建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請(qǐng)于4°C條件下避光濕潤保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測(cè)。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒,有哪些好處值得選擇?上海品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)
細(xì)胞增殖分析是細(xì)胞生長和分化研究的關(guān)鍵,在藥物開發(fā)階段常用來評(píng)估化學(xué)藥物的毒性和對(duì)細(xì)胞生長的控制作用。經(jīng)過之后的細(xì)胞分裂階段,各個(gè)子代細(xì)胞會(huì)從母細(xì)胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細(xì)胞儀對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析,即可測(cè)定出自標(biāo)記結(jié)合起,單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。通常根據(jù)平均DNA含量或細(xì)胞代謝參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè),此類分析可以報(bào)告出總細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞數(shù)目,或者測(cè)定出單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的DNA合成情況。細(xì)胞增殖染料稀釋分析主要基于細(xì)胞膜通透性,熒光團(tuán)分子、染料進(jìn)入細(xì)胞后,將會(huì)共價(jià)結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團(tuán)上,從而使染料能夠長時(shí)間停留在細(xì)胞中。浙江咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理上海東寰告訴您如何正確使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒?
細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法通過檢測(cè)滲入DNA復(fù)制期間的EdU,借助熒光檢測(cè)工具即可準(zhǔn)確地檢測(cè)出新增殖的細(xì)胞,快速統(tǒng)計(jì)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù),分析細(xì)胞增殖情況。該方法簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確,適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測(cè),尤其適用于高通量篩選試驗(yàn),如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。
直接測(cè)定DNA合成是細(xì)胞增殖檢測(cè)的準(zhǔn)確方法之一,EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類似物-EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷),在細(xì)胞增殖時(shí)EdU能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,利用EdU與染料之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析,可以有效地檢測(cè)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比(圖1),更簡單,更快速,更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。EdU分析方法反應(yīng)條件比較溫和,我們提供的一系列AndyFluor?染料標(biāo)記可以用于多色通道選擇,也可以用于培養(yǎng)細(xì)胞分析及組織切片分析(圖2)。上海哪家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒值得信賴?
羥基脲(Hydroxyurea)為DNA合成抑制劑,經(jīng)過10mM羥基脲提0min處理的細(xì)胞,綠色熒光陽性的細(xì)胞幾乎完全消失,因此常被用作EdU實(shí)驗(yàn)的陰性對(duì)照。配制好的Click-iT Additive Solution請(qǐng)根據(jù)每次用量適當(dāng)分裝后-20℃保存,避免反復(fù)凍融。Click-iT Additive Solution融化后有白色物質(zhì)析出為正?,F(xiàn)象,請(qǐng)上下顛倒幾次,待全部溶解后使用。溶液一旦呈現(xiàn)棕色,則說明有效成分降解,不能再使用。皂苷促滲液可以用于全血及含紅細(xì)胞的細(xì)胞懸液,以及其他含多種細(xì)胞類型的混合細(xì)胞懸液的通透。這種促滲液可以在裂解紅細(xì)胞的同時(shí),維持白細(xì)胞的光散射特性。本試劑盒做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)可能需要更多的EdU,請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求用合適稀釋液稀釋后使用。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒使用時(shí)的注意事項(xiàng)。北京如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)
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EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。上海品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)
上海東寰生物科技有限公司坐落在上海市嘉定區(qū)興賢路1180號(hào)5幢2樓206室,是一家專業(yè)的經(jīng)營范圍為:從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù)。化工產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用物品、易制毒化學(xué)品)的銷售。【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動(dòng)】。公司。一批專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),是實(shí)現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標(biāo)的基礎(chǔ),是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動(dòng)力。誠實(shí)、守信是對(duì)企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造***的原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測(cè)試劑盒,動(dòng)物疾病模型。公司憑著雄厚的技術(shù)力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實(shí)的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德,樹立了良好的原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測(cè)試劑盒,動(dòng)物疾病模型形象,贏得了社會(huì)各界的信任和認(rèn)可。