影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個關(guān)鍵參數(shù)是ganran復(fù)數(shù)(MOI),MOI指的是每個細胞ganran的病毒粒子個數(shù),病毒粒子滴度以ganran單位(IU)/mL或TU/mL表示。慢病毒的ganran能力隨細胞類型的不同而不同,因此每種不同的細胞類型需要不同的MOI。MOI值越大,慢病毒ganran上的可能性也越大,ganran效率越高,但對細胞的毒性也越大。另外細胞需要的MOI值越大,也說明細胞越難被轉(zhuǎn)導(dǎo)。SIRIONBiotech為研究機構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的GMP材料供應(yīng)條件。LentiBOOST目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用。更多LentiBOOST相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物,也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio有可以增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的試劑嗎?提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)滴度
在病毒附著到宿主細胞后,病毒RNA滲透進宿主細胞,并以此為模板,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過程中,RNA的兩端都進行了復(fù)制,產(chǎn)生了長末端重復(fù)序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,每條鏈含有U3-R-U5序列,然后雙鏈DNA被運送到細胞核內(nèi)。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動物和嚙齒動物細胞的效率。LentiBOOST 是一種無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,用于臨床前和臨床應(yīng)用。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio詳述慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑什么可以增加慢病毒轉(zhuǎn)染的速度?
產(chǎn)品介紹LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運,促進慢病毒與細胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。目前該產(chǎn)品在美國和歐洲已有30多個藥物phaseIII/II/I臨床實驗中,并有相關(guān)藥物已上市銷售。產(chǎn)品特點l增強慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,可高達90%—提高zhi liao蛋白表達量,有利于取得臨床試驗成功l減少MOI低至2倍,從而降低COGS(Costofgoodssold)——減少Lentivirus的用量和物料成本l控制單個細胞中的病毒載體拷貝數(shù)(VCN,VirusCopyNumber)——符合FDA/EMA對ATMPs(AdvancedTherapyMedicinalProducts)產(chǎn)品的安全標(biāo)準(zhǔn)l易于使用——無需改變現(xiàn)有轉(zhuǎn)導(dǎo)流程,兼容已經(jīng)開發(fā)流程l提供研究級和GMP級——GMP級具有臨床試驗的所有必備文件l30多種應(yīng)用LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑的藥物已在美國和歐洲進入臨床試驗(PhaseIII和PhaseI/II)階段——加速了IND文件歸檔.
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慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對稱結(jié)構(gòu)、球形。病毒顆粒Zui外層是包膜(包膜蛋白決定了han ran細胞的類型),再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼,Zui里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒han ran的xian zhu特點是han ran個體在出現(xiàn)典型的臨床癥狀之前,大多經(jīng)歷長達數(shù)年的潛伏期,之后緩慢發(fā)病,因此這些病原體被稱為慢病毒。慢病毒載體是指以人類免疫缺陷病毒-1 (HIV-1) 來源的一種病毒載體,慢病毒載體包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息,是慢病毒載體系統(tǒng)的主要組成部分。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質(zhì)粒、細胞系的輔助下,經(jīng)過病毒包裝成為有han ran力的病毒顆粒,通過han ran細胞或huo ti組織,實現(xiàn)外源基因在細胞或huo ti組織中表達。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,歡迎咨詢上海曼博生物!更多關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的技術(shù)文章,歡迎關(guān)注上海曼博生物公眾號:Mine-bio慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑是什么呢?
研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且對細胞活力或干細胞特性沒有劑量依賴性的不良影響。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑的組合dai biao了一種有價值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應(yīng)用中 MSCs 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的潛力。細胞狀態(tài)對于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響,良好的生長狀態(tài)是達到高gan ran效率的保證,一般選擇細胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對數(shù)生長期的細胞進行g(shù)an ran可提高gan ran效率。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)是什么呢?詳述慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑
加入什么試劑可以提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率?提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)滴度
慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對稱結(jié)構(gòu)、球形。病毒顆粒Zui外層是包膜(包膜蛋白決定了han ran細胞的類型),再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼,Zui里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒han ran的xian zhu特點是han ran個體在出現(xiàn)典型的臨床癥狀之前,大多經(jīng)歷長達數(shù)年的潛伏期,之后緩慢發(fā)病,因此這些病原體被稱為慢病毒。慢病毒載體是指以人類免疫缺陷病毒-1 (HIV-1) 來源的一種病毒載體,慢病毒載體包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息,是慢病毒載體系統(tǒng)的主要組成部分。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質(zhì)粒、細胞系的輔助下,經(jīng)過病毒包裝成為有han ran力的病毒顆粒,通過han ran細胞或huo ti組織,實現(xiàn)外源基因在細胞或huo ti組織中表達。更多關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑,歡迎咨詢上海曼博生物!也可了解由上海曼博生物代理的SIRION LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑產(chǎn)品,更多技術(shù)文章可關(guān)注曼博生物公眾號:Mine-bio提高慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)滴度