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徐州面癱疾病動(dòng)物模型建模

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-08-02

    特發(fā)性肺纖維化(IPF)小鼠模型建立一、目的:博萊霉素致肺纖維化模型建立二、材料:博萊霉素藥液配制:4mg/ml();三、方法:1、BALB/c小鼠麻醉,6-8周齡,體重20~25g,仰臥固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,頸部去毛后酒精消毒,切開皮膚,逐層暴露氣管;2、將1mL注射器經(jīng)兩氣管軟骨環(huán)間隙朝向心端刺入氣管,回抽無阻力;3、注入博萊霉素(約4~5mg/kg)再向氣管內(nèi)注入~3次,使藥物在肺部分布均勻;4、以大鼠身體長軸為中心,正反快速旋轉(zhuǎn)鼠板1~2分鐘??p合皮膚,局部聚維酮碘消毒(或用青霉素消毒)防止,室溫保持在24~25℃,待動(dòng)物自然清醒后置籠內(nèi)常規(guī)飼養(yǎng)。肺纖維化模型發(fā)展時(shí)間:2周可見肺系數(shù)(肺重/體重×100%)、羥脯氨酸含量明顯升高。顯微鏡下可見炎癥細(xì)胞浸潤,以淋巴細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞為主,并有肺泡壁增厚、成纖維細(xì)胞增生等Ⅱ級(jí)肺泡炎表現(xiàn)4周可見肺間質(zhì)內(nèi)有大量散在綠染的膠原纖維,肺泡結(jié)構(gòu)破壞,見有許多纖維細(xì)胞等Ⅲ級(jí)肺間質(zhì)纖維化病變。大鼠模型病理組織學(xué)與病理生理學(xué)改變與人類肺間質(zhì)纖維化相似。其病變?cè)缙诒憩F(xiàn)為滲出性肺泡炎,炎癥細(xì)胞在病變處聚集增多。晚期為肺間質(zhì)纖維化,間質(zhì)細(xì)胞增生,基質(zhì)膠原聚集取代正常的肺組織結(jié)構(gòu)。四、檢測:組織病理切片HE染色。疾病動(dòng)物模型建模實(shí)驗(yàn)室。徐州面癱疾病動(dòng)物模型建模

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SPF級(jí)SD雄性大鼠,體重約200~220g。使用脂多糖(LPS)誘導(dǎo)建立急性肺損傷模型。將大鼠放入固定盒中,用酒精檫拭大鼠尾靜脈后,按壓住尾靜脈1/3處,注射器進(jìn)針后回抽有血后注入LPS溶液(溶于生理鹽水,給藥劑量10mg/kg),從而建立內(nèi)性急性肺損傷大鼠模型。對(duì)照組的大鼠尾靜脈注射等體積的生理鹽水。5.2模型鑒定及后續(xù)檢測:5.2.1肺損傷后的目視觀察:如下圖所示,在急性肺損傷模型小鼠中,肺部有多處明顯滲血,后有肉眼可見肺部大面積出血滲出,可以直觀的反映肺損傷程度。浦東新區(qū)哪一家疾病動(dòng)物模型建模什么是疾病動(dòng)物模型建模?

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    實(shí)驗(yàn)樣本分類實(shí)驗(yàn)一般采取樣本有:血液樣本、組織樣本和細(xì)胞樣本。通常,組織樣本采集后,應(yīng)立即用等滲溶液(PBS或生理鹽水)盡量把血液漂洗干凈(除非血液也是分析對(duì)象),用濾紙或紗布吸干,把樣本分切成幾分,每份的體積約2個(gè)黃豆大小,每份用一個(gè)管子裝。血液樣本的采集應(yīng)根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)的要求,將會(huì)采取不同策略。血清樣本:全血中不加抗凝劑,血液凝固后取出的不含凝血因子的淡黃色透明液體。(全血標(biāo)本室溫放置2小時(shí)3000rpm/min離心15min)血漿樣本:全血中加抗凝劑,血液凝固后取出的含凝血因子的淡黃色透明液體。(可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,3000rpm/min離心15min)如果是做生化\ELISA等檢測可以考慮血漿和血清,根據(jù)獲得的樣本量可考慮分裝成100-500μl/管,可避免反復(fù)凍融造成的檢測誤差。生化:建議優(yōu)先選擇血清,其次選擇肝素抗凝血漿;ELISA:建議優(yōu)先選擇血清,其次選擇肝素或EDTA抗凝血漿;凝血實(shí)驗(yàn):只能選擇枸櫞酸鈉抗凝血漿;血常規(guī):只能選擇EDTA抗凝全血;如果要收集其中的白細(xì)胞、血小板等建議用抗凝全血。如果要做流式建議用專門的流式用血液收集管,防止表面抗原的丟失,或者盡快安排就近檢測。樣本處理取樣完后。

