elisa試劑盒的好壞會(huì)直接影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，所以購(gòu)買時(shí)一定要仔細(xì)了解清楚，那具體是那些因素會(huì)導(dǎo)致elisa試劑盒變質(zhì)呢?接下來(lái)跟隨elsa試劑盒—起來(lái)了解—下。方法影響：elisa測(cè)定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法，其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法因受操作時(shí)差所引起的不公平競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響，結(jié)果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難控制。操作因素：elisa操作步驟復(fù)雜，操作不當(dāng)將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。對(duì)于效期短、使用率低的試劑，應(yīng)當(dāng)小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，防止反復(fù)凍融造成試劑的失效。試劑盒一般醫(yī)院、制藥企業(yè)使用。泰興甲胎蛋白(AFP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。然而，影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多，故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。泰興甲胎蛋白(AFP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Elisa試劑盒的使用需要注意實(shí)驗(yàn)環(huán)境，如溫度、濕度、光照等。

關(guān)于elisa試劑盒溫育，在實(shí)際測(cè)定操作中一定要注意以下幾點(diǎn)：要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時(shí)間。一般來(lái)說(shuō)，加完樣本和/或反應(yīng)試劑后，將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時(shí)，其孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃，需要一定的時(shí)間，尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下，這段升溫時(shí)間可能還比較長(zhǎng)，而在臨床實(shí)驗(yàn)室中，很少有人注意這個(gè)問(wèn)題，通常是將微孔板一放入溫箱即開(kāi)始計(jì)時(shí)，這樣就很容易造成實(shí)際測(cè)定中溫育時(shí)間不夠，弱陽(yáng)性樣本測(cè)不出來(lái)的問(wèn)題。為保證37℃下足夠的溫育時(shí)間，臨床實(shí)驗(yàn)室可自行確定本實(shí)驗(yàn)室不同季節(jié)（不同室溫下）微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長(zhǎng)時(shí)間孔內(nèi)溫度才能達(dá)到37℃，從而適當(dāng)延長(zhǎng)板條在溫箱中的放置時(shí)間。

小鼠島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免針眼。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的OD值)，可以請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。Elisa試劑盒的檢測(cè)結(jié)果需要進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理和解讀。

檢測(cè)原理主要是通過(guò)利用在96孔板上包被人壞死因子α的單克隆抗體，將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本添加到孔中，使壞死因子α與固定化抗體結(jié)合，然后加入辣根過(guò)氧化物酶結(jié)合的小鼠抗人壞死因子α的單克隆抗體，產(chǎn)生抗原-抗體-抗原的“三明治”結(jié)構(gòu)。再次清洗并加入TMB基質(zhì)溶液，其產(chǎn)生的顏色深淺與樣品中人壞死因子α的含量成線性關(guān)系。結(jié)束酶反應(yīng)，添加停止溶液，并在450nm處讀取微孔吸光度，只需按照試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的規(guī)定操作流程進(jìn)行檢測(cè)即可得到準(zhǔn)確的測(cè)量結(jié)果，可很大程度的提高檢測(cè)效率和結(jié)果的可靠性。elisa試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等特點(diǎn)。建德髓細(xì)胞觸發(fā)受體1(TREM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Elisa試劑盒的選擇需要考慮其價(jià)格、質(zhì)量、品牌、缺點(diǎn)等因素。泰興甲胎蛋白(AFP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

elisa試劑盒使用建議：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免針眼。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)較后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。泰興甲胎蛋白(AFP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

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