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上海哪一家疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2021-10-16

葡聚糖硫酸鈉(DSS)致潰瘍性結腸炎小鼠模型:1、動物模型名稱:葡聚糖硫酸鈉(DSS)致潰瘍性結腸炎小鼠模型2、實驗動物種屬:BALB/c小鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:成年鼠5、實驗動物體重:18g-22g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:實驗前小鼠禁食不禁水24h,24小時后提起鼠尾將其懸空,使掙扎以排出大腸遠端的大便。小鼠自由飲用5%葡聚糖硫酸鈉(DSS)溶液,連續(xù)14天。進行疾病活動指數(shù)(DAI)的評估、取結腸進行組織病理學檢查。2、檢測標準:DAI評分明顯升高,與對照組比較具統(tǒng)計學意義。結腸病理鏡檢可見結腸炎癥、病變深度、隱窩破壞、潰瘍病變哪里可以做動物模型?上海哪一家疾病動物模型建模

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    步驟i.將步驟h的吸附柱放入收集管,12000rpm離心2min。步驟j.吸附柱放到一個新的,在吸附柱膜**加入50~200μl滅菌水或者洗脫液,停留5min。(將無菌水或者洗脫液加熱到65℃能夠增加洗脫的得率)。步驟i.基因組dna定量,洗脫的基因組dna可以通過電泳鑒定。方法2:一種低成本基因組dna的粗提方法:步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入離心管中,加入100μl尾部消化緩沖液,注意不要剪尾太長;步驟b.將離心管及其內容物于56℃孵育過夜;步驟c.過夜后將離心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步驟d.在微型離心機以**大轉速旋轉15min,上清直接用于pcr體系(每50μlpcr體系加入上清2μl)。尾消化緩沖液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)長鏈pcr反應:長鏈引物:pcrprimers1(℃):擴增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):擴增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述兩條擴增片段,野生型等位基因沒有擴增產物。成瘤疾病動物模型建模優(yōu)勢疾病動物模型建模好做嗎?

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人類疾病的動物模型是指各種醫(yī)學科學研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物,動物疾病模型廣泛應用于疾病機制研究、新藥靶點發(fā)現(xiàn)及篩選、藥效評價、轉化醫(yī)學等醫(yī)學前沿領域。動物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面。(一)避免了在人身上進行實驗所帶來的風險(二)臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復制出來(三)可以克服人類某些疾病潛伏期長,病程長和發(fā)病率低的缺點(四)可以嚴格控制實驗條件,增強實驗材料的可比性(五)可以簡化實驗操作和樣品收集(六)有助于更***地認識疾病的本質

    f1代小鼠southern印記的5’探針引物如下:primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印記的目標片段大小如下:5’probe-bamhi:3’probe-avrii:。步驟c、采用限制性內切酶bamhi和avrii對dna進行切割;瓊脂糖凝膠電泳分離dna;步驟d、將dna轉到尼龍膜上;步驟e、探針變性后,與dna分子進行雜交,nbt/bcip化學顯色法顯色,拍照觀察。southern雜交結果如圖6所示,可以看到:6、8、9號pirb基因敲除小鼠如果被bamhi切割,在,wt小鼠只在,如果被avrii切割,pirb基因敲除小鼠在,wt小鼠只在。步驟6、將f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子pirb基因敲入小鼠,即為本發(fā)明所述小鼠pirb基因敲入的動物模型。將本發(fā)明獲得的動物模型f2代純合子小鼠與同品系小鼠組織/細胞特異性cre表達的小鼠雜交,獲得f3代小鼠,可以實現(xiàn)在不同組織或者細胞類型中敲入pirb基因。對f3代小鼠進行基因型的鑒定:含有無(pirb-cwt)、一個(pirb-chet)或者兩個。小鼠疾病模型有助于遺傳性疾病致病基因的發(fā)現(xiàn)與驗證。

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球囊拉傷致高脂血癥動脈硬化兔模型,實驗動物種屬:新西蘭兔,實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:用球囊拉傷誘導法。采用3%戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉,經右股淺動脈,將3.5F球囊擴張導管插至腹主動脈20cm,球囊充液膨脹至2個大氣壓緩慢拉出,反復3次。球囊拉傷手術后,動物喂以高脂飼料,連續(xù)9周,每天給料兩次,自由飲水。實驗結束后取腹主動脈斑塊進行組織病理學檢查。2、檢測標準:腹主動脈斑塊病理鏡下可見腹主***程度的改變。動物疾病模型的另一個富有成效的用途。宿遷疾病動物模型建模原理

利用動物疾病模型來研究人類疾病可以克服平時一些不易見到不便于在病人身上進行實驗的人類疾病的研究。上海哪一家疾病動物模型建模

1、動物模型名稱:放血致失血性貧血小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:眼眶靜脈叢放血法。小鼠通過眼眶靜脈叢放血,0.5mL/只,并測外周血紅細胞總數(shù)(RBC)及血紅蛋白含量(Hb)。24h后所有小鼠眼眶靜脈叢**檢測外周血RBC總數(shù)及Hb含量。2、檢測標準:模型組小鼠放血后24小時的外周血RBC總數(shù)及Hb含量較放血前明顯下降,低于正常值參考值,且與正常對照組比較具***性差異(P<0.05),表明成功構建了失血性貧血動物模型造模。上海哪一家疾病動物模型建模

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