該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術(shù)方案是:pirb基因敲入的小鼠動物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點grna1和grna2,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi),所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術(shù)方案為:pirb基因敲入的小鼠動物模型的構(gòu)建方法,具體按照以下步驟實施:步驟1、基于crispr/cas9技術(shù)構(gòu)建針對c57bl/6j小鼠rosa26基因的特異性grna1和grna2,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如;步驟2、構(gòu)建“cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya”基因盒打靶載體,將打靶載體進行線性化處理;步驟3、步驟2中將含有l(wèi)oxp位點打靶載體、步驟1中有活性的grna1和grna2與cas9蛋白共同注射進入**小鼠受精卵中,獲得f0代小鼠;步驟4、將步驟3中性成熟的陽性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代,獲得f1代雜合子小鼠,通過pcr、測序和southern雜交確定動物基因型;步驟5、將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。上海東寰在動物建模方面已經(jīng)有了多年的技術(shù)經(jīng)驗。宿遷口碑好的疾病動物模型建模
pirb在軸突生長錐表達,位于富含肌動蛋白的前緣和synapsin免疫陽性的囊泡中,在神經(jīng)元突起的表達呈點狀分布。文獻表明,pirb表達隨年齡增加,特別是在老齡認知損傷的小鼠海馬中,pirb能夠抑制軸突再生和突觸可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚體對海馬長時程增強的破壞作用需要pirb的參與,在ad轉(zhuǎn)基因模型中,pirb不僅參與成年小鼠記憶缺失,而且介導(dǎo)幼年小鼠視皮層突觸可塑性的丟失。這些研究提示我們,pirb參與突觸可塑性,抑制pirb可能對ad起到效應(yīng)。泰州成瘤疾病動物模型建模可以克服人類某些疾病潛伏期長,病程長和發(fā)病率低的缺點。
步驟i.將步驟h的吸附柱放入收集管,12000rpm離心2min。步驟j.吸附柱放到一個新的,在吸附柱膜**加入50~200μl滅菌水或者洗脫液,停留5min。(將無菌水或者洗脫液加熱到65℃能夠增加洗脫的得率)。步驟i.基因組dna定量,洗脫的基因組dna可以通過電泳鑒定。方法2:一種低成本基因組dna的粗提方法:步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入離心管中,加入100μl尾部消化緩沖液,注意不要剪尾太長;步驟b.將離心管及其內(nèi)容物于56℃孵育過夜;步驟c.過夜后將離心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步驟d.在微型離心機以**大轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)15min,上清直接用于pcr體系(每50μlpcr體系加入上清2μl)。尾消化緩沖液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)長鏈pcr反應(yīng):長鏈引物:pcrprimers1(℃):擴增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):擴增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述兩條擴增片段,野生型等位基因沒有擴增產(chǎn)物。
1、動物模型名稱:酒精誘導(dǎo)的肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:150g-160g6、實驗動物環(huán)境:SPF級。1、實驗方法:用酒精誘導(dǎo)法。大鼠每天按10mL/kg體重灌服酒精混合物(酒精:吡唑:玉米油=10mL:25mg:2mL)造模,每周2次按0.3mL/kg劑量腹腔注射給予CCl4:橄欖油=1:3,連續(xù)灌服60天。解剖取肝臟進行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標準:肝組織可見肝硬化病理改變(S1級~S4級)。小鼠疾病模型應(yīng)用于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中的思路與策略該研究從臨床患者中篩選到潛在的致病基因。
呼吸系統(tǒng)疾病動物模型(animalmodelofrespiratorydiseases)1、肺炎動物模型:通過在主支氣管注入活菌液。2、肺氣腫模型:給動物氣管內(nèi)或靜脈內(nèi)注入一定量木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、致熱溶解酶、敗血酶以及由膿性痰和白細胞分離出來的蛋白酶等,可復(fù)制成實驗性肺氣腫。以木瓜蛋白酶形成的實驗性肺氣腫病變明顯而且典型。3、肺水腫模型:用氧化氮吸入可造成大鼠和小鼠中毒性肺水腫,或用氣管內(nèi)注入50%葡萄糖液引起滲透性肺水腫。4、肺纖維化模型:氣管內(nèi)注入博來霉素是目前常用復(fù)制肺纖維化動物模型方法。疾病動物模型建模公司哪家好?正規(guī)疾病動物模型建模說明書
這類動物疾病模型是指各種疾病共同性的一些病理變化過程的模型。宿遷口碑好的疾病動物模型建模
球囊拉傷致高脂血癥動脈硬化兔模型,實驗動物種屬:新西蘭兔,實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:用球囊拉傷誘導(dǎo)法。采用3%戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉,經(jīng)右股淺動脈,將3.5F球囊擴張導(dǎo)管插至腹主動脈20cm,球囊充液膨脹至2個大氣壓緩慢拉出,反復(fù)3次。球囊拉傷手術(shù)后,動物喂以高脂飼料,連續(xù)9周,每天給料兩次,自由飲水。實驗結(jié)束后取腹主動脈斑塊進行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標準:腹主動脈斑塊病理鏡下可見腹主***程度的改變。宿遷口碑好的疾病動物模型建模
上海東寰生物科技有限公司成立于2015-09-24年,在此之前我們已在原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型行業(yè)中有了多年的生產(chǎn)和服務(wù)經(jīng)驗,深受經(jīng)銷商和客戶的好評。我們從一個名不見經(jīng)傳的小公司,慢慢的適應(yīng)了市場的需求,得到了越來越多的客戶認可。公司主要經(jīng)營原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型,公司與原代細胞,細胞增殖與凋亡,細胞檢測試劑盒,動物疾病模型行業(yè)內(nèi)多家研究中心、機構(gòu)保持合作關(guān)系,共同交流、探討技術(shù)更新。通過科學(xué)管理、產(chǎn)品研發(fā)來提高公司競爭力。東寰生物嚴格按照行業(yè)標準進行生產(chǎn)研發(fā),產(chǎn)品在按照行業(yè)標準測試完成后,通過質(zhì)檢部門檢測后推出。我們通過全新的管理模式和周到的服務(wù),用心服務(wù)于客戶。上海東寰生物科技有限公司依托多年來完善的服務(wù)經(jīng)驗、良好的服務(wù)隊伍、完善的服務(wù)網(wǎng)絡(luò)和強大的合作伙伴,目前已經(jīng)得到商務(wù)服務(wù)行業(yè)內(nèi)客戶認可和支持,并贏得長期合作伙伴的信賴。