EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。EdU細胞增殖檢測試劑盒的基本結構級應用。湖南EdU細胞增殖檢測試劑盒原理
保存條件:-20℃保存,一年有效。BiotinAzide、DAB顯色液A和DAB顯色液B須避光保存。注意事項:ClickAdditive配制成溶液后請注意適當分裝。如果溶解后有白色物質析出,請上下顛倒多次,待全部溶解后使用。如果該溶液顏色變成棕色,說明該組分的有效成分已失效,請棄用。DAB對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。由于本產(chǎn)品需要銅離子催化進行點擊反應,請注意如下的兼容性問題及解決方案。本產(chǎn)品完全兼容有機類染料如AlexaFluor®系列普通染料及fluorescein(FITC)、Allophycocyanin(APC)及APCE-tandems染江西EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好有哪些領域需要使用EdU細胞增殖檢測試劑盒?
細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細胞的增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎。方式:真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數(shù)分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、等一切真核生物中的一種*為普遍的分裂方式,是真核細胞增殖的主要方式。減數(shù)分裂是生殖細胞形成時的一種特殊的有絲分裂。多細胞生物,以細胞分裂的方式產(chǎn)生新的細胞,用來補充體內(nèi)衰老或死亡的細胞~
EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應,能在細胞和組織水平更準確地反映DNA復制活性。EdU細胞增殖檢測試劑盒給社會帶來了什么好處?
試劑盒以外自備試劑和儀器:●PBS●純水●1%乙酸●移液器及吸頭●有515nm波長的酶標儀使用方法:使用注意事項:●接種時注意細胞懸液一定要混勻,以避免細胞沉淀下來,導致每孔中的細胞數(shù)量不等,可以每接種幾個孔就混勻一下。培養(yǎng)板周圍一圈孔培養(yǎng)基容易揮發(fā),為了減少誤差,建議培養(yǎng)板的四邊每孔只加培養(yǎng)基,而不作為指標檢測孔。●培養(yǎng)時間根據(jù)細胞種類的不同和每孔內(nèi)細胞數(shù)量的多少而異?!裼盟蛞宜嵯醇毎麜r充滿孔后保持一會倒掉即可,也可以用排或洗板機。●OD值在1-2之間較好。以96孔板為例:1.取出培養(yǎng)好待測的96孔板。2.在培養(yǎng)基表面小心加入50μl固定液(懸浮細胞加100μl固定液),靜置5分鐘后放入4℃冰箱30分鐘-1小時。(貼壁細胞可棄培養(yǎng)基后加入用水3倍稀釋的固定液;懸浮細胞必須直接加入固定液,輕加在培養(yǎng)液面,靜置5分鐘后再將平板移至4℃放置1小時,可使懸浮細胞固定在培養(yǎng)孔底部)。上海哪家EdU細胞增殖檢測試劑盒值得信賴?江西口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒價格
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EdU細胞增殖分析試劑采用click化學技術,可為新合成的DNA檢測與定量提供比傳統(tǒng)BrdU方法更的替代物。當在DNA合成過程中摻入修飾的核苷EdU(5-乙炔基-2-脫氧尿苷)時,可以通過快速的“click化學”反應檢測到它,并且對細胞的破壞作用小。點擊化學相比于BrdU具有更簡便、更快速、更易操作的優(yōu)點。與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測法不同,Click-iTEdU檢測法不是基于抗體,因此并不需要DNA變性以檢測摻入的核苷。此外,Click-iTEdU可以與R-PE、R-PEtandems和GFP等熒光蛋白復用提高效力。當您平行比較這些方法時,Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在測定細胞增殖方面的優(yōu)勢是顯而易見的。湖南EdU細胞增殖檢測試劑盒原理