EdU(5-Ethynyl-2’- deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細胞DNA復(fù)制活性,適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細胞標記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU與T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細胞和組織水平更準確地反映DNA復(fù)制活性。上海東寰向您介紹EdU細胞增殖檢測試劑盒的好處。河北品質(zhì)好的EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好
該方法無需DNA變性,無需抗原修復(fù),無需抗原抗體反應(yīng),簡單、靈敏、快速、準確,適合各種細胞系的細胞增殖檢測,尤其適用于各種細胞系的高通量篩選實驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細胞增殖變化。EdU方法無需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術(shù),在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU細胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點。山東提供EdU細胞增殖檢測試劑盒公司上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒的應(yīng)用范圍。
與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細胞和組織水平能更準確地反映細胞增殖等現(xiàn)象。細胞增殖伴隨著多細胞生物生命體運作的一生,越來越多的研究者們已經(jīng)把目光集中到了細胞增殖檢測,關(guān)于細胞增殖檢測的方法也在不斷更新。EdU法檢測試劑盒是Brdu方法的**性突破。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。
EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。EdU細胞增殖檢測試劑盒的原理是什么?上海東寰告訴您。
目前,基于DNA的合成原理,人們*初開發(fā)了工具是BrdU染色法,但是這種方法操作耗時長,往往需要過夜處理細胞,操作繁雜,比如需要DNA變性、抗原修復(fù)以及抗原抗體反應(yīng)等操作,后來在BrdU的基礎(chǔ)上,人們開發(fā)出了**性的探針--EdU,這種方法不需要繁雜的操作,節(jié)約時間,且反應(yīng)更靈敏和準確。并且與MTT/WST-1或者CCK-8這種依靠化學顯色法只能得到一個折線圖的方法相比,EdU細胞增殖檢測法可以得到高清細胞增殖現(xiàn)象數(shù)據(jù)圖,可視化展示數(shù)據(jù)、更直觀、更具視覺效果!細胞增殖的能力是評價細胞、代謝、生理、病理狀況、細胞活性、基因毒性等的重要指標之一EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家便宜?上海東寰告訴您。咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒購買
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細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關(guān)鍵,在藥物開發(fā)階段常用來評估化學藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。通常根據(jù)平均DNA含量或細胞代謝參數(shù)進行細胞增殖檢測,此類分析可以報告出總細胞數(shù)目和活細胞數(shù)目,或者測定出單個細胞內(nèi)的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要基于細胞膜通透性,熒光團分子、染料進入細胞后,將會共價結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團上,從而使染料能夠長時間停留在細胞中。經(jīng)過之后的細胞分裂階段,各個子代細胞會從母細胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細胞儀對熒光強度進行分析,即可測定出自標記結(jié)合起,單個細胞或細胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。河北品質(zhì)好的EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好
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