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如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-02-04

本試劑盒使用便捷、兼容性好。本試劑盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透,就可以使疊氮化物探針有效進(jìn)入細(xì)胞并發(fā)生點(diǎn)擊反應(yīng),不會(huì)影響細(xì)胞形態(tài),不會(huì)影響基于抗體的免疫熒光和免疫組化檢測(cè),也不會(huì)影響DNA的熒光染色(如PI染色檢測(cè)細(xì)胞周期、DAPI或Hoechst染料檢測(cè)細(xì)胞核)。而B(niǎo)rdU法為了使大分子的BrdU抗體進(jìn)入細(xì)胞并與DNA上的BrdU結(jié)合,需要對(duì)雙鏈DNA進(jìn)行變性處理(如酸變性、熱變性或者DNase消化等),這種變性可能會(huì)影響細(xì)胞形態(tài),影響后續(xù)的免疫熒光和免疫組化檢測(cè)、DNA的熒光染色等。BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測(cè)原理的比較參見(jiàn)圖2。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒如何發(fā)揮重要作用?如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

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    蛋白抽提/WesternBlotting技術(shù)服務(wù)WesternBlotting技術(shù)服務(wù)(DH1004)一.服務(wù)內(nèi)容1、蛋白提?。簭娜嘶騽?dòng)物細(xì)胞、組織,細(xì)胞等樣品中提取蛋白樣品。2、蛋白定量:對(duì)樣品中蛋白進(jìn)行半定量分析。3、WesternBlot檢測(cè)(1)電泳:聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分離蛋白樣品。(2)濕法轉(zhuǎn)印。(3)雜交:用抗體鑒定膜上的特定蛋白。(4)顯色:ECL熒光顯色,黑條帶白背景照片4、提供蛋白內(nèi)參檢測(cè)(所有內(nèi)參抗體均不收取費(fèi)用)。5、預(yù)實(shí)驗(yàn)及正式實(shí)驗(yàn)服務(wù)。二.樣品要求1、細(xì)胞>1×10^7;組織>30mg;細(xì)菌濕重>1mg等。2、樣品蛋白濃度>1mg/ml,蛋白量>200ug/樣品。3、建議提供目的蛋白陽(yáng)性表達(dá)樣品(純蛋白、有陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞或組織、商品化的陽(yáng)性對(duì)照產(chǎn)品等)作為陽(yáng)性對(duì)照。注:若有特殊處理的樣品,請(qǐng)盡可能出示相關(guān)材料(具有保密性的材料除外)。三.收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)項(xiàng)目免疫學(xué)檢測(cè)服務(wù)內(nèi)容周期產(chǎn)物/報(bào)告價(jià)格(元)DH1004-01樣品準(zhǔn)備總蛋白提取、定量、質(zhì)控3天總蛋白質(zhì)控報(bào)告100元/樣DH1004-02免疫印跡(WB)WB預(yù)實(shí)驗(yàn),質(zhì)控WB體系5-10天完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告1000元/膜WB檢測(cè)正式實(shí)驗(yàn)10-15天完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告1000元/膜四、客戶提供材料1、樣品:新鮮或正確保存的樣品以及與樣品相關(guān)的必要資料。湖北口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家便宜?上海東寰告訴您。

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Jurkat細(xì)胞只用EdU標(biāo)記(左列),或在標(biāo)記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列),2小時(shí)后染色,然后通過(guò)流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。從流式結(jié)果圖中可以看出,EdU標(biāo)記的細(xì)胞有較高比例的綠色熒光陽(yáng)性細(xì)胞,呈現(xiàn)綠色熒光陰性(弱染色)和陽(yáng)性(強(qiáng)染色)的兩個(gè)峰,分別對(duì)應(yīng)于未增殖細(xì)胞和增殖細(xì)胞。經(jīng)過(guò)Hydroxyurea處理的細(xì)胞,綠色熒光陽(yáng)性的細(xì)胞幾乎完全消失,剩下一個(gè)綠色熒光陰性的峰。Hela細(xì)胞只用EdU標(biāo)記(左列),或在標(biāo)記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列),2小時(shí)后染色(步驟染Hoechst,方便觀察增殖細(xì)胞比例),然后通過(guò)熒光顯微鏡進(jìn)行檢測(cè)。鏡下可見(jiàn),*EdU標(biāo)記的細(xì)胞有一部分染上綠色熒光的增殖細(xì)胞,未增殖細(xì)胞的細(xì)胞核呈藍(lán)色單染。

但該方法由于有放射性污染并且很難實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞檢測(cè)而受到很大的限制,隨后逐漸被基于抗體檢測(cè)的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步驟繁多,且需要使用BrdU抗體,影響因素較多,穩(wěn)定性比較差。并且由于BrdU法需要使用抗體,有時(shí)會(huì)和其它目的蛋白基于抗體的檢測(cè)相互產(chǎn)生干擾。EdU法基于EdU摻入和后續(xù)的點(diǎn)擊反應(yīng),無(wú)需使用抗體、操作便捷、檢測(cè)靈敏度高,是一種在BrdU法基礎(chǔ)上升級(jí)換代的新方法,將會(huì)逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi?化學(xué)發(fā)光法(C0065、C0068)都是基于細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法,能檢測(cè)到細(xì)胞的總體增殖效果,但無(wú)法檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞。上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用方式。

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EdU細(xì)胞增殖方法簡(jiǎn)單,方便,無(wú)需DNA變性,能夠與各種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,以檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測(cè)通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地?cái)U(kuò)展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測(cè)儀器要求,完全解決您的實(shí)驗(yàn)難題。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進(jìn)行多重標(biāo)記,從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開(kāi)展細(xì)胞功能方面的研究EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒,有哪些好處值得選擇?如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

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細(xì)胞增殖&細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)細(xì)胞增殖是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ),是生物體的重要生命特征。檢測(cè)細(xì)胞在培養(yǎng)基或組織中的生長(zhǎng)速率,對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)和分化研究至關(guān)重要。在藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中也常被用于評(píng)估藥物的毒性和對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制情況。細(xì)胞增殖檢測(cè)通常是基于DNA含量或細(xì)胞代謝實(shí)現(xiàn)的,主要的研究方向?yàn)閷?duì)活細(xì)胞的代謝活性的檢測(cè)(基于WST、XTT、MTT等)及對(duì)DNA合成的檢測(cè)(基于BrdU的免疫法或EdU的點(diǎn)擊化學(xué)法),可通過(guò)體內(nèi)成像、微孔板或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)等多種技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞示蹤。使用四唑鹽進(jìn)行代謝活性檢測(cè)通過(guò)添加四咪唑鹽到細(xì)胞中可進(jìn)行線粒體內(nèi)酶代謝活性的測(cè)定。如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)