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EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)法可以得到高清細(xì)胞增殖現(xiàn)象數(shù)據(jù)圖,可視化展示數(shù)據(jù)、更直觀、更具視覺(jué)效果!與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比,EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。細(xì)胞增殖雖然與多種因素有關(guān),比如細(xì)胞代謝活性、與細(xì)胞增殖相關(guān)的蛋白表達(dá)、ATP的濃度等等。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的原理是什么?上海東寰告訴您。河南品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒
該方法無(wú)需DNA變性,無(wú)需抗原修復(fù),無(wú)需抗原抗體反應(yīng),簡(jiǎn)單、靈敏、快速、準(zhǔn)確,適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測(cè),尤其適用于各種細(xì)胞系的高通量篩選實(shí)驗(yàn),如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU方法無(wú)需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術(shù),在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)。浙江品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家。
CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測(cè)靈敏度不是很高,通常單適用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí),上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過(guò)程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中
EdU檢測(cè)法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。本試劑盒反應(yīng)簡(jiǎn)單、檢測(cè)靈敏度高。本試劑盒基于簡(jiǎn)單高效的點(diǎn)擊反應(yīng),無(wú)需DNA變性,只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標(biāo)記出摻入的EdU,并且可以檢測(cè)到單個(gè)細(xì)胞的增殖情況。本試劑盒使用便捷、兼容性好。通過(guò)點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的應(yīng)用范圍。
alamarBlue®是一種快速、靈敏的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑,適用于人、動(dòng)物細(xì)胞、細(xì)菌和等多種研究對(duì)象,可用于貼壁細(xì)胞和非貼壁細(xì)胞的檢測(cè)。作為一種無(wú)毒、即用型的試劑,alamarBlue®為細(xì)胞增殖分析提供了一種簡(jiǎn)便、快速、安全、經(jīng)濟(jì)、可靠的方法。AlamarBlue®的特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)●使用簡(jiǎn)單方便:即用型的單組分試劑,只需加入培養(yǎng)基即可檢測(cè)細(xì)胞的增殖狀況;產(chǎn)生的還原產(chǎn)物是水溶性的,與其他常用的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法相比,不需要固定、洗滌、提取的步驟●靈活:可通過(guò)分光光度計(jì)或熒光光度計(jì)檢測(cè)●性價(jià)比高:可用于高通量分析●安全:對(duì)細(xì)胞無(wú)毒、無(wú)害,不影響細(xì)胞代謝、細(xì)胞因子分泌、抗體合成等,對(duì)人體和環(huán)境也無(wú)毒無(wú)害●高靈敏:比較低可檢測(cè)50個(gè)細(xì)胞上海東寰EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域。江西哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
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4%多聚甲醛固定液或冷**固定液(-20℃預(yù)冷20min)。d,封閉液。e,/LPBS緩沖液。2、染色方法a,取出培養(yǎng)有細(xì)胞的蓋玻片,用洗2-3遍。b,加入4%多聚甲醛試問(wèn)固定30minc.加入的Tritonx-100,37℃,5min,PBS洗兩次,5min/次d.加入含、1%BSA的PBS中室溫封閉30min-1h。e.去封閉液,直接加入一抗,37℃孵育1h或4℃過(guò)夜??贵w以mo/LPBS稀釋(理想的抗體濃度需經(jīng)試驗(yàn)而定)。,10min/次g.加入FITC-二抗或TRITC-二抗,37℃,孵育1h。,10min/次,用濾紙吸干。(PBS配制)封片。j.免疫熒光顯微鏡下觀察,或于4℃避光保存。免疫熒光雙標(biāo)記方法免疫熒光的雙標(biāo)記是指同時(shí)標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)兩種蛋白質(zhì)分子,當(dāng)懷疑某種配體與已知受體結(jié)合后可用此方法加以證明。此方法稍微復(fù)雜一些,應(yīng)注意所用的一抗是來(lái)自不同種屬動(dòng)物的兩種特異性抗體(例如:A抗體為多克隆抗體,來(lái)自家兔;B抗體為單克隆抗體,來(lái)自小鼠)。其次,兩種二抗所帶熒光素的發(fā)射光不應(yīng)重疊,且盡量遠(yuǎn)離,通??梢赃x擇FITC和TRITC、Alex488和TRITC、FITC和Cy5,或Cy3和Cy5等來(lái)組合。通常情況下,染色時(shí)兩種一抗可以同時(shí)孵育,然后可以同時(shí)孵育兩種二抗。但當(dāng)染色結(jié)果一種顏色非常弱,而另一種顏色比較強(qiáng)時(shí),應(yīng)考慮先孵育顏色較弱的二抗。河南品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