穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法：1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！PEI轉(zhuǎn)染試劑的殘留檢測方法怎么開發(fā)呢?山東PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝低成本的選擇

1、細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞，用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）。根據(jù)細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基。2、制備PEI-DNA混合物：以60mm組織培養(yǎng)皿用420μL反應(yīng)總體積為例。準(zhǔn)備兩支1.5mL離心管，一管將質(zhì)粒DNA（總量2-8μg為佳）加入240μLHBS中，混勻。另一管中則用HBS將100μM的PEI儲存液稀釋成10μM，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中，充分混勻后室溫靜置20-30min。將這420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述單層細胞的細胞培養(yǎng)基中，輕輕搖動平皿混勻，置于含5％～7％CO2的37℃溫箱孵育。注：每次用100μM的PEI儲存液前都需要先將其充分混勻，保證所取的濃度一致。3、培養(yǎng)6-10h后更換為37℃預(yù)熱的含有血清的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)，16h左右可以觀測到報告基因的表達。如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！陜西PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝PEI轉(zhuǎn)染試劑可以轉(zhuǎn)染哪些細胞？

產(chǎn)品簡介：Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑是一種非GMP等級的即用型線性聚乙烯亞胺（PEI轉(zhuǎn)染試劑）溶液，由PEI MAX配置而成，采用0.1um PES無菌過濾器，完全消除支原體污染風(fēng)險。Transporter 5將DNA縮聚成帶正電荷的復(fù)合物，這些復(fù)合物很容易通過內(nèi)吞作用進入細胞，并且Transporter 5-DNA 復(fù)合物能很好地抵御溶酶體的降解作用，有效提高轉(zhuǎn)染效率。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究，可無縫過渡到MAXgene GMP用于商業(yè)化生產(chǎn)。Transporter 5轉(zhuǎn)染試劑能高效地將DNA轉(zhuǎn)染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆蟲（SF9、SF21） 等真核細胞系，可作用于大到135,000個核苷酸的質(zhì)粒，所以較大的質(zhì)粒也可以成功地轉(zhuǎn)染。 Transporter 5可節(jié)省試劑準(zhǔn)備時間，加快項目進度。經(jīng)過嚴(yán)格的性能檢測，確保品質(zhì)，在新藥研發(fā)過程中是一款快速、重復(fù)性好、可用于批量產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑。產(chǎn)品特點：非GMP，研究級PEI轉(zhuǎn)染試劑溶液；高轉(zhuǎn)染效率；無縫過渡到MAXgene GMP；易放大，可預(yù)測產(chǎn)量；用于工藝開發(fā)，臨床前和早期臨床研究。如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！

1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當(dāng)降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細胞來而言，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化。?如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！?PEI轉(zhuǎn)染試劑和其他轉(zhuǎn)染試劑相比有什么優(yōu)勢？

細胞轉(zhuǎn)染實驗是生物醫(yī)學(xué)實驗室中常規(guī)的研究手段，目的是把外源基因、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細胞內(nèi)。目前主要有三種主流方法：生物轉(zhuǎn)染，物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用病毒等微生物作為基因?qū)胼d體，以慢病毒、腺病毒和腺相關(guān)病毒等常見，其侵染效率可以達到90%以上，但常因安全性等問題，很多實驗室對其敬而遠之。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射、電穿孔和基因，無論哪一種都需要特定的設(shè)備，且一分錢一分貨，性能好的價格也都相對較高。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物！?如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！?Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑和Pulyplus PEI轉(zhuǎn)染試劑哪個好？陜西PolysciencesPEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝

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美國Polysciences成立于1961年，是一家歷史久遠的化學(xué)品制造公司，產(chǎn)品guang fan應(yīng)用于各個科研領(lǐng)域。Polysciences在聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑（PEI轉(zhuǎn)染試劑）的制造工藝上具有長達20多年的經(jīng)驗，其經(jīng)典的PEI轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品系列包括研究級產(chǎn)品PEI 25K，PEI MAX和Transporter 5，以及cGMP級MAXgene GMP，被guang fan用于抗體藥物和重組蛋白，臨床等級慢病毒和AAV病毒的大規(guī)模生產(chǎn)，為全球客戶提供成本效益高、供應(yīng)穩(wěn)定和質(zhì)量可靠的選擇。在過去10年間，Polysciences的PEI轉(zhuǎn)染試劑已被用于國內(nèi)外多項臨床申報。如想申請PEI試用裝，請關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”，即可參加！山東PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝低成本的選擇