MSCs在添加10%血小板裂解液和不同濃度肝素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天，隨后使用MTT法評(píng)估增殖。脂肪組織源性間充質(zhì)干細(xì)胞（AT-MSC）和骨髓源性間充質(zhì)干細(xì)胞（BM-MSC）培養(yǎng)的過(guò)程中，如果使用的UFH濃度低于0.61IU/mL或者使用Enoxaparin（LMWH）濃度低于0.024mg/mL(2.4IU/mL)時(shí)培養(yǎng)液均呈現(xiàn)凝膠狀態(tài)（灰色背景），而肝素濃度過(guò)高則對(duì)細(xì)胞增殖的負(fù)面影響明顯且以劑量依賴的方式提高。備注肝素濃度單位換算：肝素濃度國(guó)際單位(IU)衡量，1IU國(guó)際單位是指在規(guī)定的條件下，將1ml全血延長(zhǎng)凝血3分鐘所需的量：1mg大約相當(dāng)于100IU的肝素。 血小板裂解液是由富含血小板的血漿純化萃取而成，包含很多不同的細(xì)胞生長(zhǎng)因子.賽多利斯血小板裂解液等級(jí)

血小板中含有很多不同的細(xì)胞生長(zhǎng)因子，包括PDGF,VEGF，EGF等，實(shí)踐證明，血小板分泌的細(xì)胞生長(zhǎng)因子能夠?qū)Χ喾N細(xì)胞起到支持生長(zhǎng)的作用，可以完全替代胎牛血清（FBS）甚至于在支持一些細(xì)胞培養(yǎng)的效果上優(yōu)于FBS。本產(chǎn)品是將多人份濃縮血小板混合后裂解而成，產(chǎn)品均一性好，經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格安全性有效性質(zhì)量檢控。人血小板裂解液能夠支持包括間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化，成脂分化，造血干細(xì)胞以及誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞的生長(zhǎng)等。是這些細(xì)胞公認(rèn)的動(dòng)物源血清替代品。 GMP等級(jí)血小板裂解液的主要成分用血液里的血小板濃縮物反復(fù)冷凍、解凍和超聲處理可制備成人血小板裂解液。

間充質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞(MSCs)體外擴(kuò)增的培養(yǎng)基一般添加胎牛血清FBS，但是考慮到異種傳染及免疫反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)，監(jiān)管機(jī)構(gòu)并不鼓勵(lì)使用。人血小板裂解液除了不存在異種免疫反應(yīng)或牛病原體傳染的風(fēng)險(xiǎn)，有助于增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞的擴(kuò)增，也相對(duì)容易地根據(jù)良好的生產(chǎn)規(guī)范程序生產(chǎn)，并已用于臨床應(yīng)用，因此現(xiàn)如很多資料顯示血小板裂解液已被證明是擴(kuò)增MSCs一種非常有效的FBS替代方法（參考文獻(xiàn)1）。 血小板裂解液由血漿組成，含有纖維蛋白原和凝血因子，對(duì)于一般細(xì)胞培養(yǎng)中涉及的含鈣培養(yǎng)基來(lái)說(shuō)通常需要加入抗凝劑（常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等）來(lái)防止凝膠形成，其中肝素較為常用。

使用胎牛血清（FBS）和MSC的離體擴(kuò)增其他動(dòng)物衍生的已氣餒由監(jiān)管機(jī)構(gòu)，以減少發(fā)送朊病毒和其他動(dòng)物傳染病的危險(xiǎn)，并且避免在所述異種免疫反應(yīng)主辦。然而，由于缺乏FBS制劑標(biāo)準(zhǔn)化導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)性能不一致性和FBS生產(chǎn)已經(jīng)到來(lái)，因?yàn)閯?dòng)物福利問(wèn)題很初提出血小板裂解液（PL）作為動(dòng)物血清的替代物，用于由Doucet等人體外擴(kuò)增MSC。包含在PL的生物活性分子和生長(zhǎng)因子支持的MSC從骨髓（BM）導(dǎo)出的膨脹，臍帶血（UCB），和脂肪組織（AT），與FBS相比顯示出有利的結(jié)果。此外，間充質(zhì)干擴(kuò)大了與PL-富集介質(zhì)已被用于zhiliao患有jisu難治性急性移植物抗宿主病（GVHD）造血干細(xì)胞移植后患者和患有幾種骨科疾病的患者，主要是中度至重度的膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎。 血小板裂解液是由富含血小板的血漿純化萃取而成，包含很多不同的細(xì)胞生長(zhǎng)因子。

ELAREMPrime人血小板裂解液是面向未來(lái)需求的先進(jìn)的細(xì)胞培養(yǎng)解決方案?；谌搜“宓慕?jīng)濟(jì)實(shí)惠的細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)劑可實(shí)現(xiàn)從動(dòng)物血清添加劑到無(wú)異種細(xì)胞培養(yǎng)條件的簡(jiǎn)單轉(zhuǎn)換。每批ELAREMPrime均由大量血小板單位生產(chǎn)，以比較大限度地減少批次間的差異。ELAREMPrime支持細(xì)胞擴(kuò)增，無(wú)需批間測(cè)試即可提供一致的試驗(yàn)結(jié)果。ELAREMPrime只供體外實(shí)驗(yàn)和研究使用(RUO)，該產(chǎn)品不適合直接用于人類或動(dòng)物用途。有關(guān)安全預(yù)防措施，請(qǐng)參閱相應(yīng)的SDS。推薦用于與FBS相比，ELAREMPrime人血小板裂解液支持間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)的細(xì)胞生長(zhǎng)性能，而不會(huì)丟失表型。非靈長(zhǎng)類細(xì)胞系的體外繁殖和維持需要根據(jù)具體情況進(jìn)行測(cè)試和優(yōu)化。 血小板裂解液中的沉淀在使用前需要過(guò)濾掉么？灝洋血小板裂解液的組成

用血液里的血小板濃縮物反復(fù)解凍和超聲處理可制備成人血小板裂解液.賽多利斯血小板裂解液等級(jí)

在解凍的ELAREMPrime血小板裂解液中可能會(huì)形成不溶性顆粒。顆粒形成不會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)性能。如果完全細(xì)胞培養(yǎng)基中出現(xiàn)凝結(jié)或不溶性顆粒，建議在ELAREMPrime血小板裂解液在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中稀釋后使用0.22μm過(guò)濾器過(guò)濾完全培養(yǎng)基。過(guò)濾不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)性能（經(jīng)過(guò)MSC測(cè)試）。但是，不建議對(duì)100%濃縮的ELAREMPrime血小板裂解液進(jìn)行過(guò)濾。避免多次凍融循環(huán)ELAREMPrime血小板裂解液，可以很大限度地減少微粒的形成。無(wú)菌性ELAREMPrime血小板裂解液經(jīng)過(guò)無(wú)菌處理。微生物培養(yǎng)測(cè)試為陰性。質(zhì)量控制測(cè)試在經(jīng)過(guò)認(rèn)證的測(cè)試實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。 賽多利斯血小板裂解液等級(jí)

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