EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點擊反應(yīng)(Clickreaction)，其反應(yīng)原理參見圖1。通過點擊反應(yīng)，新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記，從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細(xì)胞。EdU檢測法中的點擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。上海哪家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒值得信賴？口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

傳統(tǒng)的免疫熒光染色（BrdU）檢測方法需要DNA變性，抗原修復(fù)，抗原抗體過夜孵育，操作步驟復(fù)雜繁瑣。并且由于BrdU抗體分子較大，嵌入DNA分子中的BrdU無法直接與BrdU抗體結(jié)合，必須先進(jìn)行DNA變性操作才能使BrdU抗原表位暴露，但變性的程度可能導(dǎo)致錯誤結(jié)果。如果變性不充分，會導(dǎo)致BrdU難以暴露，無法檢測，而且變性過程從邊緣向中間滲透，會導(dǎo)致細(xì)胞核DNA的變性不均勻，邊緣模糊不清。如果變性過分，則會導(dǎo)致DNA斷裂，甚至降解，導(dǎo)致核染不均一。另外，不同抗體試劑公司的抗體質(zhì)量不一致，造成難以確保實驗重復(fù)性，且容易產(chǎn)生假陽性結(jié)果。福建品牌EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價dU細(xì)胞增殖檢測試劑盒找哪家比較安心？上海東寰不錯。

以及酶或熒光偶聯(lián)二抗，檢測單細(xì)胞水平的DNA合成（BrdUbased）。前者通過免疫熒光檢測，后者通過熒光顯微鏡檢測。優(yōu)點是：使用核酸酶變性DNA，在不傷害細(xì)胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。體內(nèi)外均可進(jìn)行標(biāo)記，且可同時使用其他標(biāo)記進(jìn)行檢測，操作安全簡便。適用于貼壁或懸浮細(xì)胞，冰凍或福爾馬林包埋組織切片。EdU與BrdU檢測法不同，EdU-Click檢測，如EdU-Click594（BCK-EDU594）無需進(jìn)行DNA變性來檢測摻入的EdU，而是通過一次快速、高度特異性的點擊反應(yīng)，將EdU高效地?fù)饺氲叫潞铣傻腄NA之中,通過EdU與不同熒光染料的特異性反應(yīng)檢測DNA復(fù)制活性，從而確地反映細(xì)胞的增殖情況。這一類細(xì)胞增殖用熒光標(biāo)記采用溫和的點擊實驗方案，準(zhǔn)確且兼容各種抗體實驗方案，整個實驗可在30分鐘內(nèi)完成，在結(jié)果的數(shù)據(jù)豐富程度方面，堪比多重分析方法。

細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展前景如何呢？

與BrdU方法相比，EdU檢測方法無需DNA變性，無需抗原修復(fù)，無需抗原抗體反應(yīng)，更簡單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確，是細(xì)胞增殖檢測的比較好選擇。更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免變性帶來的樣品損傷，確保細(xì)胞核邊緣清晰完整；更簡單--無需抗原抗體反應(yīng)，基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法，簡單高效，反應(yīng)單需要幾分鐘；更靈敏--無需抗體，檢測染料單為BrdU抗體的1/500，更容易擴散，即使單個增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測；更快速--無需過夜，省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟，完成整個檢測周期單需2.5小時；更兼容--對樣品幾乎無損傷，更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記，能夠同時檢測細(xì)胞其他性狀特征EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒，有哪些好處值得選擇？江蘇哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好

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