EdU-488細(xì)胞增殖檢測試劑盒(Meilun EdU Cell Proliferation Kit with Alexa Fluor 488)，是一種利用核苷滲入法對細(xì)胞增殖情況進(jìn)行快速、簡單、高靈敏檢測的試劑盒。其原理為：試劑盒中的EdU(5-ethynyl-2′ -deoxyuridine)是一種胸苷(T)類似物，EdU可以在在細(xì)胞周期的S期中替代胸苷摻入到新合成的DNA中；另一方面，EdU上的乙炔基能與疊氮化物(如熒光探針Alexa Fluor 488 Azide)通過Cu+的催化發(fā)生共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點擊反應(yīng)(Click reaction)(圖1)。通過點擊反應(yīng)，新合成的DNA會被綠色熒光標(biāo)記，然后通過檢測熒光信號實現(xiàn)細(xì)胞增殖的檢測。上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒如何去使用呢？山東咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家

CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細(xì)胞，但由于每增殖一次熒光減弱一半，在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞，檢測靈敏度不是很高，通常單適用于流式細(xì)胞儀檢測。在進(jìn)行科學(xué)研究時，上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷，是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷，thymidine)類似物，EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中安徽提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的作用是什么？上海東寰告訴您。

EdU細(xì)胞增殖檢測和BrdU細(xì)胞增殖檢測的對比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)不需要DNA變性，就可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測分析，該反應(yīng)不受雙鏈DNA中堿基對的影響，因此客戶了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒對細(xì)胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細(xì)胞2小時，然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測細(xì)胞增殖活性，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)（每公斤小鼠注射5mgEdU），分別于0、12、24小時之后取小鼠腸組織，制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,**下圖)檢測細(xì)胞的增殖情況，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。

EdU（5-溴-2-脫氧尿嘧啶）試劑盒是一種嘧啶類似物，可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對比，大家不難發(fā)現(xiàn)，EdU法檢測細(xì)胞增殖，無須抗體，無變性步驟，保持細(xì)胞形態(tài)和DNA完整性，是一種簡單，可靠，省事的創(chuàng)新方法。但是，現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒有得到細(xì)胞增殖檢測*行之有效，節(jié)約反應(yīng)時間的方法。Abbkine的EdU檢測試劑盒有兩個型號，分別匹配的是兩種不同的熒光通道，細(xì)胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(綠色熒光)，KTA2030，488通道；細(xì)胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(橘紅色熒光)，KTA2031，549通道。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒如何發(fā)揮重要作用？

通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因為這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。注：貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒去哪買？山東EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒

EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒應(yīng)用再哪些地方？山東咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家

    直接測定DNA合成是細(xì)胞增殖檢測的準(zhǔn)確方法之一，的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類似物-EdU（5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷），在細(xì)胞增殖時EdU能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中，利用EdU與染料之間的點擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測分析，可以有效地檢測處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色（BrdU）檢測方法相比(圖1)，更簡單，更快速，更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散，不需要嚴(yán)格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。EdU分析方法反應(yīng)條件比較溫和，我們提供的一系列AndyFluor?染料標(biāo)記可以用于多色通道選擇。 山東咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家