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黃浦區(qū)酒精肝疾病動(dòng)物模型建模

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-10-26

1、動(dòng)物模型名稱(chēng):放血致失血性貧血小鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:KM小鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:約4周齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:18~22g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí) 1、實(shí)驗(yàn)方法:眼眶靜脈叢放血法。小鼠通過(guò)眼眶靜脈叢放血,0.5mL/只,并測(cè)外周血紅細(xì)胞總數(shù)(RBC)及血紅蛋白含量(Hb)。24h后所有小鼠眼眶靜脈叢**檢測(cè)外周血RBC總數(shù)及Hb含量。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):模型組小鼠放血后24小時(shí)的外周血RBC總數(shù)及Hb含量較放血前明顯下降,低于正常值參考值,且與正常對(duì)照組比較具***性差異(P<0.05),表明成功構(gòu)建了失血性貧血?jiǎng)游锬P驮炷?。明確研究疾病的獨(dú)特資源確定小鼠疾病模型的初步選擇。黃浦區(qū)酒精肝疾病動(dòng)物模型建模

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    步驟3、pmsg處理c57bl/6雌性小鼠(6周齡,平均體重20g),46h后注射hcg,與雄性小鼠合籠交配,次日取受精卵進(jìn)行顯微注射,將步驟1的grna1、grna2、cas9蛋白以及線(xiàn)性化后的打靶載體一起注射到受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠體內(nèi),產(chǎn)出小鼠,即f0代小鼠。上述步驟中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl,cas9蛋白購(gòu)自newenglandbiolabs,貨號(hào)為m0386m。步驟4、提取f0代小鼠尾部dna,pcr擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序,鑒定是否為嵌合體。本發(fā)明用于f0代小鼠pirb基因pcr鑒定的特異性引物如下:pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1對(duì)應(yīng)的擴(kuò)增產(chǎn)物大小為,primers2對(duì)應(yīng)的擴(kuò)增產(chǎn)物為。用于f0代小鼠測(cè)序的引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。酒精肝疾病動(dòng)物模型建模評(píng)價(jià)上海東寰提供動(dòng)物模型構(gòu)建過(guò)程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。

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1、自發(fā)性**動(dòng)物模型:未經(jīng)人為處理;自然發(fā)生;自發(fā)性**的總體評(píng)價(jià)--動(dòng)物自發(fā)性**的病因往往是由動(dòng)物的遺傳特性決定的與人癢的病因有較大距離。各動(dòng)物**生長(zhǎng)速度差異較大很難在限定時(shí)間內(nèi)獲得大量生長(zhǎng)均勻的荷瘤動(dòng)物(tumor-bearinganimals)。因此,自發(fā)性**動(dòng)物模型很少在抗**藥物的常規(guī)篩選中廣泛應(yīng)用。2、誘發(fā)性**動(dòng)物模型:在實(shí)驗(yàn)條件下:使用致*物(carcinogens);誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生**animalmodelofinducedtumor)指使用致*因素(carcinogens)在實(shí)驗(yàn)條件下誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生**的動(dòng)物模型,它是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)**學(xué)研究的常用方法。常用于驗(yàn)證可疑致*因素的作用也越來(lái)越多地應(yīng)用干**發(fā)生機(jī)理的研究及防治效果的觀(guān)察上,在**病因?qū)W、遺傳學(xué)、生物學(xué)等方面的研究中有重要地位。由于誘發(fā)因素和條件可人為控制,誘發(fā)率遠(yuǎn)高于自然發(fā)病率故在**實(shí)驗(yàn)研究中優(yōu)于自發(fā)瘤。用于誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性**的動(dòng)物種類(lèi)很多,它們因種族不同而對(duì)相同致*因素有不同的反應(yīng)性。常用的動(dòng)物以哺乳動(dòng)物為主,其中嚙齒類(lèi)動(dòng)物的使用**多,應(yīng)用**廣,包括各種大鼠、小鼠、際鼠等。。

