細(xì)胞增殖能力的檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是直接檢測(cè)細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測(cè)DNA合成來檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法，如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法，能檢測(cè)到細(xì)胞的總體增殖效果，但無法檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測(cè)DNA合成的，但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。上海EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的發(fā)展趨勢(shì)。湖北哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司

通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí)，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。注：貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。湖北哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒前的安全檢查。

細(xì)胞增殖分析是細(xì)胞生長和分化研究的關(guān)鍵，在藥物開發(fā)階段常用來評(píng)估化學(xué)藥物的毒性和對(duì)細(xì)胞生長的控制作用。通常根據(jù)平均DNA含量或細(xì)胞代謝參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)，此類分析可以報(bào)告出總細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞數(shù)目，或者測(cè)定出單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的DNA合成情況。細(xì)胞增殖染料稀釋分析主要基于細(xì)胞膜通透性，熒光團(tuán)分子、染料進(jìn)入細(xì)胞后，將會(huì)共價(jià)結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團(tuán)上，從而使染料能夠長時(shí)間停留在細(xì)胞中。經(jīng)過之后的細(xì)胞分裂階段，各個(gè)子代細(xì)胞會(huì)從母細(xì)胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細(xì)胞儀對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析，即可測(cè)定出自標(biāo)記結(jié)合起，單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。

CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞，但由于每增殖一次熒光減弱一半，在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞，檢測(cè)靈敏度不是很高，通常單適用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí)，上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷，是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷，thymidine)類似物，EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。有哪些領(lǐng)域需要使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒？

更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免變性帶來的樣品損傷，確保細(xì)胞核邊緣清晰完整；更簡單--無需抗原抗體反應(yīng)，基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法，簡單高效，反應(yīng)單需要幾分鐘；更靈敏--無需抗體，檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500，更容易擴(kuò)散，即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè)；更快速--無需過夜，省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟，完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí)；更兼容--對(duì)樣品幾乎無損傷，更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記，能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。rdU需要DNA變性后才能與抗體結(jié)合，導(dǎo)致BrdU、Hoechst染色彌散，邊緣模糊不清；而EdU邊緣清晰完整，檢測(cè)更靈敏、更準(zhǔn)確上海東寰告訴您如何正確使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒？河南口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)

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EdU細(xì)胞增殖方法簡單，方便，無需DNA變性，能夠與各種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記，以檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。為了與其他熒光共同使用，東寰生物提供多種染料供選擇，覆蓋常用檢測(cè)通道，方便您輕松選擇適合的染料，比較大限度地?cái)U(kuò)展第三方染色的適用范圍，比較大限度地滿足您的檢測(cè)儀器要求，完全解決您的實(shí)驗(yàn)難題。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)，更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記（如P65抗體）等進(jìn)行多重標(biāo)記，從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息湖北哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司

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