細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。EdU細胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展前景如何呢？上海EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家

細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一，是生物體的重要生命特征。細胞的增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎。方式：真核生物的分裂依據過程不同有三種方式，有有絲分裂，無絲分裂，減數分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、等一切真核生物中的一種*為普遍的分裂方式，是真核細胞增殖的主要方式。減數分裂是生殖細胞形成時的一種特殊的有絲分裂。多細胞生物，以細胞分裂的方式產生新的細胞，用來補充體內衰老或死亡的細胞湖北咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒原理EdU細胞增殖檢測試劑盒的特點是什么？上海東寰告訴您。

傳統的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性，只需溫和的細胞固定化和透化處理，能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點，操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散，無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免樣品損傷，而且無需抗原抗體反應，能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性

該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。建議染色完成后立即進行熒光顯微鏡拍照觀察；如果條件限制，請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內完成拍照。若為細胞爬片或涂片，可使用抗熒光淬滅封片劑進行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性，只需溫和的細胞固定化和透化處理，能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點，操作步驟更加快速、靈敏和準確上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒的運用方式。

EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物，分子量很小，在動物體內能夠迅速擴散到各種組織和中，并滲入正在復制的DNA分子，通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應即可簡單、快速、準確地檢測出細胞增殖情況。與BrdU檢測方法相比，EdU檢測方法用量小得多，十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結果，而且小分子化學反應檢測方法反應快，效率高，反應時間需幾分鐘，不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育，能夠更好地保護細胞形態(tài)，更簡單、更靈敏、更快速、更準確。EdU細胞增殖檢測試劑盒的價格。上海品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家

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通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應，把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性，廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復等方面的研究。EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預熱，然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因為這樣可能會影響細胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現用現配，用量以沒過細胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。上海EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家

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