    PMID:15082495、7561688)①HE染色②關(guān)節(jié)側(cè)視圖③PCR鑒定、二、糖尿病相關(guān)動(dòng)物模型1.糖尿病***1)模型構(gòu)建(PMID:30826357)使用鏈佐星(STZ)注射ApoE-/-小鼠,建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型,同時(shí)與ApoE-/-小鼠采用高脂喂養(yǎng)18周2)模型檢測(cè)指標(biāo)(PMID:29107826、28345659)3)生化指標(biāo)檢測(cè)4)超聲檢測(cè)5)主動(dòng)脈染色檢測(cè)2.糖尿病心肌病1)誘發(fā)性DCM模型模型構(gòu)建(PMID:29732743)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:大鼠方法:各大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1,pH,現(xiàn)配現(xiàn)用),并給予高脂飼料進(jìn)行喂養(yǎng)。①模型檢測(cè)指標(biāo)血糖檢測(cè)②HE染色③超聲心電圖2)自發(fā)性1型DCM模型3)自發(fā)性2型DCM模型3.糖尿病視網(wǎng)膜病變1)模型構(gòu)建PMID:30862093實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:小鼠方法:糖尿病雄性db/db(+/+Leprdb/J)小鼠。喂養(yǎng)至21周2)模型檢測(cè)指標(biāo)①膠質(zhì)原纖維酸性蛋白染色②TUNEL和HE染色DR組視網(wǎng)膜組織內(nèi)核層及外核層結(jié)構(gòu)松散,細(xì)胞排列紊亂GCL,神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層;INL,內(nèi)核層;ONL,外核層三、動(dòng)物模型構(gòu)建總結(jié)1.臨床資料合理性在納入臨床資料時(shí),需關(guān)注特定疾病患者的流行病學(xué)趨勢(shì),即疾病易發(fā)年齡,男女比例等,同時(shí)需考慮是否與體重、基因表達(dá)等具有相關(guān)性。2.模型合理性選擇合適,簡(jiǎn)便。上海東寰告訴您如何選擇好的動(dòng)物模型。

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誘發(fā)性**模型的原理是利用外源性致*因素引起細(xì)胞遺傳特性異常而呈現(xiàn)出異常生長(zhǎng)和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化學(xué)性、物理性及生物性致*物,而化學(xué)性致*物(chemicalcarcinogens)**常見(jiàn),已確知的多達(dá)一千余種,用于誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性**的種類(lèi)亦很多,如苯并薩,申基膽菌、聯(lián)苯胺、亞硝胺類(lèi)、黃曲霉***類(lèi)。各種致癢物的致*強(qiáng)度、致*譜等特性相差較大,同一種致*物經(jīng)不同途徑給藥所致**部位或類(lèi)型可有很大差異。有些化學(xué)性致*物具有明顯的親***或組織特性。因此,實(shí)驗(yàn)工作中應(yīng)根據(jù)需要選用適當(dāng)致*物和致*途徑,并確定其他影響因素或?qū)嶒?yàn)條件。基本原理:利用外源性致*物引起細(xì)胞遺傳特性改變,從而出現(xiàn)異常生長(zhǎng)和高增殖活性細(xì)胞形成**。外源性致*物主要有化學(xué)性、物理性(如放射性物質(zhì))及生物性(如誘發(fā)動(dòng)物**的病毒),其中以化學(xué)性致*物**為常用能夠準(zhǔn)確模擬人相關(guān)特定功能與疾病特征。鹽城裸鼠疾病動(dòng)物模型建模

可以嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)材料的可比性。黃浦區(qū)酒精肝疾病動(dòng)物模型建模

1、動(dòng)物模型名稱(chēng):膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:200~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí) 1、實(shí)驗(yàn)方法:用膽管結(jié)扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3%戊巴比妥鈉麻醉,腹部皮膚消毒,無(wú)菌操作沿腹部正中線(xiàn)剪開(kāi)腹腔,分離出膽管,在膽管近端和遠(yuǎn)端2處結(jié)扎膽管。手術(shù)后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分:0分:無(wú)明顯病變;1分:呈局灶性分布,受累面積在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面積在30%-70%之間者;3分:呈彌漫性分布,受累面積在70%以上者。統(tǒng)計(jì)分析:每份標(biāo)本在低倍視野(10×10)下依次選取左上、右上、左下、右下、中間5個(gè)視野(共1.5mm2)進(jìn)行觀(guān)察,測(cè)定并計(jì)算視野內(nèi)小膽管伴纖維組織增生總面積。黃浦區(qū)酒精肝疾病動(dòng)物模型建模

上海東寰生物科技有限公司坐落在上海市嘉定區(qū)興賢路1180號(hào)5幢2樓206室,是一家專(zhuān)業(yè)的經(jīng)營(yíng)范圍為:從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)服務(wù)?;ぎa(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用物品、易制毒化學(xué)品)的銷(xiāo)售。【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門(mén)批準(zhǔn)后方可開(kāi)展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】。公司。目前我公司在職員工以90后為主,是一個(gè)有活力有能力有創(chuàng)新精神的團(tuán)隊(duì)。公司業(yè)務(wù)范圍主要包括:原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測(cè)試劑盒,動(dòng)物疾病模型等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營(yíng)宗旨,深受客戶(hù)好評(píng)。公司深耕原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測(cè)試劑盒,動(dòng)物疾病模型,正積蓄著更大的能量,向更廣闊的空間、更寬泛的領(lǐng)域拓展。

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上海東寰生物科技有限公司于2015年09月24日成立。法定代表人席其良,公司經(jīng)營(yíng)范圍包括:從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)服務(wù),化工產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用物品、易制毒化學(xué)品)的銷(xiāo)售等。