EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液；(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解，即為可用的緩沖添加劑的濃度，建議現(xiàn)用現(xiàn)配；注：緩沖添加劑為白色粉末，較難準(zhǔn)確稱量，稱量范圍可稍微放寬，但是不應(yīng)超過±20%，且該粉末較易氧化，使用后請旋緊管蓋，如試劑出現(xiàn)棕黃色，則需報廢或更換。(c)按照以下的表格進(jìn)行染色反應(yīng)液的配制：該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。上海東寰告訴您如何正確使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒？江蘇咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商

EdU細(xì)胞增殖檢測和BrdU細(xì)胞增殖檢測的對比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)不需要DNA變性，就可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測分析，該反應(yīng)不受雙鏈DNA中堿基對的影響，因此客戶了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒對細(xì)胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細(xì)胞2小時，然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測細(xì)胞增殖活性，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)（每公斤小鼠注射5mgEdU），分別于0、12、24小時之后取小鼠腸組織，制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,下圖)檢測細(xì)胞的增殖情況，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。北京提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒到底有什么好處？

細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測

細(xì)胞增殖分析是細(xì)胞生長和分化研究的關(guān)鍵，在藥物開發(fā)階段常用來評估化學(xué)藥物的毒性和對細(xì)胞生長的控制作用。通常根據(jù)平均DNA含量或細(xì)胞代謝參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測，此類分析可以報告出總細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞數(shù)目，或者測定出單個細(xì)胞內(nèi)的DNA合成情況。細(xì)胞增殖染料稀釋分析主要基于細(xì)胞膜通透性，熒光團(tuán)分子、染料進(jìn)入細(xì)胞后，將會共價結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團(tuán)上，從而使染料能夠長時間停留在細(xì)胞中。經(jīng)過之后的細(xì)胞分裂階段，各個子代細(xì)胞會從母細(xì)胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細(xì)胞儀對熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析，即可測定出自標(biāo)記結(jié)合起，單個細(xì)胞或細(xì)胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。上海EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展趨勢。

EdU檢測法中的點擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。本試劑盒反應(yīng)簡單、檢測靈敏度高。本試劑盒基于簡單高效的點擊反應(yīng)，無需DNA變性，只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標(biāo)記出摻入的EdU，并且可以檢測到單個細(xì)胞的增殖情況。本試劑盒使用便捷、兼容性好。通過點擊反應(yīng)，新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記，從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細(xì)胞。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域有哪些？江西EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買

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EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散，不需要嚴(yán)格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強(qiáng)調(diào)：“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同，EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成，且不需要進(jìn)行嚴(yán)格的樣品變性處理，使得組織成像更簡單易行?！奔?xì)胞增殖檢測方法基于EdU與Apollo？熒光染料的完美結(jié)合準(zhǔn)確檢測新合成的DNA，簡單，快速，準(zhǔn)確。這種檢測方法非?？焖伲抑恍韬唵蔚膸讉€步驟，因此也適用于高通量篩選試驗，如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞的活力。江蘇咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商