因此,應(yīng)用動(dòng)物模型,除了能克服在人類研究中經(jīng)常會(huì)遇到的理論和社會(huì)限制外,還容許采用某些不能應(yīng)用于人類的方法學(xué)途徑,甚至為了研究需要可以損傷動(dòng)物組織、或處死動(dòng)物。(二)臨床上平時(shí)不易見到的疾病可用動(dòng)物隨時(shí)復(fù)制出來臨床上平時(shí)很難收集到放射病、毒氣中毒、烈性傳染病等病人,而實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)研究目的要求隨時(shí)采用實(shí)驗(yàn)性誘發(fā)的方法在動(dòng)物身上復(fù)制出來。(三)可以克服人類某些疾病潛伏期長,病程長和發(fā)病率低的缺點(diǎn)一般遺傳性、免疫性、代謝性和內(nèi)分泌等疾病在臨床上發(fā)病率很低,例如急性白血病的發(fā)病率較降,研究人員可以有意識(shí)地提高其在動(dòng)物種群的中發(fā)生頻率,從而推進(jìn)研究。同樣的途徑已成功地應(yīng)用于其他疾病的研究,如血友病、周期性中性白細(xì)胞減少癥和自身免疫介導(dǎo)性疾病等。可以簡化實(shí)驗(yàn)操作和樣品收集。

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呼吸系統(tǒng)H01代碼下分為18個(gè)小類,筆者瀏覽近五年面上項(xiàng)目,大致篩選出各個(gè)代碼下常見的研究方向或疾病(畢竟只是人工篩選,準(zhǔn)確性欠佳,敬請(qǐng)諒解)。接下來為大家介紹研究較多的幾個(gè)疾病的常見造模方法,分別為、COPD、急性肺損傷、肺纖維化、肺動(dòng)脈高壓。動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:小鼠、大鼠、豚鼠造模試劑:卵清蛋白(OVA)、HDM(塵螨)獲得方式:一般自己構(gòu)建。在造模過程先采用抗原致敏(腹腔注射OVA和氫氧化鋁混合物或者鼻內(nèi)滴入HDM)使動(dòng)物機(jī)體內(nèi)存在致敏物,然后氣道局部激發(fā)(反復(fù)霧化或者滴鼻激發(fā)),誘導(dǎo)。上海東寰可以做疾病動(dòng)物模型建模。青浦區(qū)疾病動(dòng)物模型建模供應(yīng)商

動(dòng)物疾病模型廣泛應(yīng)用于疾病機(jī)制研究。徐州面癱疾病動(dòng)物模型建模

動(dòng)物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面。(一)避免了在人身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)所帶來的風(fēng)險(xiǎn)臨床上對(duì)外傷、中毒、腫痛病因等研究是有一定困難的,甚至是不可能的,如急性和慢性呼吸系統(tǒng)疾病研究進(jìn)很難重復(fù)環(huán)境污染的作用。輻射對(duì)機(jī)體的損傷也不可能在人身上反復(fù)實(shí)驗(yàn)。而動(dòng)物可以作為人類的替難者,在人為設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)條件下反復(fù)觀察和研究。因此,應(yīng)用動(dòng)物模型,除了能克服在人類研究中經(jīng)常會(huì)遇到的理論和社會(huì)限制外,還容許采用某些不能應(yīng)用于人類的方法學(xué)途徑,甚至為了研究需要可以損傷動(dòng)物組織、或處死動(dòng)物。(二)臨床上平時(shí)不易見到的疾病可用動(dòng)物隨時(shí)復(fù)制出來臨床上平時(shí)很難收集到放射病、毒氣中毒、烈性傳染病等病人,而實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)研究目的要求隨時(shí)采用實(shí)驗(yàn)性誘發(fā)的方法在動(dòng)物身上復(fù)制出來。徐州面癱疾病動(dòng)物模型建模