準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL離心管。3.轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復合物。轉染3h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物！如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！?用PEI轉染試劑時出現(xiàn)沉淀是什么原因？商業(yè)化PEI轉染試劑試用裝可支持工藝開發(fā)

細胞轉染實驗是生物醫(yī)學實驗室中常規(guī)的研究手段，目的是把外源基因、蛋白或者小分子導入到靶細胞內。目前主要有三種主流方法：生物轉染，物理轉染和化學轉染。其中生物轉染主要是利用病毒等微生物作為基因導入載體，以慢病毒、腺病毒和腺相關病毒等常見，其侵染效率可以達到90%以上，但常因安全性等問題，很多實驗室對其敬而遠之。物理轉染主要包括顯微注射、電穿孔和基因，無論哪一種都需要特定的設備，且一分錢一分貨，性能好的價格也都相對較高。更多關于PEI轉染試劑，歡迎咨詢上海曼博生物！?如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！?高質量PEI轉染試劑試用裝有相關上市產品嗎25K和40K的PEI轉染試劑有哪些區(qū)別？

PEI在于可以應用于體內試驗。當初試驗經費很有限，被逼無奈只能放棄脂質體2000，選擇PEI，以至于相當長的時間內，轉染試驗都不順利。下面是幾點關于PEI轉染的注意要點：1.PEI的使用量可以參照脂質體2000的說明書，所用質粒盡量去內2.轉染時，一定要把PEI+DMEM加入到質粒+DMEM中，順序不可錯，輕微混勻，靜止20min3.轉染后4小時，一定要換液！換含有FBS的完全培養(yǎng)液！因為PEI對細胞毒性太大4.如果后續(xù)試驗涉及到穩(wěn)定篩選，建議把血清濃度適當提高。PS：事實證明，PEI是可行的，已經做出穩(wěn)定細胞系了。更多關于PEI轉染試劑相關的信息，可咨詢上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司！如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！

注意事項質粒質量：請務必使用高質量轉染級無內質粒（推薦使用QIAGEN或者MN公司去內質粒提取試劑盒）。通過260nm光吸收測定DNA濃度，260nm/280nm比值確定DNA純度（比值應該在1.8~2.0的范圍之內）。如有可能，請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。細胞條件：使用適當保存和經常傳代的健康細胞。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞，請在轉染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞。?如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！?PEI轉染試劑是一種合成的聚乙烯亞胺聚合物。

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有哪些不錯的PEI轉染試劑？商業(yè)化PEI轉染試劑試用裝可支持工藝開發(fā)

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到宜轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細胞來而言，每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉染試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉染試劑進行優(yōu)化。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物！如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加！?商業(yè)化PEI轉染試劑試用裝可支持工藝開發(fā)