1、動物模型名稱:環(huán)磷酰胺致白細(xì)胞減少癥小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環(huán)境:SPF級,1、實驗方法:環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)。小鼠按30mg/kg體重劑量腹腔注射環(huán)磷酰胺,連續(xù)注射5d。所有小鼠在注射前、注射第3、5日,以及停止注射第2、5、8、11、15日時分別**作外周血象檢測,觀察外周血白細(xì)胞總數(shù)。***1次檢測觀察后麻醉處死小鼠,取其股骨,用Hanks液沖洗骨髓細(xì)胞,顯微鏡下觀察骨髓有核細(xì)胞數(shù)。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):模型組小鼠的外周血白細(xì)胞總數(shù)明顯降低,鏡下觀察模型組小鼠的骨髓有核細(xì)胞數(shù)較正常對照組小鼠明顯降低。這類動物疾病模型是指各種疾病共同性的一些病理變化過程的模型。非酒肝疾病動物模型建模購買
球囊拉傷致高脂血癥動脈硬化兔模型,實驗動物種屬:新西蘭兔,實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:用球囊拉傷誘導(dǎo)法。采用3%戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉,經(jīng)右股淺動脈,將3.5F球囊擴(kuò)張導(dǎo)管插至腹主動脈20cm,球囊充液膨脹至2個大氣壓緩慢拉出,反復(fù)3次。球囊拉傷手術(shù)后,動物喂以高脂飼料,連續(xù)9周,每天給料兩次,自由飲水。實驗結(jié)束后取腹主動脈斑塊進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):腹主動脈斑塊病理鏡下可見腹主***程度的改變。阿爾茲海默癥疾病動物模型建模購買如何定義好的小鼠疾病模型?
新華社上海4月9日電(記者張建松)利用先進(jìn)的基因編輯技術(shù),我國科學(xué)家在***神經(jīng)性疾病的基礎(chǔ)研究方面,取得重要進(jìn)展。***在小鼠模型上,成功恢復(fù)長久性視力損傷小鼠的視力,同時還基本消除了帕金森模型小鼠的疾病癥狀。在科技部、國家自然科學(xué)基金委、中國科學(xué)院、上海市的相關(guān)項目資助下,由中國科學(xué)院腦科學(xué)與智能技術(shù)***創(chuàng)新中心(神經(jīng)科學(xué)研究所)、上海腦科學(xué)與類腦研究中心、神經(jīng)科學(xué)國家重點實驗室楊輝研究組完成的這項研究,通過基因編輯技術(shù),成功誘導(dǎo)膠質(zhì)細(xì)胞“變身”為神經(jīng)元。這為阿爾茲海默癥、帕金森癥、青光眼等眾多神經(jīng)退行性疾病的***,探索了一個新的途徑。國際**學(xué)術(shù)期刊《細(xì)胞》8日在線發(fā)表了相關(guān)研究論文。人類的神經(jīng)系統(tǒng)包含成百上千種不同類型的神經(jīng)元。在成熟的神經(jīng)系統(tǒng)中,神經(jīng)元一般不會再生,一旦死亡,就是長久性的。而神經(jīng)元的死亡,則會導(dǎo)致不同的神經(jīng)退行性疾病。在常見的神經(jīng)性疾病中,視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞死亡導(dǎo)致的長久性失明和多巴胺神經(jīng)元死亡導(dǎo)致的帕金森癥尤為特殊,它們都是由于特殊類型的神經(jīng)元死亡所導(dǎo)致的。如何在成體中讓視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和多巴胺神經(jīng)元獲得再生?研究人員對小鼠模型的膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行了基因編輯。
設(shè)計了一套能夠特異性標(biāo)記“穆勒膠質(zhì)細(xì)胞”的系統(tǒng),再將能誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞形成的基因編輯系統(tǒng),包裝成“病毒”,注射到小鼠的視網(wǎng)膜。約1個月后,研究人員在小鼠的視網(wǎng)膜視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層,發(fā)現(xiàn)了由穆勒膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化而來的視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。這些誘導(dǎo)而來的視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,不僅可以對光刺激產(chǎn)生相應(yīng)的電信號,還可以和大腦中正確的腦區(qū)建立功能性聯(lián)系,將視覺信號傳輸?shù)酱竽X,成功恢復(fù)視覺功能。進(jìn)一步的研究還表明,通過這一基因編輯技術(shù),還能將小鼠模型中特定區(qū)域的“星形膠質(zhì)細(xì)胞”非常高效地轉(zhuǎn)分化為多巴胺神經(jīng)元。轉(zhuǎn)分化而來的多巴胺神經(jīng)元,能將帕金森模型小鼠的運動障礙,逆轉(zhuǎn)到接近正常小鼠的水平。這項研究的負(fù)責(zé)人楊輝指出,盡管將膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的基因編輯技術(shù)在實驗室里取得重要進(jìn)展,但要將研究成果真正應(yīng)用于人類疾病的***,還有很多工作要做。人類的視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞能否再生?帕金森患者是否能通過該方法被***?研究人員今后將從小鼠模型轉(zhuǎn)到靈長類模型,進(jìn)一步深入研究。利用動物疾病模型來研究人類疾病可以克服平時一些不易見到不便于在病人身上進(jìn)行實驗的人類疾病的研究。
1、動物模型名稱:卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁致支氣管***豚鼠模型2、實驗動物種屬:豚鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:7~8周齡5、實驗動物體重:250~350g6、實驗動物環(huán)境:SPF級。1、實驗方法:卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁誘導(dǎo)。每只豚鼠腹腔注射100μg卵清蛋白(OVA)+30mg氫氧化鋁(Al(OH)3)致敏。***次致敏后第5天再致敏1次,共2次。***一次致敏后第21d開始采用超聲霧化器噴霧10μgOVA/只,豚鼠置于一直徑約50cm的有蓋大圓盆中,給藥過程中對盆內(nèi)通O2。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):使用OVA噴霧激發(fā)后癥狀觀察,豚鼠出現(xiàn)不同程度的呼吸急促、咳嗽、抓癢、甚至抽搐等支氣管***癥狀,表明成功構(gòu)建了豚鼠***模型。大鼠疾病建模請找上海東寰。阿爾茲海默癥疾病動物模型建模
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具體實施方式下面結(jié)合附圖和具體實施方式對發(fā)明作進(jìn)一步闡述。本發(fā)明構(gòu)建了pirb基因敲入的小鼠動物模型,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)。具體來說,構(gòu)建一個cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒,將其克隆進(jìn)入rosa26基因的內(nèi)含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的七號染色體。本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠動物模型的構(gòu)建方法,具體按照以下步驟具體實施:步驟1、根據(jù)小鼠rosa26基因(genebank:))序列,利用cas-desigher軟件在1號內(nèi)含子設(shè)計grna靶序列,并搜索小鼠dbm-db基因組數(shù)據(jù)庫基因,采用crispr脫靶效應(yīng)軟件cas-offinder檢測潛在的脫靶位點:**終選取兩個grna,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如:seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg將grna1和grna2分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu);步驟2、利用c57bl/6小鼠文庫bac克隆,通過pcr擴(kuò)增獲得pirb基因cds的同源臂,采用in-fusion方法構(gòu)建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的質(zhì)粒打靶載體,通過酶切、pcr及測序?qū)Υ虬匈|(zhì)粒載體進(jìn)行驗證,圖1為構(gòu)建好的pirb基因打靶載體的示意圖。非酒肝疾病動物模型建模購買
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