通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí)，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的發(fā)展前景如何呢？安徽咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

EdU-488細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(MeilunEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488)，是一種利用核苷滲入法對(duì)細(xì)胞增殖情況進(jìn)行快速、簡(jiǎn)單、高靈敏檢測(cè)的試劑盒。其原理為：試劑盒中的EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)是一種胸苷(T)類似物，EdU可以在在細(xì)胞周期的S期中替代胸苷摻入到新合成的DNA中；另一方面，EdU上的乙炔基能與疊氮化物(如熒光探針AlexaFluor488Azide)通過Cu+的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)(圖1)。通過點(diǎn)擊反應(yīng)，新合成的DNA會(huì)被綠色熒光標(biāo)記，然后通過檢測(cè)熒光信號(hào)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞增殖的檢測(cè)。湖北口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說明書EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒如何發(fā)揮重要作用？

磺酰羅丹明B細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(SμlforhodamineB,SRB)是一種替代MTT法的細(xì)胞活性檢測(cè)方法。SRB可與生物大分子中的堿性氨基酸結(jié)合，在490nm～520nm波長(zhǎng)處其OD值與活細(xì)胞數(shù)成良好的直線關(guān)系。在515nm的OD讀數(shù)，可用做細(xì)胞數(shù)的定量。儲(chǔ)存條件：2-8℃避光保存。有效期：一年。注意事項(xiàng)：●本試劑盒供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或?！窠古c其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果?！癖容^好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑?！癖苊馄つw或粘膜與試劑接觸?！裾綄?shí)驗(yàn)前，建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量，在1000-100000之間摸細(xì)胞數(shù)量。產(chǎn)品特點(diǎn)：●操作時(shí)間短，細(xì)胞固定和染色需90分鐘左右。●沒有嚴(yán)格時(shí)間限制，固定后或SRB結(jié)合后的細(xì)胞均可存放，樣品7天后測(cè)定的OD值下降不超過2%?！馭RB法對(duì)于測(cè)定懸浮細(xì)胞無細(xì)胞損失，結(jié)果靈敏準(zhǔn)確，重復(fù)性好。

細(xì)胞增殖能力的檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是直接檢測(cè)細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測(cè)DNA合成來檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法，如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法，能檢測(cè)到細(xì)胞的總體增殖效果，但無法檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測(cè)DNA合成的，但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的重要性。

更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免變性帶來的樣品損傷，確保細(xì)胞核邊緣清晰完整；更簡(jiǎn)單--無需抗原抗體反應(yīng)，基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法，簡(jiǎn)單高效，反應(yīng)單需要幾分鐘；更靈敏--無需抗體，檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500，更容易擴(kuò)散，即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè)；更快速--無需過夜，省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟，完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí)；更兼容--對(duì)樣品幾乎無損傷，更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記，能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。rdU需要DNA變性后才能與抗體結(jié)合，導(dǎo)致BrdU、Hoechst染色彌散，邊緣模糊不清；而EdU邊緣清晰完整，檢測(cè)更靈敏、更準(zhǔn)確EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的作用是什么？上海東寰告訴您。天津哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

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