引起組織壞死，從而導(dǎo)致卵巢功能早衰。技術(shù)實現(xiàn)要素：針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法。本發(fā)明根據(jù)“順鉑可誘導(dǎo)卵巢細(xì)胞凋亡，引起組織壞死，從而導(dǎo)致卵巢功能早衰”這一原理，使用不同濃度及不同方法建立了化療性損傷卵巢早衰動物模型，并對比各種方法間的優(yōu)劣性，篩選出順鉑比較好的濃度及給藥時間，為篩選順鉑導(dǎo)致的卵巢早衰動物模型比較好劑量提供了一種操作簡單，成功率高，結(jié)果可靠的實驗方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：一種利用順鉑建立大鼠卵巢早衰模型的方法：將劑量為按體重一日2～3mg/kg的順鉑施用于大鼠，施用方式為腹腔注射，施用方法：連續(xù)施用7天，末次注射后第15天，得大鼠卵巢早衰模型。或：將劑量為按體重4～6mg/kg的順鉑施用于大鼠，施用方式為腹腔注射，施用方法：第1天、第8天施用；末次注射后第15天，得大鼠卵巢早衰模型。進(jìn)一步地，可將順鉑溶于％氯化鈉溶液配置成順鉑注射液，然后注射。所述順鉑，可市場常規(guī)購買得到，比如齊魯制藥公司生產(chǎn)的順鉑。進(jìn)一步地，注射期間每天稱量大鼠體重，注射后每周稱量2次；末次注射后15天，麻醉取血檢測***水平，取卵巢檢測對比卵巢重量。疾病動物模型建模實驗室。江蘇C57小鼠疾病動物模型建模

2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升，同樣，只有2mg組有明顯升高(p＜)，如圖3所示。表3表4②體重變化：(mean±sd)，如圖4所示：2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比，大鼠體重***下降(p＜，注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比，大鼠體重***下降(p＜，注射第4天開始)，直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比，大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p＜)，4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量：如表5、圖5所示，2mg、6mg組大鼠在經(jīng)過順鉑注射后卵巢重量相比對照組，都有不同程度縮減，其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p＜)，4mg、6mg組無明顯差異。表5④動情周期觀察(陰道涂片)：3mg組動物死亡時間早，無完整的動情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動情周期4-5天。分為四個階段，動情前期：撇圓形有核上皮細(xì)胞占絕大多數(shù)，白細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖a)。動情期：角化上皮細(xì)胞占多大多數(shù)，由散在增至集白細(xì)胞和有核上皮細(xì)胞很少(圖b)。動情后期：片狀角化上皮細(xì)胞，有核上皮細(xì)胞和白細(xì)胞3種都有，無太大差異(圖c)。動情間期：白細(xì)胞占絕大多數(shù)，有核上皮細(xì)胞和角化上皮細(xì)胞很少(圖d)。酒精肝疾病動物模型建模價格開展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步結(jié)果與生物學(xué)信息資料等相關(guān)知識間的差距！

動物模型名稱：酒精誘導(dǎo)的肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雄性4、實驗動物年齡：5周5、實驗動物體重：150g-160g6、實驗動物環(huán)境：SPF級。1、實驗方法：用酒精誘導(dǎo)法。大鼠每天按10mL/kg體重灌服酒精混合物（酒精：吡唑：玉米油＝10mL：25mg：2mL）造模，每周2次按0.3mL/kg劑量腹腔注射給予CCl4:橄欖油＝1：3，連續(xù)灌服60天。解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：肝組織可見肝硬化病理改變（S1級~S4級）。

