具體實施方式下面結(jié)合附圖和具體實施方式對發(fā)明作進(jìn)一步闡述。本發(fā)明構(gòu)建了pirb基因敲入的小鼠動物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)。具體來說,構(gòu)建一個cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,將其克隆進(jìn)入rosa26基因的內(nèi)含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七號染色體。本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠動物模型的構(gòu)建方法,具體按照以下步驟具體實施:步驟1、根據(jù)小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher軟件在1號內(nèi)含子設(shè)計grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因組數(shù)據(jù)庫基因,采用crispr脫靶效應(yīng)軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點:**終選取兩個grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu);步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆,通過pcr擴(kuò)增獲得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法構(gòu)建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質(zhì)粒打靶載體,通過酶切、pcr及測序?qū)Υ虬匈|(zhì)粒載體進(jìn)行驗證,圖1為構(gòu)建好的pirb基因打靶載體的示意圖。明確研究疾病的獨特資源確定小鼠疾病模型的初步選擇。黃浦區(qū)皮膚疾病動物模型建模
空白組卵巢內(nèi)細(xì)胞形態(tài)完整,可見各級卵泡生長活躍,并大多數(shù)為原始卵泡,卵泡顆粒層較多,黃體發(fā)育好。4mg、6mg組(***、八天給藥)有炎性細(xì)胞浸潤,各級卵泡減少,閉鎖卵泡增加。2mg組(連續(xù)給藥7天)可見很少次各級卵泡,及成熟卵泡,大多數(shù)為閉鎖卵泡,卵泡顆粒層變薄,黃體明顯減少。結(jié)論:使用%氯化鈉溶液及10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥)配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天,造模效果比較好。根據(jù)實驗結(jié)果得出:本發(fā)明可對比不同劑量順鉑、不同給藥時間的卵巢早衰造模方法,從而有效的確定大鼠卵巢模型建立方案。給本領(lǐng)域技術(shù)人員提供上述實施例,以完全公開和描述如何實施和使用所主張的實施方案,而不是用于限制本文公開的范圍。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言顯而易見的修飾將在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)。長寧區(qū)口碑好的疾病動物模型建模動物模型作為人類疾病的縮影。
其中可以看出手術(shù)側(cè)后爪的縮足閾值較手術(shù)前及對側(cè)后爪有***降低,且標(biāo)準(zhǔn)誤區(qū)間非常小。圖4是表1的數(shù)據(jù)通過曲線圖的方式展現(xiàn)。結(jié)果顯示:大鼠在術(shù)后***天即出現(xiàn)手術(shù)側(cè)后爪敏感,施加輕微的重量(4g左右)都會引起縮足表現(xiàn),這說明其痛閾明顯降低,對輕微的刺激均呈現(xiàn)抬腳,舔舐后足等痛覺過敏表現(xiàn)。這種表現(xiàn)維持至術(shù)后至少28天。而對側(cè)后爪在術(shù)前和術(shù)后縮足閾值變化不大,基本保持在20-25g。實施例3、模型的應(yīng)用采用實施例1中描述的方法對兩組大鼠均進(jìn)行了造模,l型棒的材料選擇的是h62黃銅或聚乳酸等不受磁場干擾、置入體內(nèi)不會對神經(jīng)造成化學(xué)刺激以及具有一定可塑性的材料。在造模后第七天應(yīng)用重復(fù)經(jīng)顱磁刺激(rtms)***大鼠,其中一組接受了真的磁刺激,為磁刺激組;另一組接受了假的磁刺激,為假刺激組。結(jié)果顯示,磁刺激組的大鼠縮足閾值較假刺激組明顯提高,如圖5所示。這表明磁刺激緩解了神經(jīng)壓迫造成的疼痛,該模型可以用于磁刺激***的研究。以上詳細(xì)描述了本發(fā)明的較佳具體實施例。應(yīng)當(dāng)理解,本領(lǐng)域的普通技術(shù)無需創(chuàng)造性勞動就可以根據(jù)本發(fā)明的構(gòu)思作出諸多修改和變化。因此。
