誘發(fā)性**模型的原理是利用外源性致*因素引起細(xì)胞遺傳特性異常而呈現(xiàn)出異常生長(zhǎng)和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化學(xué)性、物理性及生物性致*物,而化學(xué)性致*物(chemicalcarcinogens)**常見,已確知的多達(dá)一千余種,用于誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性**的種類亦很多,如苯并薩,申基膽菌、聯(lián)苯胺、亞硝胺類、黃曲霉***類。各種致癢物的致*強(qiáng)度、致*譜等特性相差較大,同一種致*物經(jīng)不同途徑給藥所致**部位或類型可有很大差異。有些化學(xué)性致*物具有明顯的親***或組織特性。因此,實(shí)驗(yàn)工作中應(yīng)根據(jù)需要選用適當(dāng)致*物和致*途徑,并確定其他影響因素或?qū)嶒?yàn)條件?;驹?利用外源性致*物引起細(xì)胞遺傳特性改變,從而出現(xiàn)異常生長(zhǎng)和高增殖活性細(xì)胞形成**。外源性致*物主要有化學(xué)性、物理性(如放射性物質(zhì))及生物性(如誘發(fā)動(dòng)物**的病毒),其中以化學(xué)性致*物**為常用必須真正了解研究者感興趣且需要的小鼠疾病模型。長(zhǎng)寧區(qū)品牌疾病動(dòng)物模型建模
動(dòng)物模型名稱:FSH聯(lián)合HCG致超排懷孕小鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:3~4周齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:16~18g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法:注射用重組人促卵泡***(FSH)聯(lián)合注射絨促性素(HCG)誘導(dǎo)。對(duì)雌鼠于按5IU/只腹腔注射50IU/mL的FSH溶液,注射46~48h后按5IU/只再腹腔注射50IU/mL的HCG溶液,并于注射HCG當(dāng)天下午約16:00~17:00按雌雄鼠1:1合籠。次日早上檢查雌鼠陰栓情況。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):合籠后次日雌鼠檢查出現(xiàn)陰栓,表明成功構(gòu)建了超排懷孕小鼠模型。C57小鼠疾病動(dòng)物模型建模評(píng)價(jià)動(dòng)物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面!
2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第4天開始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比,大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量:如表5、圖5所示,2mg、6mg組大鼠在經(jīng)過順鉑注射后卵巢重量相比對(duì)照組,都有不同程度縮減,其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p<),4mg、6mg組無明顯差異。表5④動(dòng)情周期觀察(陰道涂片):3mg組動(dòng)物死亡時(shí)間早,無完整的動(dòng)情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動(dòng)情周期4-5天。分為四個(gè)階段,動(dòng)情前期:撇圓形有核上皮細(xì)胞占絕大多數(shù),白細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖a)。動(dòng)情期:角化上皮細(xì)胞占多大多數(shù),由散在增至集白細(xì)胞和有核上皮細(xì)胞很少(圖b)。動(dòng)情后期:片狀角化上皮細(xì)胞,有核上皮細(xì)胞和白細(xì)胞3種都有,無太大差異(圖c)。動(dòng)情間期:白細(xì)胞占絕大多數(shù),有核上皮細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖d)。表6⑤病理結(jié)果:如圖7所示
