可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種變化和修飾。本發(fā)明對(duì)試驗(yàn)中所使用到的材料以及試驗(yàn)方法進(jìn)行一般性和/或具體的描述。雖然為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的，但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細(xì)描述。下述實(shí)施例中所涉及的儀器、試劑、材料等，若無(wú)特別說(shuō)明，均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等，可通過(guò)正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實(shí)施例中所涉及的實(shí)驗(yàn)方法，檢測(cè)方法等，若無(wú)特別說(shuō)明，均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法，檢測(cè)方法等。實(shí)施例1：建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥，批號(hào)：aa1a8029a)中，配制成2mg/kg順鉑注射液，按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實(shí)施例2：建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液(齊魯制藥，批號(hào)：aa1a8029a)中，配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實(shí)施例3建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液25ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥，批號(hào)：aa1a8029a)中，配制成4mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實(shí)施例4：建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液(齊魯制藥，批號(hào)：aa1a8029a)中。動(dòng)物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面！泰州哪家公司提供疾病動(dòng)物模型建模

該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機(jī)制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術(shù)方案是：pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型，包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點(diǎn)grna1和grna2，將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)，所述grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術(shù)方案為：pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，將步驟3中性成熟的陽(yáng)性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代，獲得f1代雜合子小鼠，通過(guò)pcr、測(cè)序和southern雜交確定動(dòng)物基因型；將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。徐匯區(qū)視覺(jué)疾病動(dòng)物模型建模上海東寰為您提供完善的裸鼠動(dòng)物疾病模型。

空白組卵巢內(nèi)細(xì)胞形態(tài)完整，可見(jiàn)各級(jí)卵泡生長(zhǎng)活躍，并大多數(shù)為原始卵泡，卵泡顆粒層較多，黃體發(fā)育好。4mg、6mg組(***、八天給藥)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，各級(jí)卵泡減少，閉鎖卵泡增加。2mg組(連續(xù)給藥7天)可見(jiàn)很少次各級(jí)卵泡，及成熟卵泡，大多數(shù)為閉鎖卵泡，卵泡顆粒層變薄，黃體明顯減少。結(jié)論：使用％氯化鈉溶液及10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥)配制成2mg/kg順鉑注射液，按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天，造模效果比較好。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出：本發(fā)明可對(duì)比不同劑量順鉑、不同給藥時(shí)間的卵巢早衰造模方法，從而有效的確定大鼠卵巢模型建立方案。給本領(lǐng)域技術(shù)人員提供上述實(shí)施例，以完全公開(kāi)和描述如何實(shí)施和使用所主張的實(shí)施方案，而不是用于限制本文公開(kāi)的范圍。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言顯而易見(jiàn)的修飾將在所附權(quán)利要求的范圍內(nèi)。

配制成6mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實(shí)驗(yàn)建立大鼠卵巢早衰模型1.實(shí)驗(yàn)儀器及材料：如表1所示。表12.實(shí)驗(yàn)方法：①動(dòng)物信息：sd大鼠，雌性，6-8周，體重180-220g。普通環(huán)境飼養(yǎng)，滅菌飼料飼養(yǎng)，自由飲水。②分組及給藥劑量：如表2所示。表2③給藥途徑及頻率：腹腔注射；2mg、3mg組連續(xù)注射7天；4mg、6mg組***天、第八天注射；對(duì)照組連續(xù)7天注射生理鹽水。④病理檢測(cè)：末次注射后15天，動(dòng)物麻醉，采集血液，分離血清，elisa法測(cè)定血清中e2、fsh、lh水平變化情況。解剖動(dòng)物，取卵巢組織稱重，對(duì)大鼠的卵巢組織形態(tài)學(xué)進(jìn)行觀察。注射期間每天稱重，給藥后每周稱重兩次，每天進(jìn)行陰道涂片檢測(cè)動(dòng)情周期。3.統(tǒng)計(jì)方法：采用graphpad進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所有計(jì)量資料均采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示采用單因素方差分析各組間均值的差異，p＜。4.試驗(yàn)結(jié)果：(3mg組注射完成后*存活一只，不進(jìn)行統(tǒng)計(jì))如表3、表4、圖1、圖2、圖3所示：①***水平：與空白組相比，2mg組、4mg組、6mg組e2水平均降低，但是只有2mg組有明顯降低(p＜)，如圖1所示；與空白組相比，2mg組、4mg組、6mg組fsh水平均上升，只有2mg組有明顯升高(p＜)，如圖2所示；與空白組相比。確定研究疾病目的了解影響疾病發(fā)生的內(nèi)在與外在因素。

1、動(dòng)物模型名稱：橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門(mén)脈高壓大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：150g-180g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法：橄欖油聯(lián)合酒精誘導(dǎo)。按0.3mL/100g體重，背頸部皮下注射50％CCl4的橄欖油溶液，***注射量加倍（6mL/kg體重），2次/周，皮下注射共13周；造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水，4周后改為30%酒精溶液灌胃（30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重，3次/周）。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個(gè)月。實(shí)驗(yàn)結(jié)束測(cè)量門(mén)靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動(dòng)脈血流量(SMABF)。處死，取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：門(mén)靜脈及腸系膜上動(dòng)脈血流量情況與正常對(duì)照組比較均增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義肝組織病理可見(jiàn)肝硬化病理改變。生物醫(yī)學(xué)研究的進(jìn)展常常依賴于使用動(dòng)物模型作為實(shí)驗(yàn)假說(shuō)和臨床假說(shuō)二者的試驗(yàn)基礎(chǔ)。裸鼠疾病動(dòng)物模型建模優(yōu)勢(shì)

利用動(dòng)物疾病模型來(lái)研究人類疾病可以克服平時(shí)一些不易見(jiàn)到不便于在病人身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的人類疾病的研究。泰州哪家公司提供疾病動(dòng)物模型建模

具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對(duì)發(fā)明作進(jìn)一步闡述。本發(fā)明構(gòu)建了pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型，將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)。具體來(lái)說(shuō)，構(gòu)建一個(gè)cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒，將其克隆進(jìn)入rosa26基因的內(nèi)含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence：)位于小鼠的七號(hào)染色體。本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，具體按照以下步驟具體實(shí)施:步驟1、根據(jù)小鼠rosa26基因(genebank：))序列，利用cas-desigher軟件在1號(hào)內(nèi)含子設(shè)計(jì)grna靶序列，并搜索小鼠dbm-db基因組數(shù)據(jù)庫(kù)基因，采用crispr脫靶效應(yīng)軟件cas-offinder檢測(cè)潛在的脫靶位點(diǎn)：**終選取兩個(gè)grna，grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如：seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級(jí)結(jié)構(gòu)；步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫(kù)bac克隆，通過(guò)pcr擴(kuò)增獲得pirb基因cds的同源臂，采用in-fusion方法構(gòu)建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質(zhì)粒打靶載體，通過(guò)酶切、pcr及測(cè)序?qū)Υ虬匈|(zhì)粒載體進(jìn)行驗(yàn)證，圖1為構(gòu)建好的pirb基因打靶載體的示意圖。泰州哪家公司提供疾病動(dòng)物模型建模