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EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒更準(zhǔn)確--無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來(lái)的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡(jiǎn)單--無(wú)需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法,簡(jiǎn)單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無(wú)需抗體,檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè);更快速--無(wú)需過(guò)夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí);更兼容--對(duì)樣品幾乎無(wú)損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒常見(jiàn)的用途有哪些?上海東寰告訴您。湖北咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒購(gòu)買(mǎi)
細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見(jiàn),能夠在DNA復(fù)制時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在合成的DNA分子中,基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可直接并準(zhǔn)確地檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)、病毒繁殖等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及各種藥物的細(xì)胞增殖及活力篩選實(shí)驗(yàn)。安徽如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的作用是什么?上海東寰告訴您。
EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動(dòng)物體內(nèi)能夠迅速擴(kuò)散到各種組織和中,并滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過(guò)基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出細(xì)胞增殖情況。與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測(cè)試劑盒相同甚至更好的檢測(cè)結(jié)果,而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測(cè)方法反應(yīng)快,效率高,反應(yīng)時(shí)間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過(guò)夜孵育,能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài),更簡(jiǎn)單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確。
EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的好處有哪些?
本試劑盒可以檢測(cè)到細(xì)胞或組織樣品中單個(gè)的增殖細(xì)胞,同時(shí)也可以對(duì)細(xì)胞或組織樣品總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量檢測(cè)。本試劑盒可以檢測(cè)培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品,也可以檢測(cè)組織切片,但均需提前進(jìn)行EdU的摻入。細(xì)胞增殖能力的檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是直接檢測(cè)細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過(guò)檢測(cè)DNA合成來(lái)檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的功能具體介紹。山東咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒購(gòu)買(mǎi)
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細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過(guò)量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)湖北咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒購(gòu)買(mǎi)
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