r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步驟4、鑒定為pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周齡、雌性小鼠6周齡分別與野生型異性小鼠交配獲得f1代雜合子小鼠，圖2為本發(fā)明f1代雜合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程圖，小鼠出生后20天進(jìn)行pcr鑒定，若有陽性小鼠出生，則表示轉(zhuǎn)基因已經(jīng)整合到生殖細(xì)胞。(1)通過pcr方法對獲得的f1代小鼠進(jìn)行基因型的鑒定：(a)dna的提取：方法1：采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()來獲得高純度的基因組dna。步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2～5mm)，放入離心管中，加入180μlbuffergl，20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步驟b.將步驟a離心管內(nèi)于56℃孵育過夜。步驟c.過夜后12000rpm離心2min去除雜質(zhì)。步驟d.加入200μlbuffergb和200μl無水乙醇，充分混勻。步驟e.將吸附柱放在收集管上，將步驟d得到的樣品加到吸附柱里，12000rpm離心2min，棄掉收集管中液體。步驟f.棄去液體后在吸附柱中加入500μlbufferwa，12000rpm離心1min，棄掉收集管中液體。步驟g.在收集管中加入700μlbufferwb，12000rpm離心1min。棄掉收集管中液體。注意：bufferwb需要與100％乙醇預(yù)混，沿管壁加入bufferwb沖走殘余的鹽。步驟h.重復(fù)步驟g一次。上海東寰為您提供完善的大鼠動物疾病模型。

    ng）=×片段堿基對數(shù)（單片段）；適片段用量（ng）=×片段堿基對數(shù)（多片段）。注1：單片段重組反應(yīng)，若單個插入片段的長度大于載體，則應(yīng)將載體與插入片段的計算公式互換；注2：單片段重組反應(yīng)，若單個插入片段的長度小于200bp，則插入片段應(yīng)使用5倍的用量；注3：多片段重組反應(yīng)，各個插入片段的用量應(yīng)不少于10ng，使用上述公式計算適使用量低于此值時，直接使用10ng；注4：若按上述公式計算出的線性化載體用量低于50ng或高于200ng，建議按50ng或200ng用量使用；注5：線性化載體過長，插入片段過長或片段數(shù)過多，克隆陽性率均會降低。2、體系反應(yīng)；1、配制完成后，用移液器輕輕吸打混勻各組分，避免產(chǎn)生氣泡，切勿渦旋；2、將反應(yīng)體系置于50℃，反應(yīng)5~60min。3、將反應(yīng)液離心管置于冰上冷卻，之后進(jìn)行轉(zhuǎn)化或者儲存于-20℃注1：推薦使用PCR儀等溫控的儀器進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)時間不足或太長克隆效率均會降低；注2：插入1~2個片段時，推薦反應(yīng)時間為5~1min；插入3~5個片段時，推薦反應(yīng)時間為15~30min；注3：當(dāng)載體骨架在10kb以上或插入片段總長在4kb以上時，推薦延長反應(yīng)時間至30~60min；注4：建議在50℃反應(yīng)完成后進(jìn)行瞬時離心，將反應(yīng)液收集至管底。注5：-20℃儲存的重組產(chǎn)物。確定研究疾病目的了解影響疾病發(fā)生的內(nèi)在與外在因素。浦東新區(qū)非酒肝疾病動物模型建模

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水楊酸性胃潰瘍模型：大鼠禁食后水楊酸灌胃。4、結(jié)扎幽門法潰瘍模型：大鼠麻醉后在無菌技術(shù)下結(jié)扎幽門。此模型適合做探索抗?jié)儾∷幬镅芯亢臀笣儼l(fā)病機制方面的研究。三、動物模型（animalmodelofhypertension）1、腎動脈狹窄性模型：在腎動脈上造成腎動脈狹窄。如果是單側(cè)腎動脈狹窄，則在間隔10～12d后將另一側(cè)腎摘除。手術(shù)幾天后，血壓開始升高，1～3個月后血壓升至高峰，并可長期維持下去。2、腎外包扎性模型：腎外異物包扎，壓迫腎實質(zhì)，造成腎組織缺血，使腎素形成增加，血壓上升。3、應(yīng)激性模型：應(yīng)激性大鼠模型常采用噪聲和足底電擊的復(fù)合刺激，每天2次，每次2h，約20d大鼠可形成江蘇C57小鼠疾病動物模型建模