通過(guò)基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí)，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。dU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒找哪家比較安心？上海東寰不錯(cuò)。江蘇品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

    試劑盒以外自備試劑和儀器：●PBS●純水●1%乙酸●移液器及吸頭●有515nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀使用方法：使用注意事項(xiàng)：●接種時(shí)注意細(xì)胞懸液一定要混勻，以避免細(xì)胞沉淀下來(lái)，導(dǎo)致每孔中的細(xì)胞數(shù)量不等，可以每接種幾個(gè)孔就混勻一下。培養(yǎng)板周?chē)蝗着囵B(yǎng)基容易揮發(fā)，為了減少誤差，建議培養(yǎng)板的四邊每孔只加培養(yǎng)基，而不作為指標(biāo)檢測(cè)孔。●培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類(lèi)的不同和每孔內(nèi)細(xì)胞數(shù)量的多少而異?！裼盟蛞宜嵯醇?xì)胞時(shí)充滿孔后保持一會(huì)倒掉即可，也可以用排或洗板機(jī)?！馩D值在1-2之間較好。以96孔板為例：1．取出培養(yǎng)好待測(cè)的96孔板。2．在培養(yǎng)基表面小心加入50μl固定液(懸浮細(xì)胞加100μl固定液)，靜置5分鐘后放入4℃冰箱30分鐘-1小時(shí)。(貼壁細(xì)胞可棄培養(yǎng)基后加入用水3倍稀釋的固定液；懸浮細(xì)胞必須直接加入固定液，輕加在培養(yǎng)液面，靜置5分鐘后再將平板移至4℃放置1小時(shí)，可使懸浮細(xì)胞固定在培養(yǎng)孔底部)。 上海品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的結(jié)構(gòu)如何組成？

本試劑盒小包裝C0085S如果用于培養(yǎng)的細(xì)胞(6孔板)的檢測(cè)，可以檢測(cè)50個(gè)樣品，每個(gè)樣品的反應(yīng)體系為500μl的Click反應(yīng)液；如果用于96孔板檢測(cè)，可以檢測(cè)500個(gè)樣品，每個(gè)樣品的檢測(cè)體系為50μl的Click反應(yīng)液；如果用于12孔、24孔、48孔或384孔板樣品的檢測(cè)，分別可以檢測(cè)125、250、350和1250個(gè)樣品，每個(gè)樣品推薦的Click反應(yīng)液用量為200μl、100μl、70μl和20μl。小包裝如果用于冰凍或石蠟切片的檢測(cè)，可以檢測(cè)125-250個(gè)樣品，每個(gè)樣品的反應(yīng)體系為100-200μl的Click反應(yīng)液。大包裝C0085L可檢測(cè)樣品的數(shù)量為小包裝C0085S的4倍。

該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察；如果條件限制，請(qǐng)于4°C條件下避光濕潤(rùn)保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片，可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測(cè)。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)，操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒到底有什么好處？

EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒BeyoClick? EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(DAB法)(BeyoClick? EdU Cell Proliferation Kit with DAB)，是一種基于DNA合成過(guò)程中胸腺嘧啶脫氧核苷(thymidine)類(lèi)似物EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine)的摻入，并通過(guò)隨后的點(diǎn)擊反應(yīng)(Click reaction)使EdU被生物素(Biotin)所標(biāo)記，然后加入的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素(HRP-Streptavidin)與生物素結(jié)合，再然后通過(guò)DAB顯色，從而實(shí)現(xiàn)簡(jiǎn)單、快速、高靈敏地檢測(cè)細(xì)胞增殖的試劑盒。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒如何發(fā)揮重要作用？上海東寰告訴您。江蘇咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

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    直接測(cè)定DNA合成是細(xì)胞增殖檢測(cè)的準(zhǔn)確方法之一，的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類(lèi)似物-EdU（5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷），在細(xì)胞增殖時(shí)EdU能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中，利用EdU與染料之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析，可以有效地檢測(cè)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色（BrdU）檢測(cè)方法相比(圖1)，更簡(jiǎn)單，更快速，更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散，不需要嚴(yán)格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。EdU分析方法反應(yīng)條件比較溫和，我們提供的一系列AndyFluor?染料標(biāo)記可以用于多色通道選擇。 江蘇品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

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