急性肺損傷模型大鼠(右)與對照組大鼠肺部照片對比5.2.2肺的濕/干重比檢測：肺的濕/干重比是反應(yīng)肺水腫的直接指標(biāo)，也是反應(yīng)肺損傷嚴(yán)重程度的敏感指標(biāo)。在急性肺損傷發(fā)生后，大量液體滲出至肺泡和肺間質(zhì)，導(dǎo)致肺的重量增大，而肺的干重則不受影響。處死大鼠、剪斷氣管后取全肺，稱濕重，然后將肺置于65℃恒溫箱中干燥，24h后取出稱干重，計算肺濕/干重比值。圖7.急性肺損傷模型大鼠(ALI)與對照組大鼠肺干濕重比隨不同時間點(diǎn)的變化。5.2.3肺泡盥洗液（BALF）中細(xì)胞計數(shù)：小鼠取血后，開胸，分離縱膈，注射器抽取3ml生理鹽水從氣管插管推入肺中，每次反復(fù)灌洗3次后抽出灌洗液，肺泡灌洗液以4℃3000r/min離心15min，取上清，保存于-80度用于后續(xù)檢測。上海東寰疾病動物模型建模。崇明區(qū)酒精肝疾病動物模型建模

即為本發(fā)明構(gòu)建的一種pirb基因敲入的小鼠動物模型。本發(fā)明所采用第二種技術(shù)方案的特點(diǎn)還在于，步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu)。步驟3中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2～10pmol/ul，cas9蛋白的注射濃度為30～100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明提供了pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構(gòu)建方法，本發(fā)明的小鼠動物模型對于pirb基因功能的研究和在體驗證提供了良好的基礎(chǔ)。分離自pirb基因敲入小鼠的細(xì)胞還可以用于研究pirb發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的下游機(jī)制。通過pirb敲入動物模型與不同類型cre小鼠的雜交，可以用于研究ad不同***或不同細(xì)胞類型pirb的調(diào)節(jié)作用。C57小鼠疾病動物模型建模說明書小鼠是人類疾病理想的動物模型不僅因為小鼠在生理上與人類極為相似而且小鼠的遺傳資源非常豐富。

1、動物模型名稱：卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁致支氣管豚鼠模型2、實驗動物種屬：豚鼠3、實驗動物性別：雌雄不限4、實驗動物年齡：7~8周齡5、實驗動物體重：250~350g6、實驗動物環(huán)境：SPF級。1、實驗方法：卵清蛋白聯(lián)合氫氧化鋁誘導(dǎo)。每只豚鼠腹腔注射100μg卵清蛋白（OVA）+30mg氫氧化鋁（Al(OH)3）致敏。次致敏后第5天再致敏1次，共2次。一次致敏后第21d開始采用超聲霧化器噴霧10μgOVA/只，豚鼠置于一直徑約50cm的有蓋大圓盆中，給藥過程中對盆內(nèi)通O2。

麻醉小鼠，仰臥固定于實驗臺上，頸部去毛后酒精消毒，切開皮膚，逐層暴露氣管，將1mL注射器經(jīng)兩氣管軟骨環(huán)間隙朝向心端刺入氣管，回抽無阻力，則注入博萊霉素5mg/kg/L（對照組注入等量的生理鹽水）。手術(shù)完畢后迅速將動物直立、旋轉(zhuǎn)，使藥液在肺內(nèi)分布均勻，動物清醒后常規(guī)飼養(yǎng)。4.2模型鑒定及后續(xù)檢測：肺纖維化模型發(fā)展時間：給藥后第7天肺組織大多呈重度肺泡炎改變，肺泡腔及肺間質(zhì)內(nèi)有大量中性粒細(xì)胞浸潤，部分肺泡腔破壞或消失，肺間隔內(nèi)成纖維細(xì)胞和增生，與正常肺組織對比差別明顯；給藥后第14天，肺纖維化開始形成。巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等炎性細(xì)胞明顯減少，成纖維細(xì)胞增多，肺泡間隔明顯增厚，有膠原沉積。給藥后第28天，多數(shù)小鼠發(fā)生彌漫性肺間質(zhì)纖維化，肺間質(zhì)被膠原纖維和成纖維細(xì)胞替代，肺泡壁破壞，肺大泡形成，但仍可見炎性細(xì)胞浸潤。查閱已有的相關(guān)小鼠模型綜述文獻(xiàn)。

