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長(zhǎng)寧區(qū)哪家公司提供疾病動(dòng)物模型建模

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-02-15

1、動(dòng)物模型名稱:D-半乳糖致老年癡呆大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年鼠5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:180g-220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)、實(shí)驗(yàn)方法:D-半乳糖誘導(dǎo)(大鼠按0.5g/kg體重腹腔注射D-半乳糖溶液)(注:每天1次,連續(xù)6-7周。)2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):①SOD明顯下降、MDA明顯增加;②水迷宮試驗(yàn)顯示學(xué)習(xí)記憶能力下降;③腦組織神經(jīng)元數(shù)目減少。1.提供動(dòng)物模型構(gòu)建過(guò)程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。避免了在人身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)所帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)。長(zhǎng)寧區(qū)哪家公司提供疾病動(dòng)物模型建模

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技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明屬于遺傳學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型,還涉及上述小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。背景技術(shù):鼠源成對(duì)免疫球蛋白樣受體b(pairedimmunoglobulin-likereceptorb,pirb),是人類免疫球蛋白樣受體b2(humanleukocyteimmunoglobulin(ig)-likereceptorb2,lilrb2)的同源基因,pirb基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的7號(hào)染色體近端,總大小為,編碼841個(gè)氨基酸,目前鑒定出15個(gè)外顯子,外顯子1起始密碼為atg,外顯子15的終止密碼子是tga(轉(zhuǎn)錄本:)。pirb蛋白屬于i型跨膜糖蛋白,包含由六個(gè)免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域(domain,d)組成(d1-d6)的胞外段,一個(gè)疏水的跨膜段,三個(gè)免疫受體酪氨酸依賴的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs,itims)和一個(gè)itims樣序列組成的胞內(nèi)段。理論上講,pirb的分子量約為92kd,但是western-blot分析中,pirb經(jīng)常位于105kd處,因?yàn)閜irb是糖蛋白。以往研究發(fā)現(xiàn),pirb在免疫系統(tǒng)和中樞調(diào)節(jié)中均發(fā)揮重要作用。在免疫系統(tǒng)中,pirb在許多造血細(xì)胞都有表達(dá),包括b細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞和樹(shù)突細(xì)胞,但是在胸腺細(xì)胞、成熟的t細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞不表達(dá)。金山區(qū)疾病動(dòng)物模型建模評(píng)價(jià)通過(guò)小鼠疾病模型的構(gòu)建有助于我們深入揭示潛在致病基因作用機(jī)制。

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目前鑒定出15個(gè)外顯子,外顯子1起始密碼為atg,外顯子15的終止密碼子是tga(轉(zhuǎn)錄本:)。pirb蛋白屬于i型跨膜糖蛋白,包含由六個(gè)免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域(domain,d)組成(d1-d6)的胞外段,一個(gè)疏水的跨膜段,三個(gè)免疫受體酪氨酸依賴的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs,itims)和一個(gè)itims樣序列組成的胞內(nèi)段。理論上講,pirb的分子量約為92kd,但是western-blot分析中,pirb經(jīng)常位于105kd處,因?yàn)閜irb是糖蛋白。以往研究發(fā)現(xiàn),pirb在免疫系統(tǒng)和中樞調(diào)節(jié)中均發(fā)揮重要作用。在免疫系統(tǒng)中,pirb在許多造血細(xì)胞都有表達(dá),包括b細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞和樹(shù)突細(xì)胞,但是在胸腺細(xì)胞、成熟的t細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞不表達(dá)。

設(shè)計(jì)了一套能夠特異性標(biāo)記“穆勒膠質(zhì)細(xì)胞”的系統(tǒng),再將能誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞形成的基因編輯系統(tǒng),包裝成“病毒”,注射到小鼠的視網(wǎng)膜。約1個(gè)月后,研究人員在小鼠的視網(wǎng)膜視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層,發(fā)現(xiàn)了由穆勒膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化而來(lái)的視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。這些誘導(dǎo)而來(lái)的視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,不僅可以對(duì)光刺激產(chǎn)生相應(yīng)的電信號(hào),還可以和大腦中正確的腦區(qū)建立功能性聯(lián)系,將視覺(jué)信號(hào)傳輸?shù)酱竽X,成功恢復(fù)視覺(jué)功能。進(jìn)一步的研究還表明,通過(guò)這一基因編輯技術(shù),還能將小鼠模型中特定區(qū)域的“星形膠質(zhì)細(xì)胞”非常高效地轉(zhuǎn)分化為多巴胺神經(jīng)元。轉(zhuǎn)分化而來(lái)的多巴胺神經(jīng)元,能將帕金森模型小鼠的運(yùn)動(dòng)障礙,逆轉(zhuǎn)到接近正常小鼠的水平。這項(xiàng)研究的負(fù)責(zé)人楊輝指出,盡管將膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的基因編輯技術(shù)在實(shí)驗(yàn)室里取得重要進(jìn)展,但要將研究成果真正應(yīng)用于人類疾病的***,還有很多工作要做。人類的視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞能否再生?帕金森患者是否能通過(guò)該方法被***?研究人員今后將從小鼠模型轉(zhuǎn)到靈長(zhǎng)類模型,進(jìn)一步深入研究。動(dòng)物疾病模型廣泛應(yīng)用于新藥靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)及篩選。

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即為本發(fā)明構(gòu)建的一種pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型。本發(fā)明所采用第二種技術(shù)方案的特點(diǎn)還在于,步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級(jí)結(jié)構(gòu)。步驟3中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明提供了pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型及其構(gòu)建方法,本發(fā)明的小鼠動(dòng)物模型對(duì)于pirb基因功能的研究和在體驗(yàn)證提供了良好的基礎(chǔ)。分離自pirb基因敲入小鼠的細(xì)胞還可以用于研究pirb發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的下游機(jī)制。通過(guò)pirb敲入動(dòng)物模型與不同類型cre小鼠的雜交,可以用于研究ad不同***或不同細(xì)胞類型pirb的調(diào)節(jié)作用。如何定義好的小鼠疾病模型?徐匯區(qū)口碑好的疾病動(dòng)物模型建模

小鼠疾病模型應(yīng)用于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中的思路與策略該研究從臨床患者中篩選到潛在的致病基因。長(zhǎng)寧區(qū)哪家公司提供疾病動(dòng)物模型建模

1、動(dòng)物模型名稱:角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:新西蘭兔3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:2~3月齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:1.8~2.5kg6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)。1、實(shí)驗(yàn)方法:角膜環(huán)鉆致兔角膜機(jī)械性損傷。耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射速眠新Ⅱ進(jìn)行兔麻醉。環(huán)鉆前先用2%硼酸溶液沖洗雙眼,再滴0.25%氯霉素眼藥水2滴消毒,以保持結(jié)膜清潔。開(kāi)瞼,滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉,用已滅菌的6mm角膜環(huán)鉆分別在兔眼角膜上作環(huán)切,并滴入2滴氯霉素眼藥水潤(rùn)洗,用顯微眼鑷、角膜上皮鏟和精細(xì)眼剪小心去掉角膜損傷區(qū)域上皮,術(shù)畢,滴氯霉素眼藥水2滴。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。長(zhǎng)寧區(qū)哪家公司提供疾病動(dòng)物模型建模

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