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閔行區(qū)泌尿疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2022-06-25

其可與dna鏈交叉連接,顯示出細胞毒作用。溶解后在體內(nèi)無需載體轉(zhuǎn)運,即可通過帶電的細胞膜。由于細胞內(nèi)氯離子濃度低(4mmol/l),氯離子為水所取代,電荷呈陽性,具有類似烷化劑雙功能基團的作用,可與細胞核內(nèi)dna的堿基結(jié)合,形成三種形式的交聯(lián),造成dna損傷,破壞dna復(fù)制和轉(zhuǎn)錄,高濃度時也抑制rna及蛋白質(zhì)的合成。順鉑具有抗*譜廣、乏氧細胞有效、作用性強等優(yōu)點,已普遍用于***睪丸*、卵巢*、子宮*、膀胱*、頸部*、前列腺*、腦*等,療效***。但順鉑用于****有一定的毒性,會引起副作用,與卵巢的損害有直接關(guān)系,有研究表明順鉑可誘導(dǎo)卵巢細胞凋亡。能夠準(zhǔn)確模擬人相關(guān)特定功能與疾病特征。閔行區(qū)泌尿疾病動物模型建模

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腰椎間盤突出是造成全球大部分地區(qū)工作缺失和活動受限的主要疾病,隨著日常生活節(jié)奏的不斷加快,腰椎間盤突出癥已經(jīng)成為臨床脊柱外科的常見病和多發(fā)病,而且發(fā)病人群越來越呈現(xiàn)年輕化及普遍化的趨勢。該病主要是由于腰椎長期的受力不均或突然性外傷,導(dǎo)致腰椎纖維環(huán)出現(xiàn)變形、破裂,纖維環(huán)、髓核及軟骨終板單獨或同時外突,從而壓迫到坐骨神經(jīng)、神經(jīng)根或馬尾神經(jīng),患者出現(xiàn)腰部疼痛,牽連股部,下肢足部放射性疼痛,引起神經(jīng)功能、運動功能障礙,特定身體部位出現(xiàn)麻痹或癱瘓癥狀。宿遷呼吸疾病動物模型建模上海東寰疾病動物模型建模。

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1、動物模型名稱:橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:150g-180g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:橄欖油聯(lián)合酒精誘導(dǎo)。按0.3mL/100g體重,背頸部皮下注射50%CCl4的橄欖油溶液,***注射量加倍(6mL/kg體重),2次/周,皮下注射共13周;造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水,4周后改為30%酒精溶液灌胃(30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重,3次/周)。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個月。實驗結(jié)束測量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動脈血流量(SMABF)。處死,取肝臟進行組織病理學(xué)檢查。

得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進一步地,l型棒的直徑為,端長3-5mm,第二端長1-3mm。具體地,根據(jù)大鼠體重選擇l型棒的直徑大?。寒?dāng)大鼠體重在200g到不足220g范圍時,采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在220g到不足250g范圍時,采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在250g到不足300g范圍時,采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在300g到350g范圍時,采用直徑為。在另一個具體實施方式中,壓迫元件為u型棒;步驟三具體為:將u型棒的***端和第二端分別插入到左側(cè)或右側(cè)腰4椎間孔及腰5椎間孔中,得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進一步地,壓迫元件采用不受磁場干擾、置入體內(nèi)不會對神經(jīng)造成化學(xué)刺激以及具有一定可塑性的材料制備而成。早期階段科學(xué)假說與疾病潛在藥物治療效果評價始于小鼠疾病模型構(gòu)建及其實驗室研究。

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該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術(shù)方案是:pirb基因敲入的小鼠動物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點grna1和grna2,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi),所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術(shù)方案為:pirb基因敲入的小鼠動物模型的構(gòu)建方法,將步驟3中性成熟的陽性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代,獲得f1代雜合子小鼠,通過pcr、測序和southern雜交確定動物基因型;將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。避免了在人身上進行實驗所帶來的風(fēng)險。嘉定區(qū)肺病疾病動物模型建模

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r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步驟4、鑒定為pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周齡、雌性小鼠6周齡分別與野生型異性小鼠交配獲得f1代雜合子小鼠,圖2為本發(fā)明f1代雜合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程圖,小鼠出生后20天進行pcr鑒定,若有陽性小鼠出生,則表示轉(zhuǎn)基因已經(jīng)整合到生殖細胞。(1)通過pcr方法對獲得的f1代小鼠進行基因型的鑒定:(a)dna的提?。悍椒?:采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()來獲得高純度的基因組dna。步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2~5mm),放入離心管中,加入180μlbuffergl,20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步驟b.將步驟a離心管內(nèi)于56℃孵育過夜。步驟c.過夜后12000rpm離心2min去除雜質(zhì)。步驟d.加入200μlbuffergb和200μl無水乙醇,充分混勻。步驟e.將吸附柱放在收集管上,將步驟d得到的樣品加到吸附柱里,12000rpm離心2min,棄掉收集管中液體。步驟f.棄去液體后在吸附柱中加入500μlbufferwa,12000rpm離心1min,棄掉收集管中液體。步驟g.在收集管中加入700μlbufferwb,12000rpm離心1min。棄掉收集管中液體。注意:bufferwb需要與100%乙醇預(yù)混,沿管壁加入bufferwb沖走殘余的鹽。步驟h.重復(fù)步驟g一次。閔行區(qū)泌尿疾病動物模型建模

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