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咨詢疾病動物模型建模原理

來源: 發(fā)布時間:2021-10-24

1、動物模型名稱:D-半乳糖致老年癡呆大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:成年鼠5、實驗動物體重:180g-220g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 、實驗方法:D-半乳糖誘導(大鼠按0.5g/kg體重腹腔注射D-半乳糖溶液)(注:每天1次,連續(xù)6-7周。)2、檢測標準:①SOD明顯下降、MDA明顯增加;②水迷宮試驗顯示學習記憶能力下降;③腦組織神經(jīng)元數(shù)目減少。1.提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。小鼠疾病模型應用于轉(zhuǎn)化醫(yī)學研究中的思路與策略該研究從臨床患者中篩選到潛在的致病基因。咨詢疾病動物模型建模原理

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    該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術(shù)方案是:pirb基因敲入的小鼠動物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點grna1和grna2,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi),所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術(shù)方案為:pirb基因敲入的小鼠動物模型的構(gòu)建方法,具體按照以下步驟實施:步驟1、基于crispr/cas9技術(shù)構(gòu)建針對c57bl/6j小鼠rosa26基因的特異性grna1和grna2,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如;步驟2、構(gòu)建“cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya”基因盒打靶載體,將打靶載體進行線性化處理;步驟3、步驟2中將含有l(wèi)oxp位點打靶載體、步驟1中有活性的grna1和grna2與cas9蛋白共同注射進入**小鼠受精卵中,獲得f0代小鼠;步驟4、將步驟3中性成熟的陽性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代,獲得f1代雜合子小鼠,通過pcr、測序和southern雜交確定動物基因型;步驟5、將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。揚州疾病動物模型建模價格動物疾病模型廣泛應用于新藥靶點發(fā)現(xiàn)及篩選。

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1、動物模型名稱:膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:200~220g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:用膽管結(jié)扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3%戊巴比妥鈉麻醉,腹部皮膚消毒,無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔,分離出膽管,在膽管近端和遠端2處結(jié)扎膽管。手術(shù)后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進行組織病理學檢查。2、檢測標準:肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分:0分:無明顯病變;1分:呈局灶性分布,受累面積在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面積在30%-70%之間者;3分:呈彌漫性分布,受累面積在70%以上者。統(tǒng)計分析:每份標本在低倍視野(10×10)下依次選取左上、右上、左下、右下、中間5個視野(共1.5mm2)進行觀察,測定并計算視野內(nèi)小膽管伴纖維組織增生總面積。

    步驟i.將步驟h的吸附柱放入收集管,12000rpm離心2min。步驟j.吸附柱放到一個新的,在吸附柱膜**加入50~200μl滅菌水或者洗脫液,停留5min。(將無菌水或者洗脫液加熱到65℃能夠增加洗脫的得率)。步驟i.基因組dna定量,洗脫的基因組dna可以通過電泳鑒定。方法2:一種低成本基因組dna的粗提方法:步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入離心管中,加入100μl尾部消化緩沖液,注意不要剪尾太長;步驟b.將離心管及其內(nèi)容物于56℃孵育過夜;步驟c.過夜后將離心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步驟d.在微型離心機以**大轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)15min,上清直接用于pcr體系(每50μlpcr體系加入上清2μl)。尾消化緩沖液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)長鏈pcr反應:長鏈引物:pcrprimers1(℃):擴增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):擴增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述兩條擴增片段,野生型等位基因沒有擴增產(chǎn)物。上海東寰為您提供完善的小鼠動物疾病模型。

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1、動物模型名稱:放血致失血性貧血小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 1、實驗方法:眼眶靜脈叢放血法。小鼠通過眼眶靜脈叢放血,0.5mL/只,并測外周血紅細胞總數(shù)(RBC)及血紅蛋白含量(Hb)。24h后所有小鼠眼眶靜脈叢**檢測外周血RBC總數(shù)及Hb含量。2、檢測標準:模型組小鼠放血后24小時的外周血RBC總數(shù)及Hb含量較放血前明顯下降,低于正常值參考值,且與正常對照組比較具***性差異(P<0.05),表明成功構(gòu)建了失血性貧血動物模型造模。疾病動物模型建模好做嗎?崇明區(qū)面癱疾病動物模型建模

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誘發(fā)性**模型的原理是利用外源性致*因素引起細胞遺傳特性異常而呈現(xiàn)出異常生長和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化學性、物理性及生物性致*物,而化學性致*物(chemicalcarcinogens)**常見,已確知的多達一千余種,用于誘發(fā)實驗性**的種類亦很多,如苯并薩,申基膽菌、聯(lián)苯胺、亞硝胺類、黃曲霉***類。各種致癢物的致*強度、致*譜等特性相差較大,同一種致*物經(jīng)不同途徑給藥所致**部位或類型可有很大差異。有些化學性致*物具有明顯的親***或組織特性。因此,實驗工作中應根據(jù)需要選用適當致*物和致*途徑,并確定其他影響因素或?qū)嶒灄l件?;驹?利用外源性致*物引起細胞遺傳特性改變,從而出現(xiàn)異常生長和高增殖活性細胞形成**。外源性致*物主要有化學性、物理性(如放射性物質(zhì))及生物性(如誘發(fā)動物**的病毒),其中以化學性致*物**為常用咨詢疾病動物模型建模原理

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