EdU染料只有BrdU抗體的1/500，在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無(wú)需DNA變性（酸解、熱解、酶解等），可有效避免樣品損傷，而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)：EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復(fù)制的DNA分子中，通過(guò)基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性，適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究，尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測(cè)方法相比，EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒應(yīng)用再哪些地方？浙江咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

本試劑盒小包裝C0085S如果用于培養(yǎng)的細(xì)胞(6孔板)的檢測(cè)，可以檢測(cè)50個(gè)樣品，每個(gè)樣品的反應(yīng)體系為500μl的Click反應(yīng)液；如果用于96孔板檢測(cè)，可以檢測(cè)500個(gè)樣品，每個(gè)樣品的檢測(cè)體系為50μl的Click反應(yīng)液；如果用于12孔、24孔、48孔或384孔板樣品的檢測(cè)，分別可以檢測(cè)125、250、350和1250個(gè)樣品，每個(gè)樣品推薦的Click反應(yīng)液用量為200μl、100μl、70μl和20μl。小包裝如果用于冰凍或石蠟切片的檢測(cè)，可以檢測(cè)125-250個(gè)樣品，每個(gè)樣品的反應(yīng)體系為100-200μl的Click反應(yīng)液。大包裝C0085L可檢測(cè)樣品的數(shù)量為小包裝C0085S的4倍。浙江品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒價(jià)格EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn)是什么？上海東寰告訴您。

細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法通過(guò)檢測(cè)滲入DNA復(fù)制期間的EdU，借助熒光檢測(cè)工具即可準(zhǔn)確地檢測(cè)出新增殖的細(xì)胞，快速統(tǒng)計(jì)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)，分析細(xì)胞增殖情況。該方法簡(jiǎn)單、靈敏、快速、準(zhǔn)確，適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測(cè)，尤其適用于高通量篩選試驗(yàn)，如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復(fù)制的DNA分子中，通過(guò)基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性，適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究，尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。

EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過(guò)一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)，其反應(yīng)原理參見圖1。通過(guò)點(diǎn)擊反應(yīng)，新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記，從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。EdU檢測(cè)法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒常見的用途有哪些？上海東寰告訴您。

    注：1）培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài)；2）孵育時(shí)間至少2小時(shí)，可延長(zhǎng)至24小時(shí)后再檢測(cè)也可以。4、以1×PBS清洗細(xì)胞兩次，每次5分鐘，以除去未摻入RNA的EU殘留。注：貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。細(xì)胞的固定和通透1、每孔加入150μl細(xì)胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；注：1)該試劑盒配備了細(xì)胞固定液，也可以使用含4%多聚甲醛的PBS來(lái)進(jìn)行細(xì)胞固定；2)如果使用其他的細(xì)胞固定劑建議用DEPC水來(lái)配置，避免RNA酶降解細(xì)胞內(nèi)的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘；3、棄甘氨酸溶液，每孔加入300μlPBS洗液，室溫清洗5分鐘；4、每孔加入300μlTritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；5、每孔加入300μlPBS洗液，室溫清洗5分鐘；EU染色1、通過(guò)用10：1去離子水稀釋10×反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1×EU反應(yīng)緩沖液；2、按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解，即為可用的緩沖添加劑的濃度，建議現(xiàn)用現(xiàn)配；注：緩沖添加劑為白色粉末，較難準(zhǔn)確稱量，稱量范圍可稍微放寬，但是不應(yīng)超過(guò)±20%，且該粉末較易氧化，使用后請(qǐng)旋緊管蓋，如試劑出現(xiàn)棕黃色，則需報(bào)廢或更換。上海東寰告訴您使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的便捷性。浙江咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

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