實(shí)驗(yàn)第21天起將小鼠置于霧化激發(fā)器內(nèi)，給予2%OVA生理鹽水霧化激發(fā)，1次/d，每次30min，連續(xù)7天，將小鼠呼吸急促，搔鼻抓癢、嗆咳煩躁、點(diǎn)頭運(yùn)動等作為小鼠模型成功的標(biāo)準(zhǔn)。正常對照組以生理鹽水代替OVA腹腔注射和霧化激發(fā)，操作同上所述。6.2模型鑒定及后續(xù)檢測：6.2.1小鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)TH2型細(xì)胞因子蛋白水平檢測待造模完成后，抽取BALF后用ELISA方法檢測其中TSLP、IL-33和MUC5AC的表達(dá)情況。附支氣管肺泡灌洗液抽取方法：小鼠取血后，開胸，分離縱膈，注射器抽取3ml生理鹽水從氣管插管推入肺中，每次反復(fù)灌洗3次后抽出灌洗液，肺泡灌洗液以4℃3000r/min離心15min，取上清。結(jié)果顯示：模型小鼠與對照組小鼠相比，炎性因子及趨化因子水平均有性升高。上海東寰為您提供完善的大鼠動物疾病模型。疾病動物模型建模原理

1、動物模型名稱：角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬：新西蘭兔3、實(shí)驗(yàn)動物性別：雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動物年齡：2~3月齡5、實(shí)驗(yàn)動物體重：1.8~2.5kg6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境：SPF級。1、實(shí)驗(yàn)方法：角膜環(huán)鉆致兔角膜機(jī)械性損傷。耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射速眠新Ⅱ進(jìn)行兔麻醉。環(huán)鉆前先用2%硼酸溶液沖洗雙眼，再滴0.25%氯霉素眼藥水2滴消毒，以保持結(jié)膜清潔。開瞼，滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉，用已滅菌的6mm角膜環(huán)鉆分別在兔眼角膜上作環(huán)切，并滴入2滴氯霉素眼藥水潤洗，用顯微眼鑷、角膜上皮鏟和精細(xì)眼剪小心去掉角膜損傷區(qū)域上皮，術(shù)畢，滴氯霉素眼藥水2滴。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。鹽城Balbc裸鼠疾病動物模型建模驗(yàn)性動物模型是指研究者通過使用物理的、化學(xué)的和生物的致病因素作用于動物。

因此利用動物疾病模型來研究人類疾病，可以克服平時一些不易見到，而且不便于在病人身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的各種人類疾病的研究。同時還可克服人類疾病發(fā)展緩慢，潛伏期長，發(fā)病原因多樣，經(jīng)常伴有各種其它疾病等因素的干擾，可以用單一的病因，在短時間內(nèi)復(fù)制出典型的動物疾病模型，對于研究人類各種疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律和防治疾病療效的機(jī)理等是極為重要的手段和工具。疾病動物模型的優(yōu)越性生物醫(yī)學(xué)研究的進(jìn)展常常依賴于使用動物模型作為實(shí)驗(yàn)假說和臨床假說二者的試驗(yàn)基礎(chǔ)。

步驟i.將步驟h的吸附柱放入收集管，12000rpm離心2min。步驟j.吸附柱放到一個新的，在吸附柱膜**加入50～200μl滅菌水或者洗脫液，停留5min。(將無菌水或者洗脫液加熱到65℃能夠增加洗脫的得率)。步驟i.基因組dna定量，洗脫的基因組dna可以通過電泳鑒定。方法2：一種低成本基因組dna的粗提方法：步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm)，放入離心管中，加入100μl尾部消化緩沖液，注意不要剪尾太長；步驟b.將離心管及其內(nèi)容物于56℃孵育過夜；步驟c.過夜后將離心管于98℃孵育13min，使蛋白酶k失活；步驟d.在微型離心機(jī)以**大轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)15min，上清直接用于pcr體系(每50μlpcr體系加入上清2μl)。尾消化緩沖液成分：50mmkcl10mmtris-hcl()％tritonx-100(b)長鏈pcr反應(yīng)：長鏈引物：pcrprimers1(℃):擴(kuò)增片段：5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):擴(kuò)增片段：3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述兩條擴(kuò)增片段，野生型等位基因沒有擴(kuò)增產(chǎn)物。很多自發(fā)性動物模型在研究人類疾病時具有重要的價值。

1、動物模型名稱：二甲基苯蒽(DMBA)致乳腺*大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別：雌性4、實(shí)驗(yàn)動物年齡：6~8周齡5、實(shí)驗(yàn)動物體重：80~100g6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境：SPF級1、實(shí)驗(yàn)方法：二甲基苯并蒽(DMBA)誘導(dǎo)。大鼠按100mg/kg體重于臀部皮下一次性注射10mg/mL的DMBA溶液1次。正常飼養(yǎng)致24周。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：模型組大鼠第5對乳房直徑在各測定時間點(diǎn)與正常對照組比較有***性差異；大鼠注射致*劑后乳腺上皮組織逐漸發(fā)生有規(guī)律的變化，乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞首先發(fā)生上皮增生、不典型增生，并逐漸加重，在第9周時可見同一大鼠的多個乳腺出現(xiàn)不同程度的導(dǎo)管上皮增生和不典型增生。第13周開始發(fā)現(xiàn)>3mm的乳腺*，至第24周時70%的大鼠發(fā)生乳腺*，并可見一只大鼠同時發(fā)生多個乳腺*，而同一大鼠的其他乳腺亦呈現(xiàn)出不同程度的上皮細(xì)胞增生和不典型增生，提示處于*發(fā)生的不同進(jìn)展階段。小鼠疾病建模請找上海東寰。徐匯區(qū)疾病動物模型建模供應(yīng)商

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2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升，同樣，只有2mg組有明顯升高(p＜)，如圖3所示。表3表4②體重變化：(mean±sd)，如圖4所示：2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比，大鼠體重***下降(p＜，注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比，大鼠體重***下降(p＜，注射第4天開始)，直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比，大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p＜)，4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量：如表5、圖5所示，2mg、6mg組大鼠在經(jīng)過順鉑注射后卵巢重量相比對照組，都有不同程度縮減，其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p＜)，4mg、6mg組無明顯差異。表5④動情周期觀察(陰道涂片)：3mg組動物死亡時間早，無完整的動情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動情周期4-5天。分為四個階段，動情前期：撇圓形有核上皮細(xì)胞占絕大多數(shù)，白細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖a)。動情期：角化上皮細(xì)胞占多大多數(shù)，由散在增至集白細(xì)胞和有核上皮細(xì)胞很少(圖b)。動情后期：片狀角化上皮細(xì)胞，有核上皮細(xì)胞和白細(xì)胞3種都有，無太大差異(圖c)。動情間期：白細(xì)胞占絕大多數(shù)，有核上皮細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖d)。表6⑤病理結(jié)果：如圖7所示疾病動物模型建模原理

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