胞等人類細(xì)胞生長(zhǎng)的高效細(xì)胞培養(yǎng)補(bǔ)充劑。不管是在科學(xué)研究或是臨床zhi liao,血小板裂解物時(shí)常用來(lái)取代各類血清,例如胎牛血清、人類AB血清。Stemulate和nLiven成分完整、無(wú)分解、無(wú)耗損、無(wú)異源添加物,且不會(huì)在使用過(guò)程中產(chǎn)生凝血現(xiàn)象,故不需使用肝素或任何種類的抗凝血?jiǎng)?。Stemulate和nLiven包含所有能促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的生長(zhǎng)因子和蛋白,能在真正的無(wú)異源環(huán)境中使細(xì)胞量比較大化,表現(xiàn)比其他血清補(bǔ)充劑更為突出。 血小板裂解液作為血清替代物,含有多種細(xì)胞生長(zhǎng)因子,無(wú)動(dòng)物源添加,批間差小。T細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液用途

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PL BioScience成立于2015年,是德國(guó)亞琛工業(yè)大學(xué)的一個(gè)分支機(jī)構(gòu)。2013年,他們的首席執(zhí)行官Dr.HatimHemeda從事干細(xì)胞研究:他用自己的血小板濃縮液取得了很好的結(jié)果。由于當(dāng)時(shí)沒(méi)有商用,他開(kāi)發(fā)了一種受保護(hù)的技術(shù),用于大規(guī)模生產(chǎn)人血小板裂解液,致力于為用戶提供安全和無(wú)動(dòng)物成分的細(xì)胞培養(yǎng)補(bǔ)充劑的解決辦法。PLBioScience質(zhì)量申明:PLBioScience重視客戶需求,努力為他們提供滿足甚至超越他們期望的產(chǎn)品和服務(wù)。公司的hPL來(lái)源于輸血級(jí)的血小板,在無(wú)菌條件下通過(guò)大量混合的血小板單位進(jìn)行生產(chǎn),批次和批次間的穩(wěn)定性保證了客戶可重復(fù)的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。血源的持續(xù)供應(yīng)確保客戶對(duì)于hPL獲得穩(wěn)定的供貨及價(jià)格。所有產(chǎn)品都經(jīng)過(guò)充分過(guò)濾,測(cè)試和認(rèn)證。性能好血小板裂解液細(xì)胞添加劑血小板裂解液和胎牛血清,各自有利弊,只是這些年大家對(duì)血小板裂解物的熱情比較高漲。

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人源性血小板裂解液具有快速擴(kuò)張的流行速度,很多生物技術(shù)行業(yè)公司開(kāi)始決定從胎牛血清過(guò)渡到血小板裂解液添加劑中。對(duì)于某些細(xì)胞類型和產(chǎn)品,向血小板裂解物的轉(zhuǎn)變,如Sexton的無(wú)動(dòng)物源Stemulate產(chǎn)品,帶來(lái)更高效的細(xì)胞培養(yǎng)擴(kuò)大和改善細(xì)胞表型。直到近期,血小板裂解液只能作為無(wú)任何病原減少技術(shù)的混合產(chǎn)品。在復(fù)雜的生物混合物中如血清或血小板裂解中引入PR的關(guān)鍵挑戰(zhàn)是,活性成分天生對(duì)PR技術(shù)敏感。在FBS、輻照或熱滅活產(chǎn)品性能大打折扣。為了解決這一差距,我們開(kāi)展了一個(gè)項(xiàng)目,研制一種PR處理的血小板裂解液,該裂解物可在成本降低的情況下維持恒定的性能。2018年,我們推出了nLivenPR,一種混合的人類血小板裂解物,用經(jīng)驗(yàn)證的病毒風(fēng)險(xiǎn)降低輻照步驟。

本發(fā)明涉及細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,特別涉及一種血小板裂解液的制備方法及其應(yīng)用,用于替代動(dòng)物來(lái)源的血清,為間充質(zhì)干細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)提供的營(yíng)養(yǎng)。該制備方法包括:將血小板在20~24℃振蕩保存1~5d,采用反復(fù)凍融法和超聲法進(jìn)行處理,離心,收集上清液,去除纖維蛋白,獲得血小板裂解液.本發(fā)明提供的血小板裂解液的制備方法可明顯提高血小板裂解液中細(xì)胞因子含量,且可進(jìn)行細(xì)胞因子的定量平衡,有利于減少產(chǎn)品批間的差異,可達(dá)到穩(wěn)定的促進(jìn)人源性細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。血小板裂解液的制備方法是什么?

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凍融循環(huán)后的穩(wěn)定性:對(duì)所有的血小板裂解液不建議反復(fù)凍融超過(guò)3次(包括初始解凍),次數(shù)過(guò)多會(huì)形成較多的碎片沉淀,影響性能,因此建議***次解凍時(shí)即進(jìn)行分裝。Sexton進(jìn)行了內(nèi)部研究,以檢查經(jīng)歷反復(fù)凍融循環(huán)的hPL的穩(wěn)定性。雖然數(shù)據(jù)是使用Stemulate作為測(cè)試血清收集的,但基于產(chǎn)品的相似成分和相似的放行規(guī)范標(biāo)準(zhǔn),測(cè)試結(jié)果同樣適用于nLivenPR和T-LivenPR。Sexton建議單瓶的hPL產(chǎn)品經(jīng)歷不超過(guò)三個(gè)冷凍/解凍循環(huán),包括初始解凍。內(nèi)部數(shù)據(jù)顯示,在經(jīng)過(guò)多達(dá)三個(gè)冷凍/解凍循環(huán)時(shí),pH、滲透壓、總蛋白或細(xì)胞生長(zhǎng)沒(méi)有顯著變化。然而,需要注意的是,單個(gè)單位hPL所經(jīng)歷的凍融循環(huán)次數(shù)越多,碎片形成的發(fā)生率就越高。建議客戶在其培養(yǎng)基產(chǎn)品中遇到碎片問(wèn)題時(shí)盡可能減少冷凍/解凍循環(huán)次數(shù)。此外,建議需要三次以上冷凍/解凍循環(huán)的客戶在初次解凍時(shí)進(jìn)行分裝。血小板裂解液(platelet lysate,PL)是自體或異體血小板富集物經(jīng)細(xì)胞裂解后的產(chǎn)物。美國(guó)血小板裂解液怎么使用

人源血小板裂解物除了擁有比富血小板血漿更高的生長(zhǎng)因子濃度。T細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液用途

由于在臨床中對(duì)血小板單元的需求而供體有限,因此使用新鮮的血小板單元來(lái)產(chǎn)生血小板裂解液引起了關(guān)注。過(guò)期的血小板單位可能是另一種來(lái)源,因?yàn)橛凶C據(jù)表明可以使用從過(guò)期單位獲得的血小板而不會(huì)影響終產(chǎn)品的質(zhì)量。在一個(gè)擁有380萬(wàn)居民的意大利地區(qū),2014年生產(chǎn)了大約100,000個(gè)來(lái)自單一捐贈(zèng)者的血沉棕黃層單位。其中約60%在有效期后被丟棄。考慮到50ml的平均血沉棕黃層體積,使用過(guò)期的血沉棕黃層單位可以生產(chǎn)約3000L的血小板裂解液。T細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液用途

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