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山東正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-22

EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒應(yīng)用再哪些地方?山東正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商

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磺酰羅丹明B細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(SμlforhodamineB,SRB)是一種替代MTT法的細(xì)胞活性檢測(cè)方法。SRB可與生物大分子中的堿性氨基酸結(jié)合,在490nm~520nm波長(zhǎng)處其OD值與活細(xì)胞數(shù)成良好的直線關(guān)系。在515nm的OD讀數(shù),可用做細(xì)胞數(shù)的定量。儲(chǔ)存條件:2-8℃避光保存。有效期:一年。注意事項(xiàng):●本試劑盒供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或?!窠古c其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果?!癖容^好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。●避免皮膚或粘膜與試劑接觸?!裾綄?shí)驗(yàn)前,建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量,在1000-100000之間摸細(xì)胞數(shù)量。產(chǎn)品特點(diǎn):●操作時(shí)間短,細(xì)胞固定和染色需90分鐘左右?!駴]有嚴(yán)格時(shí)間限制,固定后或SRB結(jié)合后的細(xì)胞均可存放,樣品7天后測(cè)定的OD值下降不超過2%。●SRB法對(duì)于測(cè)定懸浮細(xì)胞無細(xì)胞損失,結(jié)果靈敏準(zhǔn)確,重復(fù)性好。河北如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒到底有什么好處?

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    熒光試劑請(qǐng)避光保存。反應(yīng)緩沖液10X1ml催化劑溶液25x400ulTAMRA紅色熒光溶液400x25ul緩沖添加劑粉末200mgHoechstX20ul使用前須知該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)步驟(以24孔板,HK2貼壁細(xì)胞為例)EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸。

EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動(dòng)物體內(nèi)能夠迅速擴(kuò)散到各種組織和中,并滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出細(xì)胞增殖情況。與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測(cè)試劑盒相同甚至更好的檢測(cè)結(jié)果,而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測(cè)方法反應(yīng)快,效率高,反應(yīng)時(shí)間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài),更簡(jiǎn)單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確。上海哪家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒值得信賴?

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本試劑盒小包裝C0085S如果用于培養(yǎng)的細(xì)胞(6孔板)的檢測(cè),可以檢測(cè)50個(gè)樣品,每個(gè)樣品的反應(yīng)體系為500μl的Click反應(yīng)液;如果用于96孔板檢測(cè),可以檢測(cè)500個(gè)樣品,每個(gè)樣品的檢測(cè)體系為50μl的Click反應(yīng)液;如果用于12孔、24孔、48孔或384孔板樣品的檢測(cè),分別可以檢測(cè)125、250、350和1250個(gè)樣品,每個(gè)樣品推薦的Click反應(yīng)液用量為200μl、100μl、70μl和20μl。小包裝如果用于冰凍或石蠟切片的檢測(cè),可以檢測(cè)125-250個(gè)樣品,每個(gè)樣品的反應(yīng)體系為100-200μl的Click反應(yīng)液。大包裝C0085L可檢測(cè)樣品的數(shù)量為小包裝C0085S的4倍。上海EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的發(fā)展趨勢(shì)。北京口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商

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EdU細(xì)胞增殖檢測(cè):EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。山東正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商