pcrmix:反應(yīng)條件:pcr擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳鑒定結(jié)果如圖3所示,從圖3中可以看出,6、8、9號為pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr產(chǎn)物沒有這兩個(gè)擴(kuò)增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應(yīng),引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴(kuò)增出344bp的產(chǎn)物,而野生型沒有。pcr體系:反應(yīng)條件:(2)f1代小鼠測序:通過pcr擴(kuò)增后測序鑒定小鼠基因型,如圖4所示,為6號pirb基因敲入小鼠測序峰圖,pcr所用引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測f1代小鼠基因型:采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割dna分子,切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測過程如下:步驟a、提取f1代小鼠尾部dna;步驟b、制備探針,通過pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中??梢院喕瘜?shí)驗(yàn)操作和樣品收集。普陀區(qū)纖維化疾病動物模型建模
1、動物模型名稱:堿燒傷致角膜損傷大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動物性別:雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動物年齡:成年5、實(shí)驗(yàn)動物體重:160-200g6、實(shí)驗(yàn)動物環(huán)境:SPF級,1、實(shí)驗(yàn)方法:氫氧化鈉致大鼠角膜化學(xué)性損傷。大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,用干棉棒拭去結(jié)膜囊多余液體,將統(tǒng)一規(guī)格直徑3mm的圓形濾紙片浸入1mol/LNaOH溶液中20s,飽和后取出置于干燥濾紙上1秒以吸去過多的堿液,將濾紙片貼敷于大鼠右眼角膜**90s后移去,立即用滅菌水沖洗結(jié)膜囊及角膜2min。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。無錫裸鼠疾病動物模型建模動物疾病模型廣泛應(yīng)用于新藥靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)及篩選。
PMID:15082495、7561688)①HE染色②關(guān)節(jié)側(cè)視圖③PCR鑒定、二、糖尿病相關(guān)動物模型1.糖尿病***1)模型構(gòu)建(PMID:30826357)使用鏈佐星(STZ)注射ApoE-/-小鼠,建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型,同時(shí)與ApoE-/-小鼠采用高脂喂養(yǎng)18周2)模型檢測指標(biāo)(PMID:29107826、28345659)3)生化指標(biāo)檢測4)超聲檢測5)主動脈染色檢測2.糖尿病心肌病1)誘發(fā)性DCM模型模型構(gòu)建(PMID:29732743)實(shí)驗(yàn)動物:大鼠方法:各大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1,pH,現(xiàn)配現(xiàn)用),并給予高脂飼料進(jìn)行喂養(yǎng)。①模型檢測指標(biāo)血糖檢測②HE染色③超聲心電圖2)自發(fā)性1型DCM模型3)自發(fā)性2型DCM模型3.糖尿病視網(wǎng)膜病變1)模型構(gòu)建PMID:30862093實(shí)驗(yàn)動物:小鼠方法:糖尿病雄性db/db(+/+Leprdb/J)小鼠。喂養(yǎng)至21周2)模型檢測指標(biāo)①膠質(zhì)原纖維酸性蛋白染色②TUNEL和HE染色DR組視網(wǎng)膜組織內(nèi)核層及外核層結(jié)構(gòu)松散,細(xì)胞排列紊亂GCL,神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層;INL,內(nèi)核層;ONL,外核層三、動物模型構(gòu)建總結(jié)1.臨床資料合理性在納入臨床資料時(shí),需關(guān)注特定疾病患者的流行病學(xué)趨勢,即疾病易發(fā)年齡,男女比例等,同時(shí)需考慮是否與體重、基因表達(dá)等具有相關(guān)性。2.模型合理性選擇合適,簡便。
引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:針對上述現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發(fā)明根據(jù)“順鉑可誘導(dǎo)卵巢細(xì)胞凋亡,引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型,并對比各種方法間的優(yōu)劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時(shí)間,為篩選順鉑導(dǎo)致的卵巢早衰動物模型比較好劑量提供了一種操作簡單,成功率高,結(jié)果可靠的實(shí)驗(yàn)方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續(xù)施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型?;颍簩┝繛榘大w重4~6mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。進(jìn)一步地,可將順鉑溶于%氯化鈉溶液配置成順鉑注射液,然后注射。所述順鉑,可市場常規(guī)購買得到,比如齊魯制藥公司生產(chǎn)的順鉑。進(jìn)一步地,注射期間每天稱量大鼠體重,注射后每周稱量2次;末次注射后15天,麻醉取血檢測***水平,取卵巢檢測對比卵巢重量。實(shí)驗(yàn)動物向小型化的發(fā)展趨勢更有利于實(shí)驗(yàn)者的日常管理和實(shí)驗(yàn)操作。
