MSCs在添加10% 血小板裂解液和不同濃度肝素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天,隨后使用MTT法評(píng)估增殖。脂肪組織源性間充質(zhì)干細(xì)胞(AT-MSC)和骨髓源性間充質(zhì)干細(xì)胞(BM-MSC)培養(yǎng)的過程中,如果使用的UFH濃度低于0.61 IU/mL或者使用Enoxaparin(LMWH)濃度低于0.024 mg/mL (2.4 IU/mL) 時(shí)培養(yǎng)液均呈現(xiàn)凝膠狀態(tài)(灰色背景),而肝素濃度過高則對(duì)細(xì)胞增殖的負(fù)面影響明顯且以劑量依賴的方式提高。備注肝素濃度單位換算:肝素濃度國(guó)際單位(IU)衡量,1IU國(guó)際單位是指在規(guī)定的條件下,將1ml全血延長(zhǎng)凝血3分鐘所需的量:1mg大約相當(dāng)于100IU的肝素。人源血小板裂解液除了擁有比富血小板血漿更高的生長(zhǎng)因子濃度。MSCs培養(yǎng)血小板裂解液過濾
胎牛血清(FBS)對(duì)動(dòng)物和人的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)的大規(guī)模擴(kuò)增以及細(xì)胞zhi liao的快速發(fā)展起著重要作用,但它也帶來了一些監(jiān)管和物種交叉污染等問題,并阻礙了大多數(shù)產(chǎn)品往臨床的過渡。無血清培養(yǎng)基(SFM)補(bǔ)充幾種生長(zhǎng)因子也被提出作為胎牛血清綜合征的替代方法,然而通常SFM需要根據(jù)細(xì)胞類型、來源和種類開發(fā)定制,費(fèi)時(shí)費(fèi)力。此外,SFM的高成本使其無法用于大規(guī)模細(xì)胞擴(kuò)增。因此,迫切需要找到一種基于人源的培養(yǎng)基補(bǔ)充劑。人源血小板裂解液(HPL)來自人血小板,含有類似的生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子,且與在胎牛血清中發(fā)現(xiàn)的水平相當(dāng)。目前已經(jīng)證明HPL支持各種細(xì)胞的生長(zhǎng)。本研究的重點(diǎn)是評(píng)估不需要使用肝素(PL-NH)的HPL和需要肝素(PL-H)的標(biāo)準(zhǔn)HPL在不同濃度培養(yǎng)基下支持來自不同組織的新生兒和成人間充質(zhì)干細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖的能力。無需添加肝素血小板裂解液價(jià)格多少人血小板裂解液是一種來源于人血小板的無異種源、無動(dòng)物血清的細(xì)胞培養(yǎng)基添加物。
由于在臨床中對(duì)血小板單元的需求而供體有限,因此使用新鮮的血小板單元來產(chǎn)生血小板裂解液引起了關(guān)注。過期的血小板單位可能是另一種來源,因?yàn)橛凶C據(jù)表明可以使用從過期單位獲得的血小板而不會(huì)影響終產(chǎn)品的質(zhì)量。在一個(gè)擁有380萬居民的意大利地區(qū),2014年生產(chǎn)了大約100,000個(gè)來自單一捐贈(zèng)者的血沉棕黃層單位。其中約60%在有效期后被丟棄??紤]到50ml的平均血沉棕黃層體積,使用過期的血沉棕黃層單位可以生產(chǎn)約3000L的血小板裂解液。
那么經(jīng)常有客戶會(huì)問道人血小板裂解液中的肝素的使用濃度到底如何抉擇呢?添加培養(yǎng)之前有必要花時(shí)間來優(yōu)化下這個(gè)肝素濃度參數(shù)嗎?現(xiàn)在小編通過比較了不同濃度的普通肝素(unfractionatedheparinUFH,分子量3000-30000Da)和低分子肝素(LMWH-分子量2000-12000Da)在hPL培養(yǎng)基中培養(yǎng)MSCs的增殖能力、成纖維細(xì)胞體外集落形成單位(colony-formingunit,CFU-F)、免疫表型和體外分化等情況,給大家作解答。從而幫助大家正確使用血小板裂解液。血小板裂解液的有效成分是什么?
Sexton的血小板裂解液系列產(chǎn)品使用干冰運(yùn)輸,全程確保產(chǎn)品處于凍存狀態(tài)。接收后立即儲(chǔ)存在-20°C環(huán)境中,使用的時(shí)候必須使用37°C水浴解凍,而非4°C冰箱或室溫解凍方法,否則會(huì)產(chǎn)生更多碎片,影響性能。對(duì)于不立即使用的整瓶/袋解凍的血小板裂解液產(chǎn)品,建議將剩余體積制備成一次性使用的等分試樣。在滿足生物血清相容性和低溫要求的條件下,可以使用錐形管或較小的瓶子進(jìn)行等分儲(chǔ)存。等分試樣的制備將減少血小板裂解液產(chǎn)品的冷凍/解凍循環(huán)。 血小板裂解液和胎牛血清,各自有利弊,只是這些年大家對(duì)血小板裂解物的熱情比較高漲。性能好血小板裂解液中國(guó)代理權(quán)
哪個(gè)品牌的血小板裂解液性價(jià)比高?MSCs培養(yǎng)血小板裂解液過濾
相比之下,我們開發(fā)了一個(gè)專有的制造工藝,使我們的血小板裂解液可使用電子束處理。重要的是經(jīng)輻照的產(chǎn)品被發(fā)現(xiàn)保存了輻照前的產(chǎn)品功效,圖顯示了未經(jīng)處理的hPL(Stemulate)和電子束處理的hPL(nLivenPR)和伽馬處理的FBS對(duì)細(xì)胞增殖的影響。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生長(zhǎng)在模擬或***中生長(zhǎng),始終顯示與傳統(tǒng)方法相比,維持細(xì)胞的穩(wěn)健擴(kuò)張,輻照FBS的生長(zhǎng)速度要慢得多。A-MSCs結(jié)果類似結(jié)果,已經(jīng)為我們的許多客戶已過渡到輻照版本的血小板裂解液。MSCs培養(yǎng)血小板裂解液過濾
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