水楊酸性胃潰瘍模型:大鼠禁食后水楊酸灌胃。4、結(jié)扎幽門法潰瘍模型:大鼠麻醉后在無菌技術(shù)下結(jié)扎幽門。此模型適合做探索抗?jié)儾∷幬镅芯亢臀笣儼l(fā)病機(jī)制方面的研究。三、動(dòng)物模型(animalmodelofhypertension)1、腎動(dòng)脈狹窄性模型:在腎動(dòng)脈上造成腎動(dòng)脈狹窄。如果是單側(cè)腎動(dòng)脈狹窄,則在間隔10~12d后將另一側(cè)腎摘除。手術(shù)幾天后,血壓開始升高,1~3個(gè)月后血壓升至高峰,并可長(zhǎng)期維持下去。2、腎外包扎性模型:腎外異物包扎,壓迫腎實(shí)質(zhì),造成腎組織缺血,使腎素形成增加,血壓上升。3、應(yīng)激性模型:應(yīng)激性大鼠模型常采用噪聲和足底電擊的復(fù)合刺激,每天2次,每次2h,約20d大鼠可形成動(dòng)物模型作為人類疾病的縮影。
模型小鼠與對(duì)照小鼠BALF中各類細(xì)胞因子的表達(dá)水平對(duì)比6.2.2肺組織病理學(xué)檢測(cè)HE染色檢測(cè):待造模完成后,腹腔麻醉小鼠后,開胸暴露胸腔:取左側(cè)肺葉固定于10%甲醛溶液24h,常規(guī)脫水石蠟包埋,切片行HE染色,光鏡下觀察。結(jié)果顯示:空白對(duì)照組小鼠肺泡結(jié)構(gòu)清晰,肺泡大小均勻,氣道黏膜上皮結(jié)構(gòu)完整,纖毛排列整齊;模型對(duì)照組小鼠肺組織肺間隔增厚,支氣管部分上皮細(xì)胞脫落,有淋巴細(xì)胞浸潤。模型小鼠(右)相對(duì)于對(duì)照組小鼠肺部組織HE染色對(duì)比阿爾辛藍(lán)—過碘酸雪夫氏染色(AB-PAS染色)檢測(cè):待造模完成后,腹腔麻醉小鼠后,開胸暴露胸腔:取左側(cè)肺葉固定于10%甲醛溶液24h,常規(guī)脫水石蠟包埋脫蠟至水,切片行AB-PAS染色,光鏡下觀察。大鼠疾病建模請(qǐng)找上海東寰。嘉定區(qū)阿爾茲海默癥疾病動(dòng)物模型建模
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流水線作業(yè),這樣能節(jié)省時(shí)間,并且能保證樣品的質(zhì)量。如果請(qǐng)人,每個(gè)人需要負(fù)責(zé)哪一板塊的工作,比如誰負(fù)責(zé)麻醉,誰負(fù)責(zé)取血液,誰負(fù)責(zé)取,誰負(fù)責(zé)拍照、誰負(fù)責(zé)儲(chǔ)存,都需要提前規(guī)劃交代清楚。實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測(cè)如果是需要自己做的檢測(cè),比如常見的WesternBlot、PCR,建議提前可以看看教程(無論是視頻還是貼吧,都要自己多方參考)。有了一定的理論基礎(chǔ)后,再向老師、師兄師姐學(xué)習(xí)經(jīng)驗(yàn)和技術(shù),如果實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的儀器需要提前預(yù)約,建議提前規(guī)劃好使用的時(shí)間。反復(fù)總結(jié)尋找答案在整個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)的過程中可能會(huì)出現(xiàn)很多問題。比如造模效果欠佳、灌胃操作不當(dāng)、腹腔注射操作失誤、使用不當(dāng)?shù)纫饎?dòng)物死亡。每遇到問題都需要自己想辦法解決,可以從導(dǎo)師、師兄師姐、文獻(xiàn)、貼吧、視頻教程等找到答案。比如筆者曾遇到同樣的給藥,發(fā)現(xiàn)有的大鼠麻醉得很深,有的大鼠還活蹦亂跳,在反復(fù)嘗試調(diào)整濃度,給藥劑量,更換麻醉方式,后來才發(fā)現(xiàn)是動(dòng)物體重秤的準(zhǔn)度有問題,導(dǎo)致體重秤得不準(zhǔn)。因此,需要自己反復(fù)琢磨到底是實(shí)驗(yàn)過程中哪一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題,逐一排除。也要求在每一個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟需要標(biāo)準(zhǔn)化,統(tǒng)一化,盡可能的排除干擾因素,這樣方便在遇到問題快的找到答案。同時(shí),建議每日總結(jié)。長(zhǎng)寧區(qū)品牌疾病動(dòng)物模型建模