得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進(jìn)一步地,l型棒的直徑為,***端長3-5mm,第二端長1-3mm。具體地,根據(jù)大鼠體重選擇l型棒的直徑大?。寒?dāng)大鼠體重在200g到不足220g范圍時(shí),采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在220g到不足250g范圍時(shí),采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在250g到不足300g范圍時(shí),采用直徑為;當(dāng)大鼠體重在300g到350g范圍時(shí),采用直徑為。在另一個(gè)具體實(shí)施方式中,壓迫元件為u型棒;步驟三具體為:將u型棒的***端和第二端分別插入到左側(cè)或右側(cè)腰4椎間孔及腰5椎間孔中,得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進(jìn)一步地,壓迫元件采用不受磁場干擾、置入體內(nèi)不會對神經(jīng)造成化學(xué)刺激以及具有一定可塑性的材料制備而成。在一個(gè)具體實(shí)施方式中,壓迫元件采用黃銅和鋅的混合物制備而成。具體地,混合物為h62黃銅,即含銅量為%~%,余量為鋅含量的黃銅。而銅、鋅皆屬于非鐵磁性物質(zhì)。在另一個(gè)具體實(shí)施方式中,壓迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制備而成。pla是一種無毒無刺激的合成高分子材料,其原料是乳酸,不含任何金屬。h62黃銅棒或pla棒在體內(nèi),即不會受磁療、電療引起的磁場、電場干擾,也不會對磁療、電療儀器及磁共振儀器產(chǎn)生不良影響。哪里可以做動物模型?楊浦區(qū)口碑好的疾病動物模型建模
動物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面!普陀區(qū)纖維化疾病動物模型建模
企業(yè)圍繞中**客戶日益增長的多層次品質(zhì)人生的需求,不斷豐富完善原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測試劑盒,動物疾病模型的同時(shí),還陸續(xù)推出適合中產(chǎn)階級品味的生活化服務(wù)。針對商務(wù)服務(wù)在各領(lǐng)域的應(yīng)用場景的不斷深入,數(shù)字經(jīng)濟(jì)作為關(guān)鍵要素如何影響產(chǎn)業(yè)升級實(shí)現(xiàn)價(jià)值創(chuàng)造,已成為科技企業(yè)**為關(guān)注的問題。相信也正是基于此項(xiàng)原因,不少企業(yè)才會采用互聯(lián)網(wǎng)中臺式架構(gòu)搭建統(tǒng)一行業(yè)平臺。作為中國優(yōu)先的數(shù)字化服務(wù)平臺,有限責(zé)任公司企業(yè)積極探索勇于實(shí)踐,助力公益扶貧向可持續(xù)的系統(tǒng)性扶貧轉(zhuǎn)變、由建立供應(yīng)鏈向建立生態(tài)圈轉(zhuǎn)變、由消費(fèi)互聯(lián)網(wǎng)向產(chǎn)業(yè)互聯(lián)網(wǎng)轉(zhuǎn)變。作為中國優(yōu)先的銷售提供商,自成立以來,始終專注于企業(yè)的服務(wù)市場,建立了優(yōu)先的技術(shù)和服務(wù)能力,全力打造數(shù)字時(shí)代下的創(chuàng)新產(chǎn)品,幫助客戶加速管理和業(yè)務(wù)的模式轉(zhuǎn)型,實(shí)現(xiàn)客戶價(jià)值,完成行業(yè)與市場增長。普陀區(qū)纖維化疾病動物模型建模
上海東寰生物科技有限公司專注技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品研發(fā),發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大。一批專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),是實(shí)現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標(biāo)的基礎(chǔ),是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動力。誠實(shí)、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造***的原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測試劑盒,動物疾病模型。一直以來公司堅(jiān)持以客戶為中心、原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測試劑盒,動物疾病模型市場為導(dǎo)向,重信譽(yù),保質(zhì)量,想客戶之所想,急用戶之所急,全力以赴滿足客戶的一切需要。