CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測(cè)靈敏度不是很高,通常單適用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí),上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過(guò)程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中上海EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的發(fā)展趨勢(shì)。湖北品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見(jiàn),能夠在DNA復(fù)制時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在合成的DNA分子中,基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可直接并準(zhǔn)確地檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)、病毒繁殖等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及各種藥物的細(xì)胞增殖及活力篩選實(shí)驗(yàn)。品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒前的安全檢查。
通過(guò)以上原理圖的對(duì)比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測(cè)細(xì)胞增殖,無(wú)須抗體,無(wú)變性步驟,保持細(xì)胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡(jiǎn)單,可靠,省事的創(chuàng)新方法。但是,現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒(méi)有得到細(xì)胞增殖檢測(cè)*行之有效,節(jié)約反應(yīng)時(shí)間的方法。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。Abbkine的EdU檢測(cè)試劑盒有兩個(gè)型號(hào),分別匹配的是兩種不同的熒光通道,細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),KTA2030,488通道;細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(橘紅色熒光),KTA2031,549通道。
廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過(guò)夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的價(jià)格。
細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過(guò)量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域有哪些?河北品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)
EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒,有哪些好處值得選擇?湖北品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒
通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。湖北品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒
上海東寰生物科技有限公司是一家集研發(fā)、制造、銷售為一體的****,公司位于上海市嘉定區(qū)興賢路1180號(hào)5幢2樓206室,成立于2015-09-24。公司秉承著技術(shù)研發(fā)、客戶優(yōu)先的原則,為國(guó)內(nèi)原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測(cè)試劑盒,動(dòng)物疾病模型的產(chǎn)品發(fā)展添磚加瓦。公司主要經(jīng)營(yíng)原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測(cè)試劑盒,動(dòng)物疾病模型等產(chǎn)品,產(chǎn)品質(zhì)量可靠,均通過(guò)商務(wù)服務(wù)行業(yè)檢測(cè),嚴(yán)格按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。目前產(chǎn)品已經(jīng)應(yīng)用與全國(guó)30多個(gè)省、市、自治區(qū)。上海東寰生物科技有限公司研發(fā)團(tuán)隊(duì)不斷緊跟原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測(cè)試劑盒,動(dòng)物疾病模型行業(yè)發(fā)展趨勢(shì),研發(fā)與改進(jìn)新的產(chǎn)品,從而保證公司在新技術(shù)研發(fā)方面不斷提升,確保公司產(chǎn)品符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和要求。原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測(cè)試劑盒,動(dòng)物疾病模型產(chǎn)品滿足客戶多方面的使用要求,讓客戶買的放心,用的稱心,產(chǎn)品定位以經(jīng)濟(jì)實(shí)用為重心,公司真誠(chéng)期待與您合作,相信有了您的支持我們會(huì)以昂揚(yáng)的姿態(tài)不斷前進(jìn)、進(jìn)步。