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靜安區(qū)正規(guī)疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2021-10-22

1、動物模型名稱:卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁致支氣管***豚鼠模型2、實驗動物種屬:豚鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:7~8周齡5、實驗動物體重:250~350g6、實驗動物環(huán)境:SPF級。1、實驗方法:卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁誘導(dǎo)。每只豚鼠腹腔注射100μg卵清蛋白(OVA)+30mg氫氧化鋁(Al(OH)3)致敏。***次致敏后第5天再致敏1次,共2次。***一次致敏后第21d開始采用超聲霧化器噴霧10μgOVA/只,豚鼠置于一直徑約50cm的有蓋大圓盆中,給藥過程中對盆內(nèi)通O2。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):使用OVA噴霧激發(fā)后癥狀觀察,豚鼠出現(xiàn)不同程度的呼吸急促、咳嗽、抓癢、甚至抽搐等支氣管***癥狀,表明成功構(gòu)建了豚鼠***模型。查閱已有的相關(guān)小鼠模型綜述文獻。靜安區(qū)正規(guī)疾病動物模型建模

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1、動物模型名稱:D-半乳糖致老年癡呆大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:成年鼠5、實驗動物體重:180g-220g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 、實驗方法:D-半乳糖誘導(dǎo)(大鼠按0.5g/kg體重腹腔注射D-半乳糖溶液)(注:每天1次,連續(xù)6-7周。)2、檢測標(biāo)準(zhǔn):①SOD明顯下降、MDA明顯增加;②水迷宮試驗顯示學(xué)習(xí)記憶能力下降;③腦組織神經(jīng)元數(shù)目減少。1.提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。生殖疾病動物模型建模公司疾病動物模型建模好做嗎?

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    f1代小鼠southern印記的5’探針引物如下:primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印記的目標(biāo)片段大小如下:5’probe-bamhi:3’probe-avrii:。步驟c、采用限制性內(nèi)切酶bamhi和avrii對dna進行切割;瓊脂糖凝膠電泳分離dna;步驟d、將dna轉(zhuǎn)到尼龍膜上;步驟e、探針變性后,與dna分子進行雜交,nbt/bcip化學(xué)顯色法顯色,拍照觀察。southern雜交結(jié)果如圖6所示,可以看到:6、8、9號pirb基因敲除小鼠如果被bamhi切割,在,wt小鼠只在,如果被avrii切割,pirb基因敲除小鼠在,wt小鼠只在。步驟6、將f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子pirb基因敲入小鼠,即為本發(fā)明所述小鼠pirb基因敲入的動物模型。將本發(fā)明獲得的動物模型f2代純合子小鼠與同品系小鼠組織/細胞特異性cre表達的小鼠雜交,獲得f3代小鼠,可以實現(xiàn)在不同組織或者細胞類型中敲入pirb基因。對f3代小鼠進行基因型的鑒定:含有無(pirb-cwt)、一個(pirb-chet)或者兩個。

    步驟i.將步驟h的吸附柱放入收集管,12000rpm離心2min。步驟j.吸附柱放到一個新的,在吸附柱膜**加入50~200μl滅菌水或者洗脫液,停留5min。(將無菌水或者洗脫液加熱到65℃能夠增加洗脫的得率)。步驟i.基因組dna定量,洗脫的基因組dna可以通過電泳鑒定。方法2:一種低成本基因組dna的粗提方法:步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入離心管中,加入100μl尾部消化緩沖液,注意不要剪尾太長;步驟b.將離心管及其內(nèi)容物于56℃孵育過夜;步驟c.過夜后將離心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步驟d.在微型離心機以**大轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)15min,上清直接用于pcr體系(每50μlpcr體系加入上清2μl)。尾消化緩沖液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)長鏈pcr反應(yīng):長鏈引物:pcrprimers1(℃):擴增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):擴增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述兩條擴增片段,野生型等位基因沒有擴增產(chǎn)物。疾病動物模型建模有加些方式?

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1、動物模型名稱:環(huán)磷酰胺致白細胞減少癥小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環(huán)境:SPF級,1、實驗方法:環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)。小鼠按30mg/kg體重劑量腹腔注射環(huán)磷酰胺,連續(xù)注射5d。所有小鼠在注射前、注射第3、5日,以及停止注射第2、5、8、11、15日時分別**作外周血象檢測,觀察外周血白細胞總數(shù)。***1次檢測觀察后麻醉處死小鼠,取其股骨,用Hanks液沖洗骨髓細胞,顯微鏡下觀察骨髓有核細胞數(shù)。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):模型組小鼠的外周血白細胞總數(shù)明顯降低,鏡下觀察模型組小鼠的骨髓有核細胞數(shù)較正常對照組小鼠明顯降低。必須真正了解研究者感興趣且需要的小鼠疾病模型。面癱疾病動物模型建模原理

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    另外pirb在髓細胞和b細胞的表達隨細胞分化和***增加。在免疫系統(tǒng),pirb作為主要組織相容性復(fù)合物1(classimajorhistocompatibilitycomplex,mhc1)的受體,***參與免疫調(diào)節(jié),包括中性粒細胞和巨噬細胞整合素通路、細胞毒性t淋巴細胞***、b淋巴細胞***和體液—細胞免疫應(yīng)答等。pirb的前兩個細胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d1-d2)介導(dǎo)mhci和pirb的結(jié)合。在***系統(tǒng)(centralnervoussystem,cns),pirb在許多腦區(qū)包括皮層、海馬、小腦和嗅球都有表達,但在成年脊髓不表達。在細胞層面,pirb不僅表達于神經(jīng)元,也表達于星形膠質(zhì)細胞。在許多病理條件下,如腦外傷、中風(fēng)和cns***,pirb的mrna和蛋白表達水平***增加。在cns,pirb是髓鞘抑制因子nogo-a、mag、omgp的受體,參與神經(jīng)元突起芽發(fā)和生長錐塌陷,抑制神經(jīng)元軸突再生和突觸可塑性。pirb的細胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d3-d6)介導(dǎo)了pirb與nogoa的結(jié)合。近年來關(guān)于阿爾茨海默病(alzheimer’sdisease,ad)研究還發(fā)現(xiàn),pirb是aβ42寡聚體的高親和力受體,親和力達到納摩爾水平。pirb的前兩個細胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d1-d2)介導(dǎo)了aβ42寡聚體和pirb的相互作用,導(dǎo)致絲切蛋白(cofilin)信號通路****組織化學(xué)染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)。靜安區(qū)正規(guī)疾病動物模型建模

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