血小板裂解液作為胎牛血清的替代品,間充質(zhì)干細(xì)胞/基質(zhì)細(xì)胞(MSCs)被定義為自我更新的多能祖細(xì)胞,能夠分化成中胚層來源的其他細(xì)胞類型,如脂肪細(xì)胞,骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞。人源血小板裂解液是無動物源血清培養(yǎng)補(bǔ)充劑,能在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)提供細(xì)胞生長所需動力,目前已被大規(guī)模的使用在干細(xì)胞及原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中。人源血小板裂解物除了擁有比富血小板血漿更高的生長因子濃度,更用特殊工藝去除了細(xì)胞碎片,大幅降低了使用過程中的免疫原性。人源血小板裂解物是一種能有效支持間充質(zhì)干細(xì)胞等人類細(xì)胞生長的高效細(xì)胞培養(yǎng)補(bǔ)充劑。國產(chǎn)血小板裂解液protocol
產(chǎn)品制造:nLivenPR由Sexton Biotechnologies制造,其質(zhì)量體系經(jīng)認(rèn)證為符合ISO9001標(biāo)準(zhǔn);制造過程根據(jù)制造商的要求進(jìn)行控制質(zhì)量體系。處理包括匯集大約100個(gè)供體來源的血小板單位,以破裂血小板膜,用0.5μm和0.2μm過濾器過濾,經(jīng)過一系列的輻照和無菌填充流程。通過一系列的產(chǎn)品放行測試保持批次間的一致性;分析證書是有效的隨每批提供,以表明其符合所有放行標(biāo)準(zhǔn)。Sexton Biotechnologies申明生產(chǎn)nLivenPR所用的原材料成分均非人類動物起源。灝洋血小板裂解液肝素怎么加血小板裂解液里面的沉淀是什么?
我們的PR過程旨在限制輻照對血小板裂解液性能的影響,并經(jīng)過驗(yàn)證以提供有效性的客觀證據(jù)。許多常見的去除和滅活方法,如巴氏殺菌,納濾和溶劑/洗滌劑工藝去除或破壞產(chǎn)品功效所需的生長因子和蛋白質(zhì),或留下可能影響產(chǎn)品質(zhì)量的殘留物。電子束和γ射線輻照的作用機(jī)理與電離輻射對核酸的損傷機(jī)理相同,通常用于醫(yī)療和食品的輻照。
我們的研究表明,伽馬射線照射可以有效的病毒滅活,但導(dǎo)致大量生長因子、不良產(chǎn)品的損失特征(渾濁)和總體減少細(xì)胞擴(kuò)增的水平。其他步驟,如添加蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑通常用于對抗但這些效應(yīng),但需要額外的表征并會引入有關(guān)風(fēng)險(xiǎn)的新問題。
本發(fā)明涉及細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,特別涉及一種血小板裂解液的制備方法及其應(yīng)用,用于替代動物來源的血清,為間充質(zhì)干細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)提供的營養(yǎng)。該制備方法包括:將血小板在20~24℃振蕩保存1~5d,采用反復(fù)凍融法和超聲法進(jìn)行處理,離心,收集上清液,去除纖維蛋白,獲得血小板裂解液.本發(fā)明提供的血小板裂解液的制備方法可明顯提高血小板裂解液中細(xì)胞因子含量,且可進(jìn)行細(xì)胞因子的定量平衡,有利于減少產(chǎn)品批間的差異,可達(dá)到穩(wěn)定的促進(jìn)人源性細(xì)胞生長的作用。國產(chǎn)的血小板裂解液好用么?
血小板裂解液解凍后請立即進(jìn)行培養(yǎng)基的配制,配置好的培養(yǎng)基在2-8°C環(huán)境下保存并盡快使用,不建議超過21天。如解凍后的原瓶無法全部使用,建議按需分裝成合適的小瓶中進(jìn)行-20°C保存一旦產(chǎn)品瓶或袋經(jīng)過初始解凍過程,建議盡快將產(chǎn)品置于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。盡管對于儲存在2-8°C的準(zhǔn)備好的含有hPL的培養(yǎng)基,Sexton的內(nèi)部測試有效期為21天,但建議客戶進(jìn)行內(nèi)部驗(yàn)證研究,以確定其基于血小板裂解液的完整培養(yǎng)基的有效期。使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加劑等變量可能會縮短或延長完整培養(yǎng)基產(chǎn)品的有效期。血小板裂解液在使用前一定要了解其使用方法??蒲械燃壯“辶呀庖簲嘭?/p>
血小板裂解液真的能替代胎牛血清?國產(chǎn)血小板裂解液protocol
血小板裂解液(plateletlysate,PL)是自體或異體血小板富集物經(jīng)細(xì)胞裂解后的產(chǎn)物,已經(jīng)被諸多研究推薦作為胎牛血清(fetalbovineserum,F(xiàn)BS)的替代品,應(yīng)用于間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymalstemcells,MSC)的大規(guī)模擴(kuò)增培養(yǎng)。但是,PL對諸如牙髓干細(xì)胞(dentalpulpstemcells,DPSCs)、牙周膜干細(xì)胞(periodontalligamentstemcells,PDLSCs)及根尖牙rutou干細(xì)胞(stemcellsfromapicalpapilla,SCAP)等牙源性干細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)尚不明確。 國產(chǎn)血小板裂解液protocol
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