球囊拉傷致高脂血癥動(dòng)脈硬化兔模型,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:新西蘭兔,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí) 1、實(shí)驗(yàn)方法:用球囊拉傷誘導(dǎo)法。采用3%戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉,經(jīng)右股淺動(dòng)脈,將3.5F球囊擴(kuò)張導(dǎo)管插至腹主動(dòng)脈20cm,球囊充液膨脹至2個(gè)大氣壓緩慢拉出,反復(fù)3次。球囊拉傷手術(shù)后,動(dòng)物喂以高脂飼料,連續(xù)9周,每天給料兩次,自由飲水。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取腹主動(dòng)脈斑塊進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):腹主動(dòng)脈斑塊病理鏡下可見腹主***程度的改變。人類疾病的動(dòng)物模型是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物。虹口區(qū)提供疾病動(dòng)物模型建模
步驟i.將步驟h的吸附柱放入收集管,12000rpm離心2min。步驟j.吸附柱放到一個(gè)新的,在吸附柱膜**加入50~200μl滅菌水或者洗脫液,停留5min。(將無菌水或者洗脫液加熱到65℃能夠增加洗脫的得率)。步驟i.基因組dna定量,洗脫的基因組dna可以通過電泳鑒定。方法2:一種低成本基因組dna的粗提方法:步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入離心管中,加入100μl尾部消化緩沖液,注意不要剪尾太長;步驟b.將離心管及其內(nèi)容物于56℃孵育過夜;步驟c.過夜后將離心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步驟d.在微型離心機(jī)以**大轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)15min,上清直接用于pcr體系(每50μlpcr體系加入上清2μl)。尾消化緩沖液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)長鏈pcr反應(yīng):長鏈引物:pcrprimers1(℃):擴(kuò)增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):擴(kuò)增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述兩條擴(kuò)增片段,野生型等位基因沒有擴(kuò)增產(chǎn)物。品質(zhì)好的疾病動(dòng)物模型建模說明書上海東寰為您提供完善的裸鼠動(dòng)物疾病模型。
pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠,pirb基因敲入到特異性組織或細(xì)胞中。其中pirb-cwt小鼠表達(dá)cre,但不含有l(wèi)oxp-pirb等位基因,pirb-chetandpirb-cki小鼠表達(dá)cre并分別含有一個(gè)或者兩個(gè)loxp-pirb等位基因。其中f3代雜交小鼠純合子/雜合子鑒定所用的pcr引物如下:f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp組織特異性的基因敲入也可以通過加入另一對(duì)引物,用pcr來驗(yàn)證:pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意:如果dna的樣本不夠純,或者pcr的延伸時(shí)間不夠長,可能擴(kuò)增不出來1180bp的產(chǎn)物。cre陽性pcr鑒定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安醫(yī)學(xué)院pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型及其構(gòu)建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列。
1、動(dòng)物模型名稱:高脂飼料致高脂血癥大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:180~220g1、實(shí)驗(yàn)方法:大鼠給予高脂飼料喂養(yǎng)20天。分別于造模前和造模20天**,測(cè)定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):造模20天后模型組大鼠血清TC、TG、HDLC、LDLC均***增加,與對(duì)照組比較具統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。1.提供動(dòng)物模型構(gòu)建過程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動(dòng)物或相關(guān)組織材料。能夠準(zhǔn)確模擬人相關(guān)特定功能與疾病特征。
誘發(fā)性**模型的原理是利用外源性致*因素引起細(xì)胞遺傳特性異常而呈現(xiàn)出異常生長和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化學(xué)性、物理性及生物性致*物,而化學(xué)性致*物(chemicalcarcinogens)**常見,已確知的多達(dá)一千余種,用于誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性**的種類亦很多,如苯并薩,申基膽菌、聯(lián)苯胺、亞硝胺類、黃曲霉***類。各種致癢物的致*強(qiáng)度、致*譜等特性相差較大,同一種致*物經(jīng)不同途徑給藥所致**部位或類型可有很大差異。有些化學(xué)性致*物具有明顯的親***或組織特性。因此,實(shí)驗(yàn)工作中應(yīng)根據(jù)需要選用適當(dāng)致*物和致*途徑,并確定其他影響因素或?qū)嶒?yàn)條件。基本原理:利用外源性致*物引起細(xì)胞遺傳特性改變,從而出現(xiàn)異常生長和高增殖活性細(xì)胞形成**。外源性致*物主要有化學(xué)性、物理性(如放射性物質(zhì))及生物性(如誘發(fā)動(dòng)物**的病毒),其中以化學(xué)性致*物**為常用小鼠疾病模型應(yīng)用于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中的思路與策略該研究從臨床患者中篩選到潛在的致病基因。靜安區(qū)咨詢疾病動(dòng)物模型建模
可根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動(dòng)物或相關(guān)組織材料。虹口區(qū)提供疾病動(dòng)物模型建模
得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進(jìn)一步地,l型棒的直徑為,***端長3-5mm,第二端長1-3mm。具體地,根據(jù)大鼠體重選擇l型棒的直徑大?。寒?dāng)大鼠體重在200g到不足220g范圍時(shí),采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在220g到不足250g范圍時(shí),采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在250g到不足300g范圍時(shí),采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在300g到350g范圍時(shí),采用直徑為。在另一個(gè)具體實(shí)施方式中,壓迫元件為u型棒;步驟三具體為:將u型棒的***端和第二端分別插入到左側(cè)或右側(cè)腰4椎間孔及腰5椎間孔中,得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進(jìn)一步地,壓迫元件采用不受磁場(chǎng)干擾、置入體內(nèi)不會(huì)對(duì)神經(jīng)造成化學(xué)刺激以及具有一定可塑性的材料制備而成。在一個(gè)具體實(shí)施方式中,壓迫元件采用黃銅和鋅的混合物制備而成。具體地,混合物為h62黃銅,即含銅量為%~%,余量為鋅含量的黃銅。而銅、鋅皆屬于非鐵磁性物質(zhì)。在另一個(gè)具體實(shí)施方式中,壓迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制備而成。pla是一種無毒無刺激的合成高分子材料,其原料是乳酸,不含任何金屬。h62黃銅棒或pla棒在體內(nèi),即不會(huì)受磁療、電療引起的磁場(chǎng)、電場(chǎng)干擾,也不會(huì)對(duì)磁療、電療儀器及磁共振儀器產(chǎn)生不良影響。虹口區(qū)提供疾病動(dòng)物模型建模
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