1、動物模型名稱:膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:200~220g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:用膽管結(jié)扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3%戊巴比妥鈉麻醉,腹部皮膚消毒,無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔,分離出膽管,在膽管近端和遠(yuǎn)端2處結(jié)扎膽管。手術(shù)后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分:0分:無明顯病變;1分:呈局灶性分布,受累面積在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面積在30%-70%之間者;3分:呈彌漫性分布,受累面積在70%以上者。統(tǒng)計分析:每份標(biāo)本在低倍視野(10×10)下依次選取左上、右上、左下、右下、中間5個視野(共1.5mm2)進(jìn)行觀察,測定并計算視野內(nèi)小膽管伴纖維組織增生總面積。便于研究者按實驗?zāi)康男枰S時采取各種樣品。
新華社上海4月9日電(記者張建松)利用先進(jìn)的基因編輯技術(shù),我國科學(xué)家在***神經(jīng)性疾病的基礎(chǔ)研究方面,取得重要進(jìn)展。***在小鼠模型上,成功恢復(fù)長久性視力損傷小鼠的視力,同時還基本消除了帕金森模型小鼠的疾病癥狀。在科技部、國家自然科學(xué)基金委、中國科學(xué)院、上海市的相關(guān)項目資助下,由中國科學(xué)院腦科學(xué)與智能技術(shù)***創(chuàng)新中心(神經(jīng)科學(xué)研究所)、上海腦科學(xué)與類腦研究中心、神經(jīng)科學(xué)國家重點實驗室楊輝研究組完成的這項研究,通過基因編輯技術(shù),成功誘導(dǎo)膠質(zhì)細(xì)胞“變身”為神經(jīng)元。這為阿爾茲海默癥、帕金森癥、青光眼等眾多神經(jīng)退行性疾病的***,探索了一個新的途徑。國際**學(xué)術(shù)期刊《細(xì)胞》8日在線發(fā)表了相關(guān)研究論文。人類的神經(jīng)系統(tǒng)包含成百上千種不同類型的神經(jīng)元。在成熟的神經(jīng)系統(tǒng)中,神經(jīng)元一般不會再生,一旦死亡,就是長久性的。而神經(jīng)元的死亡,則會導(dǎo)致不同的神經(jīng)退行性疾病。在常見的神經(jīng)性疾病中,視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞死亡導(dǎo)致的長久性失明和多巴胺神經(jīng)元死亡導(dǎo)致的帕金森癥尤為特殊,它們都是由于特殊類型的神經(jīng)元死亡所導(dǎo)致的。如何在成體中讓視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和多巴胺神經(jīng)元獲得再生?研究人員對小鼠模型的膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行了基因編輯。構(gòu)建人源移植瘤模型需要合適的免疫缺陷小鼠想知道如何選擇?鎮(zhèn)江疾病動物模型建模
動物模型的意義和優(yōu)越性!黃浦區(qū)皮膚疾病動物模型建模
引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰。技術(shù)實現(xiàn)要素:針對上述現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發(fā)明根據(jù)“順鉑可誘導(dǎo)卵巢細(xì)胞凋亡,引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型,并對比各種方法間的優(yōu)劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時間,為篩選順鉑導(dǎo)致的卵巢早衰動物模型比較好劑量提供了一種操作簡單,成功率高,結(jié)果可靠的實驗方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續(xù)施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型?;颍簩┝繛榘大w重4~6mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。進(jìn)一步地,可將順鉑溶于%氯化鈉溶液配置成順鉑注射液,然后注射。所述順鉑,可市場常規(guī)購買得到,比如齊魯制藥公司生產(chǎn)的順鉑。進(jìn)一步地,注射期間每天稱量大鼠體重,注射后每周稱量2次;末次注射后15天,麻醉取血檢測***水平,取卵巢檢測對比卵巢重量。黃浦區(qū)皮膚疾病動物模型建模
上海東寰生物科技有限公司是一家服務(wù)型類企業(yè),積極探索行業(yè)發(fā)展,努力實現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新。是一家有限責(zé)任公司企業(yè),隨著市場的發(fā)展和生產(chǎn)的需求,與多家企業(yè)合作研究,在原有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上經(jīng)過不斷改進(jìn),追求新型,在強(qiáng)化內(nèi)部管理,完善結(jié)構(gòu)調(diào)整的同時,良好的質(zhì)量、合理的價格、完善的服務(wù),在業(yè)界受到寬泛好評。公司始終堅持客戶需求優(yōu)先的原則,致力于提供高質(zhì)量的原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測試劑盒,動物疾病模型。上海東寰生物以創(chuàng)造***產(chǎn)品及服務(wù)的理念,打造高指標(biāo)的服務(wù),引導(dǎo)行業(yè)的發(fā)展。