用PBS沖洗沉淀物,然后用Diff-Quik染色液染色,在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞分類,觀察計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。5.2.4肺損傷后的組織病理觀察:取左肺4%多聚甲醛固定,然后將肺組織常規(guī)脫水,石蠟包埋,切片(厚度為5μm),HE染色。HE染色肺組織學(xué)評(píng)價(jià)可以直觀的反應(yīng)肺損傷的程度,ALI組織病理學(xué)主要表現(xiàn)為肺泡中性粒細(xì)胞及紅細(xì)胞的滲出,肺泡壁透明膜的形成。HE染色后可在低倍鏡下觀察到整個(gè)左肺組織的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、水腫以及損傷,評(píng)估肺部損傷分布情況;而高倍鏡下則可以對(duì)肺泡結(jié)構(gòu)進(jìn)行辨認(rèn),對(duì)肺損傷程度進(jìn)行評(píng)估和評(píng)分。評(píng)分方法:取6個(gè)視野進(jìn)行出血及水腫評(píng)分。0分:沒有損傷1分:<25%的損傷面積2分:25%~50%的損傷面積3分:50%~75%的損傷面積4分:>75%的損傷面積便于研究者按實(shí)驗(yàn)?zāi)康男枰S時(shí)采取各種樣品。奉賢區(qū)裸鼠疾病動(dòng)物模型建模
可比性一般疾病多為零散發(fā)生,在同一時(shí)期內(nèi),很難獲得一定數(shù)量的定性材料,而模型動(dòng)物不僅在群體數(shù)量上容易得到滿足,而且可以在方法學(xué)上嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,在對(duì)飼養(yǎng)條件及遺傳、微生物、營(yíng)養(yǎng)等因素嚴(yán)格控制的情況下,通過物理、化學(xué)或生物因素的作用,限制實(shí)驗(yàn)的可變因子,并排除研究過程中其它因素的影響,取得條件一致的、數(shù)量較大的模型材料,從而提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可比性和重復(fù)性,使所得到的成果更準(zhǔn)確更深入。折疊意義4有助于認(rèn)識(shí)疾病的本質(zhì)在臨床上研究疾病的本質(zhì)難免帶有一定局限性。奉賢區(qū)哪家公司提供疾病動(dòng)物模型建模生物醫(yī)學(xué)研究的進(jìn)展常常依賴于使用動(dòng)物模型作為實(shí)驗(yàn)假說和臨床假說二者的試驗(yàn)基礎(chǔ)。
引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發(fā)明根據(jù)“順鉑可誘導(dǎo)卵巢細(xì)胞凋亡,引起組織壞死,從而導(dǎo)致卵巢功能早衰”這一原理,使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動(dòng)物模型,并對(duì)比各種方法間的優(yōu)劣性,篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時(shí)間,為篩選順鉑導(dǎo)致的卵巢早衰動(dòng)物模型比較好劑量提供了一種操作簡(jiǎn)單,成功率高,結(jié)果可靠的實(shí)驗(yàn)方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法:將劑量為按體重一日2~3mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:連續(xù)施用7天,末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型?;颍簩┝繛榘大w重4~6mg/kg的順鉑施用于大鼠,施用方式為腹腔注射,施用方法:第1天、第8天施用;末次注射后第15天,得大鼠卵巢早衰模型。進(jìn)一步地,可將順鉑溶于%氯化鈉溶液配置成順鉑注射液,然后注射。所述順鉑,可市場(chǎng)常規(guī)購(gòu)買得到,比如齊魯制藥公司生產(chǎn)的順鉑。進(jìn)一步地,注射期間每天稱量大鼠體重,注射后每周稱量2次;末次注射后15天,麻醉取血檢測(cè)***水平,取卵巢檢測(cè)對(duì)比卵巢重量。
人類各種疾病的發(fā)展是十分復(fù)雜的,要深入探討其疾病的發(fā)病機(jī)理及療效機(jī)理不能也不應(yīng)該在病人身上進(jìn)行??梢酝ㄟ^對(duì)動(dòng)物各種疾病和生命現(xiàn)象的研究,進(jìn)而推用到人類,探索人類生命的奧秘,以控制人類的疾病的衰老,延長(zhǎng)人類的壽命。人類疾病的動(dòng)物模型(AnimalModelofHumanDiseases)是生物醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中所建立的具有人類疾病模似性表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和材料。使用動(dòng)物模型是現(xiàn)物醫(yī)學(xué)研究中的一個(gè)極為重要的實(shí)驗(yàn)方法和手段,有助于更方便、更有效地認(rèn)識(shí)人類疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律和研究防治措施。通過小鼠疾病模型的構(gòu)建有助于我們深入揭示潛在致病基因作用機(jī)制。
動(dòng)物模型名稱:腹主動(dòng)脈縮窄致心衰大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:180~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法:采用主動(dòng)脈縮窄法建立模型大鼠麻醉后,仰臥位固定、去腹毛、消毒,沿腹正中線切開皮膚及肌層,分離出腹主動(dòng)脈,在腎動(dòng)脈上方將腹主動(dòng)脈與鈍頭8號(hào)探針一起結(jié)扎后,小心抽出針頭。手術(shù)造模后大鼠正常飼養(yǎng)3個(gè)月。大鼠終末體重(BW),心室重(VW),計(jì)算心體比(VW/BW),并進(jìn)行心功能檢測(cè),包括心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)及左室最大壓力上升及下降速度(±dp/dtmax),并對(duì)心肌組織進(jìn)行病理學(xué)檢測(cè).2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):模型組大鼠VW/BW明顯增加,LVSP明顯降低,LVEDP明顯升高,±dp/dtmax則***減小,與正常對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明心肌出現(xiàn)典型心衰樣病理改變。疾病動(dòng)物模型建模有加些方式?纖維化疾病動(dòng)物模型建模供應(yīng)商
上海東寰疾病動(dòng)物模型建模。奉賢區(qū)裸鼠疾病動(dòng)物模型建模
可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種變化和修飾。本發(fā)明對(duì)試驗(yàn)中所使用到的材料以及試驗(yàn)方法進(jìn)行一般性和/或具體的描述。雖然為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的,但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細(xì)描述。下述實(shí)施例中所涉及的儀器、試劑、材料等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等,可通過正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實(shí)施例中所涉及的實(shí)驗(yàn)方法,檢測(cè)方法等,若無特別說明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法,檢測(cè)方法等。實(shí)施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中,配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實(shí)施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中,配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實(shí)施例3建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液25ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中,配制成4mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實(shí)施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中。奉賢區(qū)裸鼠疾病動(dòng)物模型建模