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來源: 發(fā)布時間:2024-02-22

與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法用量小得多,十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結(jié)果,而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測方法反應(yīng)快,效率高,反應(yīng)時間需幾分鐘,不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育,能夠更好地保護細胞形態(tài),更簡單、更靈敏、更快速、更準確。EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,分子量很小,在動物體內(nèi)能夠迅速擴散到各種組織和中,并滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡單、快速、準確地檢測出細胞增殖情況。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒發(fā)揮的重要作用。河北品質(zhì)好的EdU細胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商

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    具有保密性的材料除外)。2、目的蛋白相應(yīng)一抗:請您提供質(zhì)量保證的一抗(或委托我公司準備)。抗體的使用量通過預(yù)實驗后進行確認,原則上不回收使用一抗。3、陽性對照樣品(盡量提供)。4、相關(guān)文獻(可選)。注:若要檢測磷酸化蛋白,請在2-3個月內(nèi)進行,因為長時間保存的樣品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而檢測不到磷酸化條帶。五、提交給客戶結(jié)果1、預(yù)實驗顯色結(jié)果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式),預(yù)實驗采取3個一抗稀釋度,選取部分實驗樣本。2、正式實驗顯色結(jié)果(TIFF格式、JPEG格式或PNG格式)。3、完整實驗報告。六、服務(wù)項目說明1、提供的蛋白量與待檢測的目的蛋白數(shù)量有關(guān),蛋白數(shù)量增加相應(yīng)的樣品量也要增加。2、每張膜樣品數(shù)量為1-8個,不足8個以8個收取。9-16個樣品為2張膜,17-24個樣品為3張膜;以此類推。舉例:7個樣品,1個目的蛋白,算1張膜;有9個樣品,1個目的蛋白,算2張膜;7個樣品,2個目的蛋白,算2張膜,有9個樣品,2個目的蛋白,算4張膜。注:以上為一般算法。如果客戶樣品數(shù)量需要按照組別等來進行上樣時,需要重新確定每張膜的上樣量及膜的張數(shù)。3、選擇部分樣品進行預(yù)實驗,參考目的蛋白一抗說明書進行3個稀釋度的預(yù)實驗。浙江如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好EdU細胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。

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EdU細胞增殖檢測試劑盒直接測定DNA合成是細胞增殖檢測的準確方法之一開發(fā)的EdU細胞增殖檢測試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類似物-EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷),在細胞增殖時EdU能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,利用EdU與染料之間的點擊化學(xué)反應(yīng)可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細胞百分數(shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比(圖1),更簡單,更快速,更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。EdU分析方法反應(yīng)條件比較溫和,我們提供的一系列AndyFluor?染料標記可以用于多色通道選擇,也可以用于培養(yǎng)細胞分析及組織切片分析

EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點擊反應(yīng),新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針所標記,從而可以使用適當?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細胞。上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒的應(yīng)用范圍。

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EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要性。江西EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家

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    蛋白抽提/WesternBlotting技術(shù)服務(wù)WesternBlotting技術(shù)服務(wù)(DH1004)一.服務(wù)內(nèi)容1、蛋白提?。簭娜嘶騽游锛毎?、組織,細胞等樣品中提取蛋白樣品。2、蛋白定量:對樣品中蛋白進行半定量分析。3、WesternBlot檢測(1)電泳:聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分離蛋白樣品。(2)濕法轉(zhuǎn)印。(3)雜交:用抗體鑒定膜上的特定蛋白。(4)顯色:ECL熒光顯色,黑條帶白背景照片4、提供蛋白內(nèi)參檢測(所有內(nèi)參抗體均不收取費用)。5、預(yù)實驗及正式實驗服務(wù)。二.樣品要求1、細胞>1×10^7;組織>30mg;細菌濕重>1mg等。2、樣品蛋白濃度>1mg/ml,蛋白量>200ug/樣品。3、建議提供目的蛋白陽性表達樣品(純蛋白、有陽性表達的細胞或組織、商品化的陽性對照產(chǎn)品等)作為陽性對照。注:若有特殊處理的樣品,請盡可能出示相關(guān)材料(具有保密性的材料除外)。三.收費標準服務(wù)項目免疫學(xué)檢測服務(wù)內(nèi)容周期產(chǎn)物/報告價格(元)DH1004-01樣品準備總蛋白提取、定量、質(zhì)控3天總蛋白質(zhì)控報告100元/樣DH1004-02免疫印跡(WB)WB預(yù)實驗,質(zhì)控WB體系5-10天完整實驗報告1000元/膜WB檢測正式實驗10-15天完整實驗報告1000元/膜四、客戶提供材料1、樣品:新鮮或正確保存的樣品以及與樣品相關(guān)的必要資料。河北品質(zhì)好的EdU細胞增殖檢測試劑盒供應(yīng)商