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來源: 發(fā)布時間:2022-09-12

EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒發(fā)揮的重要作用。北京EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商

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傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性,抗原修復,抗原抗體過夜孵育,操作步驟復雜繁瑣。并且由于BrdU抗體分子較大,嵌入DNA分子中的BrdU無法直接與BrdU抗體結合,必須先進行DNA變性操作才能使BrdU抗原表位暴露,但變性的程度可能導致錯誤結果。如果變性不充分,會導致BrdU難以暴露,無法檢測,而且變性過程從邊緣向中間滲透,會導致細胞核DNA的變性不均勻,邊緣模糊不清。如果變性過分,則會導致DNA斷裂,甚至降解,導致核染不均一。另外,不同抗體試劑公司的抗體質量不一致,造成難以確保實驗重復性,且容易產生假陽性結果。咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒公司EdU細胞增殖檢測試劑盒如何發(fā)揮重要作用?

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通過檢測EdU標記便能準確地反映細胞的增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細胞和組織水平能更準確地反映細胞增殖等現(xiàn)象。EdU法檢測試劑盒是Brdu方法的**性突破。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測細胞增殖,無須抗體,無變性步驟,保持細胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡單,可靠,省事的創(chuàng)新方法

建議染色完成后立即進行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內完成拍照。若為細胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結構非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性。EdU細胞增殖檢測試劑盒常見的用途有哪些?上海東寰告訴您。

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CFDASE法(C0051、C1031)基于細胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細胞,檢測靈敏度不是很高,通常單適用于流式細胞儀檢測。在進行科學研究時,上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。EdU細胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。江西品牌EdU細胞增殖檢測試劑盒價格

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EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動物體內能夠迅速擴散到各種組織和中,并滲入正在復制的DNA分子,通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應即可簡單、快速、準確地檢測出細胞增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結果,而且小分子化學反應檢測方法反應快,效率高,反應時間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,能夠更好地保護細胞形態(tài),更簡單、更靈敏、更快速、更準確北京EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商

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