細(xì)胞增殖分析是細(xì)胞生長和分化研究的關(guān)鍵,在藥物開發(fā)階段常用來評估化學(xué)藥物的毒性和對細(xì)胞生長的控制作用。通常根據(jù)平均DNA含量或細(xì)胞代謝參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測,此類分析可以報(bào)告出總細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞數(shù)目,或者測定出單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的DNA合成情況。細(xì)胞增殖染料稀釋分析主要基于細(xì)胞膜通透性,熒光團(tuán)分子、染料進(jìn)入細(xì)胞后,將會共價(jià)結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團(tuán)上,從而使染料能夠長時(shí)間停留在細(xì)胞中。經(jīng)過之后的細(xì)胞分裂階段,各個(gè)子代細(xì)胞會從母細(xì)胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細(xì)胞儀對熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析,即可測定出自標(biāo)記結(jié)合起,單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒,有哪些好處值得選擇?山東口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買
該方法無需DNA變性,無需抗原修復(fù),無需抗原抗體反應(yīng),簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確,適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測,尤其適用于各種細(xì)胞系的高通量篩選實(shí)驗(yàn),如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU方法無需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術(shù),在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn)。北京EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域有哪些?
EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性
與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結(jié)果,而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測方法反應(yīng)快,效率高,反應(yīng)時(shí)間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài),更簡單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確。EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動物體內(nèi)能夠迅速擴(kuò)散到各種組織和中,并滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡單、快速、準(zhǔn)確地檢測出細(xì)胞增殖情況。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的功能具體介紹。
EdU檢測法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。本試劑盒反應(yīng)簡單、檢測靈敏度高。本試劑盒基于簡單高效的點(diǎn)擊反應(yīng),無需DNA變性,只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標(biāo)記出摻入的EdU,并且可以檢測到單個(gè)細(xì)胞的增殖情況。本試劑盒使用便捷、兼容性好。通過點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細(xì)胞。使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒到底有什么好處?天津品牌EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好
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細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測方法,能檢測到細(xì)胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個(gè)的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測到單個(gè)的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測靈敏度不是很高,通常適用于流式細(xì)胞儀檢測。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí),上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法。山東口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買