但該方法由于有放射性污染并且很難實現(xiàn)單細胞檢測而受到很大的限制,隨后逐漸被基于抗體檢測的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步驟繁多,且需要使用BrdU抗體,影響因素較多,穩(wěn)定性比較差。并且由于BrdU法需要使用抗體,有時會和其它目的蛋白基于抗體的檢測相互產生干擾。EdU法基于EdU摻入和后續(xù)的點擊反應,無需使用抗體、操作便捷、檢測靈敏度高,是一種在BrdU法基礎上升級換代的新方法,將會逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi?化學發(fā)光法(C0065、C0068)都是基于細胞活性的細胞增殖檢測方法,能檢測到細胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細胞。EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要組成部分。北京品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢
EdU-488細胞增殖檢測試劑盒(Meilun EdU Cell Proliferation Kit with Alexa Fluor 488),是一種利用核苷滲入法對細胞增殖情況進行快速、簡單、高靈敏檢測的試劑盒。其原理為:試劑盒中的EdU(5-ethynyl-2′ -deoxyuridine)是一種胸苷(T)類似物,EdU可以在在細胞周期的S期中替代胸苷摻入到新合成的DNA中;另一方面,EdU上的乙炔基能與疊氮化物(如熒光探針Alexa Fluor 488 Azide)通過Cu+的催化發(fā)生共價反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應非常迅速,被稱作點擊反應(Click reaction)(圖1)。通過點擊反應,新合成的DNA會被綠色熒光標記,然后通過檢測熒光信號實現(xiàn)細胞增殖的檢測。北京品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢EdU細胞增殖檢測試劑盒常見的用途有哪些?上海東寰告訴您。
EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細胞內很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更準確地反映DNA復制活性。
本試劑盒可以檢測到細胞或組織樣品中單個的增殖細胞,同時也可以對細胞或組織樣品總體的細胞增殖情況進行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養(yǎng)的細胞或組織樣品,也可以檢測組織切片,但均需提前進行EdU的摻入。細胞增殖能力的檢測是評估細胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認的精確的檢測細胞增殖的方法是直接檢測細胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細胞增殖的方法是放射性標記核苷摻入法,如氚標記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。EdU細胞增殖檢測試劑盒運用再哪些領域?
EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測細胞增殖,無須抗體,無變性步驟,保持細胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡單,可靠,省事的創(chuàng)新方法。但是,現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒有得到細胞增殖檢測*行之有效,節(jié)約反應時間的方法。Abbkine的EdU檢測試劑盒有兩個型號,分別匹配的是兩種不同的熒光通道,細胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),KTA2030,488通道;細胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(橘紅色熒光),KTA2031,549通道EdU細胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展前景如何呢?上海品牌EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢
上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒的應用范圍。北京品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢
現(xiàn)在有一種新的檢測方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類似物,但其連有的炔羥基團在天然化合物中很少見,在細胞增殖時能夠插入正在復制的DNA分子中,基于EdU與染料的共軛反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細胞百分數(shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比,更簡單,更快速,更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。北京品質好的EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