在cns，pirb是髓鞘抑制因子nogo-a、mag、omgp的受體，參與神經(jīng)元突起芽發(fā)和生長錐塌陷，抑制神經(jīng)元軸突再生和突觸可塑性。pirb的細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d3-d6)介導(dǎo)了pirb與nogoa的結(jié)合。近年來關(guān)于阿爾茨海默病(alzheimer’sdisease，ad)研究還發(fā)現(xiàn)，pirb是aβ42寡聚體的高親和力受體，親和力達(dá)到納摩爾水平。pirb的前兩個細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d1-d2)介導(dǎo)了aβ42寡聚體和pirb的相互作用，導(dǎo)致絲切蛋白(cofilin)信號通路****組織化學(xué)染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)。疾病動物模型建模有加些方式？閔行區(qū)疾病動物模型建模優(yōu)勢

小鼠疾病模型應(yīng)用于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中的思路與策略該研究從臨床患者中篩選到潛在的致病基因。崇明區(qū)酒精肝疾病動物模型建模

建立肝動物模型的主要方式有二乙基亞硝胺（DEN）誘發(fā)大鼠肝4-二甲基氨基偶氮苯（DBA）誘發(fā)大鼠肝。用2-乙酰氨基酸（2AAF）誘發(fā)大鼠肝。用亞氨基偶氮甲苯（OAAT）誘發(fā)大鼠肝。用黃曲霉素誘發(fā)大鼠。2、胃：制備胃動物模型的主要方式有①甲基膽蒽（MC）誘發(fā)小鼠胃。②不對稱亞硝胺誘發(fā)小鼠胃。二、消化性潰瘍動物模型（animalmodelofpepticulcer）1、應(yīng)激性潰瘍模型是研究抗?jié)兯幬锏某Ｓ媚Ｐ汀?、組胺性潰瘍模型：大鼠禁食后腹部皮下注射磷酸組胺。此法也可誘發(fā)食管、胃、十二指腸等發(fā)生潰瘍。是研究潰瘍發(fā)生機(jī)制及***藥物的常用模型。崇明區(qū)酒精肝疾病動物模型建模

上海東寰生物科技有限公司目前已成為一家集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售相結(jié)合的服務(wù)型企業(yè)。公司成立于2015-09-24，自成立以來一直秉承自我研發(fā)與技術(shù)引進(jìn)相結(jié)合的科技發(fā)展戰(zhàn)略。本公司主要從事原代細(xì)胞，細(xì)胞增殖與凋亡，細(xì)胞檢測試劑盒，動物疾病模型領(lǐng)域內(nèi)的原代細(xì)胞，細(xì)胞增殖與凋亡，細(xì)胞檢測試劑盒，動物疾病模型等產(chǎn)品的研究開發(fā)。擁有一支研發(fā)能力強(qiáng)、成果豐碩的技術(shù)隊伍。公司先后與行業(yè)上游與下游企業(yè)建立了長期合作的關(guān)系。東寰生物致力于開拓國內(nèi)市場，與商務(wù)服務(wù)行業(yè)內(nèi)企業(yè)建立長期穩(wěn)定的伙伴關(guān)系，公司以產(chǎn)品質(zhì)量及良好的售后服務(wù)，獲得客戶及業(yè)內(nèi)的一致好評。上海東寰生物科技有限公司本著先做人，后做事，誠信為本的態(tài)度，立志于為客戶提供原代細(xì)胞，細(xì)胞增殖與凋亡，細(xì)胞檢測試劑盒，動物疾病模型行業(yè)解決方案，節(jié)省客戶成本。歡迎新老客戶來電咨詢。