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河北如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

來源: 發(fā)布時間:2024-02-20

EdU細胞增殖分析試劑采用click化學(xué)技術(shù),可為新合成的DNA檢測與定量提供比傳統(tǒng)BrdU方法更的替代物。當在DNA合成過程中摻入修飾的核苷EdU(5-乙炔基-2-脫氧尿苷)時,可以通過快速的“click化學(xué)”反應(yīng)檢測到它,并且對細胞的破壞作用小。點擊化學(xué)相比于BrdU具有更簡便、更快速、更易操作的優(yōu)點。與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測法不同,Click-iTEdU檢測法不是基于抗體,因此并不需要DNA變性以檢測摻入的核苷。此外,Click-iTEdU可以與R-PE、R-PEtandems和GFP等熒光蛋白復(fù)用提高效力。當您平行比較這些方法時,Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在測定細胞增殖方面的優(yōu)勢是顯而易見的。上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好?河北如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

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細胞活性的細胞增殖檢測方法,能檢測到細胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細胞。這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細胞,檢測靈敏度不是很高,通常適用于流式細胞儀檢測。在進行科學(xué)研究時,上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。安徽哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商使用EdU細胞增殖檢測試劑盒能給人們帶來便利嗎?

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通過檢測EdU標記便能準確地反映細胞的增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細胞和組織水平能更準確地反映細胞增殖等現(xiàn)象。EdU法檢測試劑盒是Brdu方法的**性突破。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測細胞增殖,無須抗體,無變性步驟,保持細胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡單,可靠,省事的創(chuàng)新方法

EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點擊反應(yīng),新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針所標記,從而可以使用適當?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細胞。EdU檢測法中的點擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細胞DNA標記上生物素等探針使用EdU細胞增殖檢測試劑盒到底有什么好處?

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EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替T滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)檢測DNA復(fù)制活性,通過檢測EdU標記便能準確地反映細胞的增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細胞和組織水平能更準確地反映細胞增殖等現(xiàn)象EdU細胞增殖檢測試劑盒如何發(fā)揮重要作用?上海東寰告訴您。湖北品牌EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

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MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(MTTCellProliferationandCytotoxicityAssayKit)是一種非常經(jīng)典的細胞增殖和細胞毒性檢測試劑盒,被廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的檢測。MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan(圖1A)。在特定溶劑存在的情況下,可以被完全溶解(圖1B)。然后通過酶標儀可以測定570nm波長附近的吸光度(圖2)。細胞增殖越多越快,則吸光度越高;細胞毒性越大,則吸光度越低。MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒實測效果圖。,在細胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育4小時,顯微鏡下可見大量結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan生成。B.不同數(shù)量HeLa細胞在MTT溶液(MTTsolution)加入后4小時的效果圖(上圖)及深紫色產(chǎn)物formazan生成后加入Formazan溶解液(Formazansolvent),充分溶解后的效果圖(下圖)。河北如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒原理